重庆地区结核分枝杆菌异烟肼和丙硫异烟胺耐药及其交叉耐药相关基因突变研究

目的 研究结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼(INH)和丙硫异烟胺(Pto)的耐药情况,分析INH耐药相关基因(katG、inhA、ahpC、kasA)及与Pto交叉耐药相关基因的突变特点。方法 对233株INH耐药MTB临床分离株(37株对Pto同时耐药)的katG、inhA、ahpC、kasA基因进行扩增及序列分析。结果 耐异烟肼菌株中未发现katG完全缺失,223株 (96.5%)耐药株katG存在点突变、插入,其中 2个突变位点未见报道。195株 (83.6%)耐药株的第 315位点突变;189株 (81.1%)耐药株第463位点突变(R463L),其中166株 (71.2%)与第 315位点联合突变;在其他位点发生突变的菌株4株,包括D448G 1株、D419H 1株和2株同义突变。 11株(4.72%) INH耐药菌株中inhA点突变,包括S94A 1株、I194T 1株,C-15T 9株。37株Pto耐药的菌株中,8株点突变且均为inhA C-15T(4株为inhA单基因点突变C-15T,4株发生katG S315T和inhA C-15T的双基因联合突变)。全部耐药菌中有1株为ahpC基因突变,未发现有kasA基因突变。结论 进一步证实katG315和inhA-15基因位点突变与MTB对INH耐药密切相关;INH与Pto存在着交叉耐药,但耐药率较低,Pto耐药的发生与inhA-15位点突变密切相关。     

对氨基水杨酸异烟肼对耐INH及PAS结核菌株的耐药实验观察

目的　了解对氨基水杨酸异烟肼 (PSNZ)对耐异烟肼 (INH)及对氨基水杨酸钠 (PAS)的结核菌株耐药情况。方法 用改良罗氏培养基观察36株同时耐INH和PAS及149株对INH和PAS敏感的结核菌株对PSNZ药敏结果。结果 36株耐INH和PAS的结核菌株在1μg/ml浓度下有44.4%的菌株对PSNZ有效,149株对INH和PAS均敏感的结核菌株在1μg/ml浓度下有96%的结核菌株对PSNZ敏感。结论 PSNZ对耐INH和/或PAS的结核菌株仍显示一定程度的敏感,是一种独立的抗结核药物,可作为治疗耐多药结核病的有效药物之一。     

北京市肺结核病人耐药筛查实施效果的研究

目的 分析北京市利福平耐药结核病(RR-TB)诊断流程实施效果,为进一步完善耐药结核病的快速筛查和治疗提供依据。方法 选取 2019年1月至2019年12月在北京市结核病防治机构及定点医院就诊的表型药物敏感性试验为利福平耐药的86例肺结核患者,评价其诊疗过程中北京市耐药筛查工作的开展情况,并分析其临床分离株对利福平(RFP)、异烟肼(INH)、左氧氟沙星(LFX)的表型药敏试验的耐药情况。结果 2019年86例RR-TB中Xpert检出62例利福平耐药,Hain检测补充检出3例,另外3例阳性培养物直接进行了表型药敏试验,通过耐药筛查工作RR-TB患者的发现率为79.07%(68/86),漏诊率为20.93%(18/86)。其中,8例Xpert为利福平敏感而表型药敏为利福平耐药,漏筛率为11.63%(10/86)。RR-TB中准广泛耐药率为23.26%(20/86),初复治在3种不同耐药类型中差异无统计学意义。结论 北京市耐药筛查工作在RR-TB诊断中具有快速高效的特点,存在一定的分子耐药与表型不一致现象,且实施中工作落实有待提高,需进一步加强督促管理。pre-XDR-TB处于较高水平,应尽早开展氟喹诺酮的分子诊断。     

重庆市耐多药结核分枝杆菌对贝达喹啉和德拉马尼的药物敏感性研究

目的 分析重庆市耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)对贝达喹啉(bedaquiline,Bdq)和德拉马尼(delamanid,Dlm)的药物敏感性,以期为临床上Bdq和Dlm的合理使用提供参考。方法 收集2017年11月至2018年11月间经重庆市公共卫生医疗救治中心鉴定为MDR-TB的菌株,采用微孔板法测定Bdq和Dlm的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),并对相关结果进行分析。结果 所收集的111例MDR-TB临床分离株进行Bdq的药敏检测结果显示, MIC₅₀和MIC₉₀分别为0.016 mg/L和0.125 mg/L;109例MDR-TB菌株的Dlm药敏结果显示,MIC₅₀和MIC₉₀分别为0.016 mg/L和0.063 mg/L。各有5株菌株对Bdq和Dlm耐药,耐药率分别为4.50%和4.59%。不同耐药情况分组对Bdq和Dlm的耐药率与MDR-TB菌株对Bdq和Dlm的耐药率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 重庆市大部分MDR-TB菌株对这两种新的抗结核药物非常敏感,但不应忽视原发耐药,在制定临床治疗方案时,仍需重视对新药的药敏检测。     

山东省胸科医院住院病人耐药情况

目的　了解山东省胸科医院住院肺结核病人的耐药情况,以及城市、城镇、城市流动人口及农村居民结核病耐药的差异。方法 调查1991年1月至2000年12月在山东省胸科医院住院治疗痰结核菌培养阳性病人的居民身份,并对全部培养阳性菌株进行菌型鉴定及4种抗结核药物(INH、SM、RFP、EMB)的耐药性测试。结果 初始耐药率为17.7%,城市、城镇、城市流动人口、农村分别为9.5%,13.6%,15.2%和23.6%。获得性耐药率为85.4%,城市、城镇、城市流动人口、农村分别为77.6%,83.9%,87.5%和89.1%。结论 山东省胸科医院住院病人结核病耐药水平从高到低依次为农村、城市流动人口、城镇、城市。应加强农村和流动人口病人的治疗管理。     

内蒙古乌兰察布盟结核分枝杆菌耐药性监测研究

目的　掌握乌兰察布盟初始和获得性耐药水平。方法 采用整群抽样方法,由内蒙统一抽样,乌盟的集宁、凉城、化德为监测点。各监测点连续选 26个新发涂阳肺结核病例,期间的复治涂阳病例同时纳入,并对全部培养阳性菌株进行菌型鉴定及SM、INH、RFP、EMB4种抗结核药物的药敏试验。结果 共入选 107例培养阳性病例,总耐药率为 52.3%,其中初始耐药率 35.9%,获得性耐药率 76.7%。初始耐多药率为 7.8%,获得性耐多药率为 53.5%。结论 本地区耐药率均高于全国水平,特别是获得性耐药率高峰发生在 25～34岁青壮年,应引起高度重视。     

宁波市住院肺结核病人耐药情况分析

目的　了解宁波市住院肺结核病人的耐药情况,以及城市、城镇、城市流动人口及农村居民结核病的差异。方法 统计分析1992年1月-2003年12月在宁波保黎住院治疗的痰结核菌培养阳性病人的居民身份,并对全部培养阳性菌株进行菌型鉴定及4种抗结核药物(INH、SM、RFP、EMB)的耐药性测试。结果 初始耐药率为21.4%,其中城市11.5%、城镇14.1%、城市流动人口、19.4%和农村286%。获得性耐药率77.8%,其中城市、56.9%、城镇75%、城市流动人口85.7%和农村89%。结论 宁波保黎医院住院病人结核病耐药水平从高到底依次为农村、城市流动人口、城镇、城市。应加强农村和流动人口的治疗管理。     

1996—2006年南京地区结核病耐药状况分析

目的　了解南京地区近年来结核病耐药的发展趋势。方法 对1996—2006年南京市胸科医院肺结核病例采用绝对浓度间接法进行了10种常用抗结核药物的敏感试验并对结果进行分析。结果 各年每种抗结核药物的耐药率在一定范围内上下波动,但是耐多药率却是呈现逐步上升趋势,一线抗结核药物的耐药率明显高于二线抗结核药物的耐药率。结论 耐多药的发展趋势对目前以INH和RFP为主要抗结核药物的治疗方案构成了巨大的威胁,尽快开发新的低毒高效的抗结核药物是解决目前抗结核治疗困境的当务之急。     

猪链球菌9型分离株的耐药性及耐药基因分析

目的 了解猪链球菌9型(Streptococcus suis serotype 9,SS9)的耐药性和耐药基因情况。方法 采用药敏纸片扩散法检测15株SS9菌株对9类21种不同抗生素的耐药性,并通过PCR方法检测其大环内酯类及四环素类耐药基因的携带情况。结果 被检菌株对大环内酯类及林可胺类耐药率都为100%,对四环素及链霉素的耐药率都为93.3%,对头孢类、氯霉素类、阿莫西林、糖肽类以及庆大霉素较为敏感。所有菌株均耐7种及以上抗菌药物,最高可耐16种,其中以8重耐药的菌株数量最多。不同地区SS9分离株对抗生素耐药情况不同,健康猪分离株耐药情况较病猪分离株更为严重。100%的菌株具有ermB基因,93.33%的菌株具有tetO基因,表明ermB和tetO分别可能是介导SS9对大环内酯类及四环素产生耐药性的主要原因之一。结论 本研究为猪链球菌9型的预防和临床治疗、耐药性及耐药机制的研究提供了参考依据。     

MTBDRplus技术快速检测结核分枝杆菌耐多药的临床应用评价

目的 评价线性探针杂交技术(简称MTBDRplus技术)对福州地区耐药结核杆菌的检测效果,并了解该地区耐药结核分枝杆菌的耐药基因特征方法 选取246株临床结核分枝杆菌分离株,以传统罗氏药敏试验为金标准,评价MTBDRplus技术在临床上应用的检测效果,分析耐药基因突变分布频率结果 与传统罗氏药敏试验相比较,MTBDRplus检测利福平(RIF)和异烟肼(INH)耐药性灵敏度分别为91.7%(11/12)和83.3%(15/18),MTBDRplus检测RIF和INH耐药性特异度分别为99.6%(233/234)和95.2%(217/228)。12例rpoB基因存在突变的结核分枝杆菌中,58.3%rpoB基因S531L突变;26例katG和inhA基因存在突变的结核分枝杆菌中,57.7%(15/26)katG基因315突变;存在C15T位点突变的菌株仅9.1%(1/11)为INH耐药菌株结论 MTBDRplus技术是一个敏感、特异的快速诊断耐多药结核病的有效方法,该技术在福州地区具有较好的应用前景。福州市耐药结核分枝杆菌以rpoB S531L和katG S315T突变型为主。建议谨慎判断结核分枝杆菌inhA基因C15T位点突变引起的INH耐药。     

异烟肼耐药肺结核患者对丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的耐药情况分析

目的 分析异烟肼(INH)耐药肺结核患者对丙硫异烟胺(Pto)和对氨基水杨酸(PAS)的耐药情况,并分析inhA基因突变与Pto耐药的相关性。方法 采用回顾性分析的方法,收集2018年1月1日至2020年12月31日就诊于西安市胸科医院且符合入组标准的849例INH耐药肺结核患者对Pto和PAS的耐药资料及INH耐药基因(PCR熔解曲线法)。采用Kappa一致性检验进行inhA基因突变与Pto耐药的相关性分析。结果 849例INH耐药肺结核患者中,Pto的耐药率为3.89%(33/849),PAS的耐药率为11.90%(101/849)。518例行PCR熔解曲线检测INH耐药基因的患者中,katG基因突变率为73.75%(382/518),inhA基因突变率为15.83%(82/518),Pto耐药率为3.86%(20/518);82例inhA基因突变者中,Pto耐药7例(8.54%),与Pto耐药者中发生inhA基因突变者(35.00%,7/20)的一致性较差(Kappa=0.080)。结论 INH耐药肺结核对Pto的耐药率较低,对PAS的耐药率较高;inhA基因突变与Pto耐药的发生一致性较差。     

2014—2015年中国西南地区结核分枝杆菌临床分离株耐药情况

目的 通过耐药监测了解中国西南地区肺结核患者的耐药状况。方法 选取2014—2015年重庆市、四川省、云南省的8个国家耐药监测点收集的610例涂阳肺结核患者的结核分枝杆菌临床分离株,采用固体比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(Sm)共4种一线抗结核药物及卡那霉素(Km)、氧氟沙星(Ofx)、卷曲霉素(Cm)、丙硫异烟胺(Pto)、对氨基水杨酸钠(PAS)共5种二线抗结核药物进行药敏试验检测。对9种药物的总耐药率、单耐药率、耐药顺位、耐多药率,以及不同地区、不同年份耐药率的差异进行分析。结果 结核分枝杆菌分离株对9种抗结核药物的总体耐药率和耐多药率分别是19.51%(119/610)和5.74%(35/610)。各抗结核药物的耐药顺位由高到低依次为INH(11.97%,73/610)、Sm(10.66%,65/610)、RFP(6.56%,40/610)、Ofx(6.56%,40/610)、PAS(2.62%,16/610)、Km(2.13%,13/610)、EMB(1.15%,7/610)、Cm(0.49%,3/610)、Pto(0.16%,1/610)。统计结果显示,西南地区8个监测点结核分枝杆菌临床分离株的耐多药率四川省通江县最高,为16.36%(9/55);INH耐药率四川省通江县最高,为23.64%(13/55);Km耐药率四川省通江县最高,为10.91%(6/55)。不同年份之间结核分枝杆菌临床分离株的总耐药率[2014年为20.08%(51/254);2015年为19.10%(68/356)]及耐多药率[2014年为4.72%(12/254);2015年为6.46%(23/356)]差异均无统计学意义(χ ²=0.09,P=0.764;χ ²=0.83,P=0.363)。 结论 中国西南地区耐药情况较为严峻,应加强该地区耐药结核病的监测。     

高海拔地区结核分枝杆菌耐药特征研究

目的 研究高海拔地区1 531株结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)耐药特征,为高海拔地区耐药结核病防控提供科学依据。方法 收集青海省1 531株MTB,采用比例法对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(SM)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFX)6种常用抗结核药物进行药物敏感性试验,并对结果进行统计分析。结果 1 531株MTB总耐药率32.98%(505/1 531),单耐药率12.34%(189/1 531),多耐药率5.75%(88/1 531),耐多药率14.89%(228/1 531),广泛耐药率1.1%(17/1 531),利福平耐药率18.16%(278/1 531),不同地区不同类型耐药率差异均有统计学意义(均P<0.05)。复治患者总耐药率、利福平耐药率高于初治患者(χ总耐药率2=505.00,P<0.01;χ利福平耐药率2=278.00,P<0.05),差异有统计学意义。分离的菌株对6种抗结核药物中的一种耐药率由高到低依次为:INH、SM、RFP、EMB、OFX、KM。单耐药谱以单耐SM占比最高;多耐药谱有7种类型,同时耐INH、SM占比最高;耐多药谱有16种类型,同时耐INH、RFP、SM、EMB占比最高。人群特征来看,总耐药率男性高于女性;青年组高于中、老年组;民族由高到低依次为汉族、回族、其他民族、藏族,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 青海省耐药结核病高于全国水平,可能与本地区高寒缺氧、耐药结核病诊治医疗资源有限等有关,今后的工作应加强政府承诺,加强耐药结核病的发现和治疗,尤其是初治患者的耐药检测。     

惠州市不同年龄段肺结核患者耐药情况分析

目的分析惠州市不同年龄段肺结核患者耐药情况,为耐药肺结核的诊断与治疗提供参考依据。方法抽取2010—2013年惠州市结核病防治研究所结核科收治的肺结核患者1 484例,按照年龄分为18~35岁组356例,36~59岁组612例,≥60岁组516例。回顾性分析3组患者一线抗结核药物耐药情况及耐多药情况。结果 18~35岁组患者异烟肼(INH)和链霉素(SM)耐药率均高于36~59岁组,INH、利福平(RFP)、SM、乙胺丁醇(EMB)耐药率和总耐药率均高于≥60岁组(P0.05);36~59岁组患者RFP耐药率高于≥60岁组(P0.05)。18~35岁组患者耐多药率高于36~59岁组,耐3药、耐4药和耐多药率高于≥60岁组(P0.05)。结论惠州市不同年龄段肺结核患者耐药情况存在较大差异,青年患者容易形成获得性耐药,需采取有针对性的预防和监控措施。     

中国西南地区结核分枝杆菌临床分离菌株一线药物耐药状况调查

目的了解西南地区结核分枝杆菌临床分离株的耐药表型及其影响因素情况,为结核病的预防和控制提供基础参考数据。方法选取中国西南4个地区(贵州、广西、四川和重庆)2006—2013年从结核病患者痰标本中分离培养的500株结核分枝杆菌,用比例法药物敏感试验对4种一线抗结核药物进行药物敏感性检测,用SPSS22.0中的χ~2检验和Logistic回归进行统计学分析。结果 500株结核分枝杆菌临床分离株,对INH、RFP、EMB和SM的耐药率分别为30.40%、26.00%、9.80%和24.40%,总体耐药率和耐多药率分别是40.60%和27.20%;贵州、四川、广西和重庆的总耐药率和MDR率分别为64.10%和46.15%、59.54%和51.90%、28.88%和14.97%、20.19%和3.85%。χ~2检验结果显示,各地区间菌株对4种药物的耐药率、总体耐药率和耐多药率差异均有统计学意义(P0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,地区和病例类型是结核病耐药及耐多药发生的影响因素(P0.05)。结论西南地区,特别是贵州和四川的耐药结核病、尤其是耐多药结核病的流行状况严峻。应加强结核分枝杆菌耐药性监测,以指导临床用药和预防控制耐药结核病的发生和流行。     

2型糖尿病合并初治肺结核患者耐药情况及影响因素分析

目的回顾性分析了2型糖尿病合并初治耐药肺结核患者结核分枝杆菌的耐药情况和影响因素,从而为此类患者的早期发现提供一定的依据。方法收集首都医科大学附属北京胸科医院2012年1月至2014年12月收治的行结核分枝杆菌培养及药敏试验的2型糖尿病合并肺结核患者356例,其中初治耐药患者93例,复治耐药患者56例,初治敏感患者182例。对患者的耐药率、耐药种类、任一耐药率、耐药谱、耐药危险因素等情况进行分析。采用SPSS16.0统计学软件进行统计学分析,P0.05为差异有显著性意义。结果 356例2型糖尿病合并肺结核患者,总耐药率41.9%,耐多药率达12.9%。2型糖尿病合并初治耐药肺结核患者中,以单耐药和多耐药患者为主,耐单药前三位为耐SM、INH和利福类,喹诺酮类药物的耐药率为11.8%,耐多药患者组合耐药谱以耐HRSEPto+二线注射剂为最多(38.1%)。与初治敏感患者相比,2型糖尿病合并初治耐药肺结核患者体重下降者占多数(P0.05)。结论 2型糖尿病合并初治肺结核的耐药率较高,以单耐药和多耐药为主,体重下降是2型糖尿病合并初治耐药肺结核患者的影响因素。     

2016年广东省涂阴培阳肺结核患者耐药情况分析

目的 了解广东省涂阴培阳肺结核患者的耐药情况。方法 收集广东省2016年1—12月32个结核病耐药监测点12323例临床确诊的初治涂阴肺结核患者作为研究对象,均进行了分枝杆菌培养检测,其中1224例阳性,涂阴培阳率为9.9%。经菌种鉴定,1177例(96.16%)为结核分枝杆菌复合群,47例(3.84%)为非结核分枝杆菌。对确定为结核分枝杆菌复合群的1177株菌株进行异烟肼(INH)、链霉素(Sm)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、卡那霉素(Km)、氧氟沙星(Ofx)、卷曲霉素(Cm)、丙硫异烟胺(Pto)、对氨基水杨酸(PAS)等9种药物的药物敏感性试验(简称“药敏试验”)。结果 12323例初治涂阴肺结核患者进行培养,涂阴培阳肺结核患者总耐药率为29.57%(348/1177),耐多药率为2.38%(28/1177),广泛耐药率为0.08%(1/1177),单耐药率为17.42%(205/1177),多耐药率为9.77%(115/1177)。男性耐多药率(2.94%,25/849)高于女性(0.91%,3/328),差异有统计学意义(χ ²=4.20,P=0.040)。多耐药谱有52种类型,其中耐INH+Sm者最多,占20.87%(24/115);其次为耐Sm+Km者(9.57%,11/115)。结论 广东省涂阴培阳肺结核患者有较高的耐药率,应加强监测与管理,减少耐药结核病的发生。     

2016—2019年福建省结核病耐药监测结果分析

目的 了解2016—2019年福建省结核病耐药监测点分离的MTB的耐药情况,分析耐药变化趋势,为结核病防控工作提供依据。方法 收集2016—2019年全省9个耐药监测点培养阳性的分枝杆菌临床分离株,采用对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼(PNB/TCH)生长试验法进行菌种初步鉴定。对MTB菌株进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(Sm)、乙胺丁醇(EMB)、卡那霉素(Km)、氧氟沙星(Ofx)、卷曲霉素(Cm)、丙硫异烟胺(Pto)、对氨基水杨酸(PAS)共9种抗结核药品的敏感性试验,描述耐药谱和耐药水平。 结果 1434株MTB菌株中有1261株分离自初治患者,173株分离自复治患者。总耐药率为19.04%(273/1434),单耐药率为11.65%(167/1434),多耐药率为3.56%(51/1434),耐多药率为3.84%(55/1434)。复治患者的总耐药率(28.90%,50/173)和耐多药率(12.14%,21/173)均明显高于初治患者[总耐药率为17.68%(223/1261),耐多药率为2.70%(34/1261)],差异均有统计学意义(χ²=12.419,P=0.000;χ²=36.775,P=0.000)。耐药谱有42种,耐药菌株对9种抗结核药品的任一耐药率依次为:Sm(9.90%,142/1434)>INH(8.30%,119/1434)>RFP(5.93%,85/1434)>Ofx(3.63%,52/1434)>EMB(2.30%,33/1434)>Km(0.98%,14/1434)>Cm(0.77%,11/1434)、PAS(0.77%,11/1434)>Pto(0.63%,9/1434)。2016—2019各年度的总耐药率分别为17.69%(66/373)、22.34%(63/282)、20.31%(78/384)、16.71%(66/395),差异无统计学意义({\chi }_{\mathrm{趋势}}^2=0.248,P=0.619)。结论 福建省耐药处于较低水平,耐药呈复杂性和多样性,应重视患者的耐药筛查,加强耐药患者的治疗管理。     

铜陵地区结核与非结核分枝杆菌菌型鉴定及耐药性分析

目的通过检测本地区分枝杆菌感染菌株类型以及耐药性,制订化疗方案提供依据。方法采取两种试剂鉴定菌株,绝对浓度法检测药敏耐药性。结果 80株分枝杆菌中人型结核分枝杆菌58例,占72.5%;牛型结核分枝杆菌15例,占18.8%;非结核分枝杆菌7例,占8.7%。结核分枝杆菌复合群耐多药率9.6%。非结核分枝杆菌耐多药率85.7%。牛型结核分枝杆菌对药物敏感性大于人型结核分枝杆菌,人型结核分枝杆菌对药物敏感性大于非结核分枝杆菌。耐药以耐R、H、TH1321、Rtf、PAS多见。结论本地区肺部感染分枝杆菌菌株以结核分枝杆菌复合群为主,耐多药率及非结核分枝杆菌感染率略高于全国水平。