抗酸杆菌自动荧光染色和显微镜扫描技术在结核病诊断中的临床评价

目的 观察自动荧光染色和显微镜扫描技术检测结核分枝杆菌的临床价值。 方法 2016年9—12月,在临沂市人民医院门诊连续纳入了748例疑似肺结核患者,收集2243份痰标本。每份痰标本制作2张涂片,一张采用传统荧光染色法,并用传统荧光显微镜(fluorescence microscopy, FM)人工阅片。另一张用自动荧光染色和显微镜扫描技术(AFSS)进行染色和扫描。所有样品经4% NaOH消化处理,然后接种到罗氏培养基中进行分离培养。与培养结果相比,分析AFSS的效能。所有AFSS和传统FM检测结果有差异的涂片采用萋-尼染色显微镜检查方法进行复核。 结果 AFSS检测的阳性率为32.1%(720/2243),常规FM检测的阳性率为31.92%(716/2243),两者比较差异无统计学意义(χ ²=0.016,P>0.05)。与罗氏培养相比,AFSS检测分枝杆菌的敏感度和特异度分别为83.4%(657/788)和95.9%(1386/1446)。阳性预测值和阴性预测值分别为91.6%(657/717)和91.4%(1386/1517)。 结论 AFSS检测分枝杆菌的敏感度和特异度较高,自动化程度高,值得推广应用该技术。     

不同细菌学与病理学检查技术对骨关节结核诊断的效能研究

目的:回顾性分析脓液标本细菌学检测技术和组织标本病理学检测技术诊断骨关节结核的检测效能。方法:以2016年1月至2018年12月在北京胸科医院住院治疗的213例送检同部位脓液和组织标本进行检测的疑似骨关节结核患者作为研究对象,取新鲜脓液标本进行涂片染色镜检、GeneXpert MTB/RIF(GeneXpert)检测、实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测和BACTEC MGIT 960液体培养(MGIT 960液体培养);组织标本经石蜡包埋后进行抗酸染色镜检和FQ-PCR检测。结果:根据骨结核临床诊断综合参考标准(CRS),186例纳入患者诊断为骨关节结核,其中124例为确诊结核患者,23例为高度疑似结核患者,39例为疑似结核患者;27例患者排除骨关节结核。与CRS比较,脓液标本涂片镜检、MGIT 960液体培养、FQ-PCR、GeneXpert以及组织标本抗酸染色和FQ-PCR检测的敏感度分别为28.7%(49/171)、49.0%(48/98)、58.1%(25/43)、87.5%(161/184)、48.6%(90/185)和85.4%(146/171);特异度分别为100.0...     

我国耐药结核病的危险因素——2007年全国结核病耐药基线调查资料分析

目的 探索新登记、复治患者发生耐药、耐多药结核病的危险因素。 方法2007年4-12月中国进行了全国结核病耐药基线调查,调查覆盖全国31个省、自治区和直辖市,以省分层,采用多阶段整群抽样方法从全国结核病防治系统中随机抽取70个调查点,调查期间每个调查点纳入新登记涂阳新患者51例和复治患者17例。临床医师采用信息表收集患者的相关信息,通过当面询问患者填写治疗史信息,如有可能查阅患者医疗记录进行确认,治疗信息的准确性经另一位临床医师再次询问患者进行复核。采用比例法进行药敏试验,检测药物包括异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卡那霉素和氧氟沙星。 结果 多因素分析结果表明,对于新登记、治疗时间少于1个月(OR=1.6, 95% CI＝1.1～2.1)发生耐药结核病的风险较高;而女性（OR=1.4, 95% CI＝1.0～2.1）和进行过结核病药物治疗（OR=2.4, 95% CI＝1.5～3.7）是发生耐多药结核病的危险因素。对于复治患者,女性（OR=1.7,95% CI＝1.1～2.7）、既往有过2次及以上治疗且最近1次在结核病专科医院治疗（OR=4.0, 95% CI＝1.2～14.0）发生耐药结核病的风险较高;而女性（OR=2.3, 95% CI=1.5～3.6）、生活在实施DOTS较晚（2000年以后）的地区（OR=1.7, 95% CI＝1.2～2.4）、既往有过2次及以上治疗且最近1次在结核病专科医院外的其他医疗机构治疗（OR=3.3, 95% CI＝2.1～5.2）、既往有过2次及以上治疗且最近1次在结核病专科医院治疗（OR=13.0, 95% CI＝3.9～46.0）是产生耐多药结核病的危险因素。 结论 进行过结核病治疗的新登记产生耐药、耐多药结核病的风险较高;患者为女性、既往有过2次及以上的结核病治疗史是复治患者产生耐药、耐多药结核病的危险因素。     

2011—2020年新疆喀什地区初治肺结核患者复发影响因素分析

目的 了解2011—2020年间新疆喀什地区登记治疗的初治肺结核患者复发的影响因素,为制定和完善干预措施,减少当地结核病的复发提供科学依据。方法 从《中国疾病预防控制信息系统》子系统《结核病管理信息系统》中,收集2011年1月至2020年12月喀什地区登记治疗的100699例初治肺结核患者病案信息,采用Cox比例风险回归模型对15730例复发肺结核患者的一般资料、临床信息、病原学结果及治疗转归信息等情况进行分析。结果 登记并成功治疗的100699例初治肺结核患者中,15730例肺结核患者复发,复发密度为4.13/100人年,3年累积复发患者占69.69%(10962/15730),5年累积复发患者占89.04%(14006/15730)。Cox比例风险回归模型显示,15~64岁组患者(aHR=2.37,95%CI:1.50~3.76)、≥65岁组患者(aHR=2.44,95%CI:1.54~3.87)、苗族患者(aHR=3.46,95%CI:2.20~5.44)、维吾尔族患者(aHR=2.39,95%CI:2.01~2.84)、农民(aHR=1.98,95%CI:1.70~2.31)、待业(aHR=1.51,95%CI:1.28~1.77)、5个月末痰涂片阳性(aHR=1.59,95%CI:1.18~2.14)是结核病复发的独立危险因素。 结论 喀什地区初治肺结核患者复发风险较高,应重点关注65岁以上老年患者、农民、待业、抗结核治疗5个月末痰涂片阳性患者的规范化治疗与随访管理,应早期对这些高危人群开展针对性的干预措施。     

广州市非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及药物敏感性试验结果分析

目的 对广州市非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株进行菌种鉴定与药物敏感性试验(简称“药敏试验”),为临床诊断和治疗NTM病提供依据。方法从2016年广州市胸科医院行分枝杆菌分离培养的1250份标本中搜集培养阳性的717株临床分离株,采用水溶性对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)对其进行培养,以鉴别MTB与NTM,通过多靶位基因聚合酶链反应 (PCR)测序,对PNB和TCH培养确定为NTM的菌株进一步行菌种鉴定,并采用最低抑菌浓度法(MIC)检测98株NTM对18种抗结核药物的耐药性。结果717株分枝杆菌中,检出106株NTM菌株,检出率为14.4%;其中103株传代成功,传代率为97.2%(103/106)。经NTM菌种鉴定,按照构成比高低依次为脓肿分枝杆菌[34.0%(35/103)]、胞内分枝杆菌[25.2%(26/103)]、马赛分枝杆菌[20.4%(21/103)]、鸟分枝杆菌[9.7%(10/103)]、堪萨斯分枝杆菌[5.8%(6/103)]、偶发分枝杆菌[1.9%(2/103)],以及1株缓黄分枝杆菌、1株猪分枝杆菌和1株阿加普尔分枝杆菌[均占0.9%(1/103)]。98株NTM菌株的药敏试验结果显示,敏感者前3位依次为阿米卡星[93.9%(92/98)]、克拉霉素[91.8%(90/98)]和阿奇霉素[71.4%(70/98)],耐药者前3位依次为利福平[89.8%(88/98)]、左氧氟沙星[83.7%(82/98)]和亚胺培南[77.6%(76/98)]。并且NTM不同菌种对部分药物的耐药性存在种间差异。结论广州市NTM的检出率高于我国其他地区,流行的菌种以脓肿分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主;克拉霉素和阿米卡星是临床治疗NTM患者的优选抗生素,应重视对利福平和左氧氟沙星的耐药性。     

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》解读

耐药结核病是2035年实现全球终结结核病流行目标的巨大障碍。世界卫生组织(World Health Organization, WHO)倡导采用快速分子药物敏感性检测技术进行耐药结核病早期诊断,而覆盖全面可靠的耐药检测靶标是提高分子药物敏感性检测技术可靠性的关键。WHO于2023年11月发布《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》,目的是基于更广泛的全球数据汇总形成更为全面准确的耐药相关基因突变目录,为开发与完善基于测序或其他方法的新型分子药物敏感性检测技术提供支持。本文对第2版目录相较于第1版目录在分析流程与耐药突变等内容的更新进行了详细的解读,并对未来目录完善的方向进行了展望。     

发光二极管荧光显微镜在基层应用的多中心研究

目的 评价荧光染色发光二极管荧光显微镜涂片镜检（简称LED）在基层实验室的应用情况。方法 对研究期间到6个县(区)级结核病防治机构（简称结防机构）就诊的肺结核可疑症状者3691例和随访患者2509例,以及8例没有记录初诊随访患者的共11 288份痰标本进行涂片镜检,每份标本涂2张片,分别使用萋尼（简称Z-N）和LED法进行染色、镜检,比较两种方法在阳性检出率及读片时间等方面的差异。结果 LED法的阳性涂片检出率为11.20%（1264/11 288）,较Z-N法（8.59%,970/11 288）提高2.61%（χ²=8086.74,P=0.000）。读片时间LED ［（120.03±38.88）s］明显短于Z-N法［（206.31±75.86）s］（t=28.12,P=0.00）。结论 基层实验室使用LED较Z-N能够提高涂片镜检的阳性检出率,且读片时间明显缩短,在我国基层实验室应用具有较好前景。     

荧光染色发光二极管荧光显微镜痰涂片镜检方法成本分析

目的 对比分析萋尔-尼尔逊涂片镜检方法（简称"Z-N”）与荧光染色发光二极管荧光显微镜（LED）涂片镜检2种方法的实验室成本。 方法 收集6个县（区）级结核实验室使用Z-N和LED进行痰涂片镜检的直接和间接投入,比较分析6个实验室分别使用2种方法进行3次涂片镜检的平均成本。两样本间均数差别显著性检验采用t检验,多样本间均数差别显著性检验采用F检验,P<0.05为差异有统计学意义。 结果 Z-N法和LED方法检测1份痰标本的成本分别为人民币（14.98±3.94）元和（13.27±4.83）元(t=5.084, P=0.001)。6个实验室采用Z-N法进行1个痰涂片镜检的成本范围为人民币9.44～17.82元,LED法进行1个痰涂片镜检的成本范围为人民币7.80～18.93元。结论 LED进行痰涂片镜检的成本比Z-N法低,从成本角度LED更值得推广。     

环介导等温扩增法诊断初诊肺结核病研究

目的:初步评价环介导等温扩增法(Lamp)检测痰中结核分枝杆菌的准确性,探讨临床诊断初诊肺结核病人的应用价值。方法:选取249例初诊疑似肺结核病人的痰标本,同时进行Lamp、直接涂片抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法检测。结果:剔除培养失败和非结核杆菌的标本,共检测了739份痰标本,其中直接涂片抗酸染色法检出阳性标本70份,阳性率9.47%;培养检出阳性标本118份,阳性率15.97%;Lamp检出阳性标本99份,阳性率13.40%。以培养法为标准,涂片法的灵敏度57.63%,特异度99.68%,符合率为94.30%;Lamp的灵敏度77.12%,特异度98.71%,符合率为96.61%。结论:Lamp在检测初诊疑似肺结核病人中有较高的灵敏度和特异性,适用于基层结核病工作中初诊肺结核病人的诊断。     

快速DNA提取环介导等温扩增技术检测结核分枝杆菌的成本分析

结核病的早期诊断,对于很好地控制结核病的传播具有十分重要的意义。固体培养具有很高的诊断价值,但耗时较长,至少需要6～8周的时间。近年来涌现出很多新的技术和方法用于结核分枝杆菌的快速诊断及鉴定。然而除了检测效能,检测成本也是制约各种技术或方法能否推广的决定性因素之一。结核分枝杆菌快速DNA提取环介导等温扩增检测技术（procedure for ultra rapid extraction of loop-mediated isothermal amplification, PURE-LAMP;Eiken Chemical,日本）是一种基于分子生物学原理的快速检测试剂盒,整个试剂盒采用封闭的反应体系,在反应体系内加入2条内引物和2条外引物,