重组弓形虫肌动蛋白解聚因子滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及保护作用

目的观察重组弓形虫肌动蛋白解聚因子(Recombinant Toxoplasma gondii actin depolymerizing factor,rTgADF)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及抗弓形虫攻击的保护作用。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为2组,分别用30μg rTgADF(溶于20μl PBS)和20μl PBS于第0、14和21d各滴鼻免疫1次。末次免疫后14d,每组处死小鼠5只,ELISA法测定血清IgA、IgG和IgG1/IgG2a及鼻咽、阴道和小肠冲洗液sIgA以及脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。每组另取5只小鼠,用4×104 RH株弓形虫速殖子/只灌胃攻击(致死性),观察小鼠健康状况并计算存活率。其余小鼠用1×104速殖子/只灌胃攻击(慢性),攻击后30d处死,计数肝、脑组织速殖子。结果 rTgADF诱发小鼠产生较强的系统免疫和黏膜免疫应答,免疫组小鼠血清IgG、IgA和IgG1/IgG2a水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),鼻咽、阴道和小肠冲洗液sIgA水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),脾淋巴细胞培养液上清中IFN-γ和IL-2、IL-4水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),IL-10水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。致死性攻击后30d,对照组小鼠全部死亡,免疫组小鼠存活率为20%,差异有统计学意义(P<0.01);慢性感染后30d,免疫组小鼠肝和脑虫荷分别比对照组减少63.87%(P<0.01)和50.14%(P<0.05)。结论 rTgADF滴鼻免疫小鼠诱导产生较强的黏膜及系统免疫应答,并可部分抵抗弓形虫致死性和慢性攻击,可作为弓形虫候选蛋白疫苗。     

1例腹腔镜修补结肠息肉电凝术后迟发性穿孔的护理

随着结肠镜检查的日益普及,结肠息肉的检出率逐年升高,绝大多数医院开展了镜下治疗,由于结肠内存在大量的细菌,结肠穿孔会造成严重的腹腔感染,如不及时手术,可导致患者死亡。发现穿孔距镜下治疗时间超过6h即为迟发性穿孔,腹腔镜下行穿孔修补与传统手术相比,优势明显;正确落实各项护理措施可有效促进患者康复。     

刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1基因的克隆和原核表达及纯化和抗原性分析

目的 克隆刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1(TgRACK1)基因,原核表达、纯化TgRACK1,并分析其抗原性.方法 制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgRACK1基因全长编码序列(GenBank登录号:AY547291)的开放阅读框设计引物并进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,扩增产物经双酶切后连接入pGEX-6p-1载体,重组质粒转化大肠埃希菌DH5α,阳性菌落经菌液PCR、双酶切及DNA测序进行鉴定.将重组质粒pGEX-6p-1-TgRACK1转化至大肠埃希菌BL21(DE3)并加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物;分别以抗GST标签抗体和兔抗弓形虫血清为一抗,免疫印迹(Western blotting)分析鉴定重组蛋白及其抗原性.重组融合蛋白经GST琼脂糖凝胶亲和纯化,纯化蛋白经SDS-PAGE分离,考马斯亮蓝染色结合凝胶成像系统分析其纯度.结果 RT-PCR扩增产物约为970 bp,重组质粒pGEX-6p-1-TgRACK1构建成功.经IPTG诱导获得相对分子质量约63 kDa的可溶性重组蛋白.诱导表达的蛋白质为带GST标签的重组融合蛋白,且能被兔抗弓形虫血清识别.亲和纯化后获得纯度大于95％的重组TgRACK1蛋白质.结论 克隆得到弓形虫活化蛋白激酶C受体1基因,原核表达并纯化出该基因编码的蛋白质,且该重组蛋白具有抗原性.     

2020-2022年某三甲医院血培养病原菌分布及耐药特征分析

目的 分析2020-2022年中铁十二局集团中心医院血培养病原菌分布及耐药特征,为临床血流感染的治疗提供依据。方法 收集中铁十二局集团中心医院2020年1月-2022年12月门、急诊和住院患者送检的26781份血培养标本。采用WHONET 5.6软件对标本血培养及药敏试验结果进行回顾性分析。结果 2020-2022年本院血培养标本共分离出病原菌2056株,其中革兰阴性杆菌1208株,占58.75%,分离率居前3位的革兰阴性杆菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌;革兰阳性球菌725株,占35.26%。分离率居前3位的革兰阳性球菌为凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和屎肠球菌。凝固酶阴性葡萄球菌对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、苯唑西林和青霉素G的耐药性强,金黄色葡萄球菌对红霉素、青霉素G的耐药性强。肺炎克雷伯菌对多数常用抗菌药物的耐药率低于大肠埃希菌。结论 本院血培养病原菌种类多、分布广、耐药率高,定期对血培养病原菌分布及耐药特征进行分析,为提高血流感染诊治效果提供参考。     

影响结直肠肿瘤内镜下黏膜切除术预后的多因素分析

目的研究内镜下黏膜切除术（EMR）治疗结直肠病变的并发症及危险因素。方法回顾性分析了南京中医药大学第三附属医院肛肠医疗中心2004年10月至2007年10月共进行EMR术84例94枚结直肠病变,对可能影响EMR术后并发症的因素进行Logistic回归分析。结果84例患者,男性56例、女性28例,平均年龄（57±13）岁（30—85岁）,术前病理检查诊断为结肠腺瘤69枚（73．4％）、绒毛状腺瘤4枚（4．3％）、管状绒毛状腺瘤17枚（18．1％）、结肠腺瘤癌变2枚（2．1％）、结直肠类癌2枚（2．1％）,息肉平均大小（15±7）mm（10～40mm）。平均随访时间（254-7）个月（3～36个月）。4例（4．3％）患者发生术中或术后出血、3例（3．2％）发生息肉复发,总并发症发生率为6．4％,并发症的发生与病变的大小、是否需要分次切除及是否为绒毛状腺瘤有关,多因素分析提示病变大于20mm是EMR术后并发症发生的独立的危险因素。结论结肠病变大于20mm是EMR术后并发症发生的独立的危险因素,对于大于20mm的结肠病变、特别不能整块切除的病变在进行EMR切除时需要慎重,术后要加强随访。     

结肠镜检查5690例患者的适应证及疾病分布特征

目的探讨结肠镜检查与各适应证对应的疾病分布。方法回顾性分析2000年1月至2004年12月间进行的5690例结肠镜检查患者的检查结果。结果男性3096例,女性2594例;年龄(52±15)岁。患者进行结肠镜检查的原因:26.9%为便血;25.8%为不典型腹部疼痛;11.1%为腹泻、大便次数增多或大便不成形;7.6%为肛门坠胀、疼痛不适;7.0%为便秘;3.0%为排黏液或脓血便;0.9%为体检发现直肠肿块和腹部包块;10.9%为结肠镜息肉摘除术后复查;1.5%为结直肠癌术后复查;2.2%为单纯体检者;其余3.1%为其他原因进行检查者。结肠镜到达回盲部的比例为97.7%,共发现各种疾病2283例(40.1%)。其中结直肠癌10.3%,结直肠息肉19.6%,溃疡性结肠炎4.3%,克罗恩病0.5%。结论应对出现便血、非特异性腹痛、腹泻或便秘者和结直肠癌术后、结直肠息肉及结直肠癌遗传受累者进行定期的结肠镜检查。     

胃镜术后并发症的食疗

胃镜检查术直观简捷,诊断率高,但有时会引起一些临床并发症。最常见的并发症有咽喉粘膜损伤、胃粘膜渗血、食欲不振等。针对不同并发症,临床可采用相应的食疗法治愈。1　咽喉粘膜损伤1.1　食疗方(银花麦冬桔甘茶):银花10g,麦冬10g,桔梗6g,生甘草2g。1.2　服用法:将银花、?..     

内镜下黏膜剥离术治疗结直肠良性肿瘤40例体会

随着内镜器械和技术的进步,内镜黏膜下剥离术（ESD）的应用越来越广泛。我科室自2009年起开始结直肠肿瘤的ESD手术治疗,取得良好效果,现将体会总结如下。     

结肠镜检查致并发症的预防及治疗

随着电子结肠镜设备的普及，接受结肠镜检查及镜下治疗的患者日益增多，伴随而来的是各种并发症的发生率逐渐增多。如果临床医师能够熟悉各种并发症的发生机理，预防措施及治疗手段，则可以大大降低并发症发生率，避免医疗纠纷甚至是诉讼。