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2.
目的:研究成釉细胞瘤(AB)和牙源性角化囊肿(OKC)中c-mycmRNA的表达,探讨c-myc在AB和OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法:使用原位杂交法检测54例AB、16例OKC和7例口腔正常黏膜(NOM)组织中c-mycmRNA的表达,并将AB按原发、复发、恶变分组,结果使用χ2检验进行统计分析。结果:AB、OKC及NOM组织中c-mycmRNA的阳性表达率分别为81.5%(44/54)、75.0%(12/16)和14.3%(1/7),3组比较有显著性差异(χ2=15.488,P<0.05)。原发组AB中c-mycmRNA的阳性表达率为71.0%,复发组为94.7%,恶变组为100.0%,伴随原发、复发、恶变,差异有显著性(χ2=16.912,P﹤0.05)。结论:c-myc表达在AB的发生、发展中有重要作用;c-mycmRNA的表达与AB的临床生物学行为有关,伴随其生物学行为变化,c-mycmRNA表达增强;提示c-myc有可能成为评价预后的有效指标。 相似文献
3.
端粒酶调节相关基因TRAP与肿瘤生物学特性的关系 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:研究TRAP基因在人肿瘤组织中的表达及其与人端粒酶逆转录酶(hTERT)的作用相关性,探讨其在人肿瘤发生中的作用。方法:通过原核表达TRAP蛋白免疫新西兰白兔,制备特异性多克隆抗体;免疫组化检测TRAP及hTERT在人肿瘤组织中的表达;通过构建TRAP真核表达载体、基因转染,观察TRAP对细胞hTERT转录、端粒酶活性和癌细胞生长及成瘤性的影响。结果:通过大肠杆菌表达的TRAP蛋白免疫、制备多克隆抗体,经Westem blot鉴定与TRAP具有特异结合性;免疫组化显示247例恶性肿瘤中有213例TRAP阳性,表达率为86.2%,而在所有癌旁组织中TRAP为阴性。另外,交界性及癌前病变与良性病变组织中TRAP表达差异也有显著性:进一步检测卵巢生发上皮肿瘤、乳腺癌、肝癌及中枢神经系统肿瘤组织hTERT表达,显示hTERT与TRAP表达的结果相一致。TRAP正义转染使hTERT及端粒酶活性升高,细胞增殖加快;而反义转染时,两者均下降,细胞增殖受抑。裸鼠成瘤性实验表明:正义TRAP使癌细胞成瘤性增强,而反义则抑制移植瘤的生长。结论:TRAP表达存在于人癌组织及部分癌前病变,与癌细胞恶性表型相关,并与hTERT表达一致。TRAP基因参与对端粒酶的调节作用,可能与人肿瘤发生有关。 相似文献
4.
5.
F213I突变型高雪氏病分子伴侣治疗方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 研究高雪氏病新的分子治疗方法。方法 用β-葡萄糖脑昔脂酶(β-glucocerebrosidase,β-Glc)(EC3.2.1.45)的底物类似物(glucocerebroside analogue,GCA)作为分子伴侣,处理体外培养的不同突变型的高雪氏病患者皮肤成纤维细胞,采用荧光酶学手段测定β-Glc活性;Western印迹杂交技术分析该酶蛋白表达的量;细胞双染确定β-Glc在细胞内的定位;薄层层析法分析葡萄糖脑苷脂的降解情况。结果 该酶的底物类似物GCA可以提高体外培养的F213I突变型患者成纤维细胞内β-Glc活性;增加该酶蛋白的表达量;促进该酶蛋白向溶酶体内转运,加速底物葡萄糖脑苷脂(glucocerebroside,GlcCer)的降解。结论低分子量的GCA作为一种分子伴侣可能为F213I突变型高雪氏病的治疗开辟一条新的途径。 相似文献
6.
目的:探讨利用干扰RNA(RNAi)抑制血管内皮生长因子(VEGF)基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:设计针对VEGF基因的小干扰RNA(siRNA),合成DNA模板,体外转录siRNA。以脂质体转染法将双链siRNA导入MCF-7细胞后,用MTT比色法检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响。通过Hoechst33258染色观察MCF-7细胞的凋亡。用流式细胞术检测细胞周期的改变,RT-PCR检测VEGF mRNA表达的变化,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白的表达。结果:所设计的两个靶位点siRNA,均能有效地抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,VEGFmRNA及其蛋白的表达明显减少;而作为阴性对照的错义序列组siRNASCR则没有上述效应。结论:体外转录合成的siRNA可抑制MCF-7细胞中VEGF基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。 相似文献
7.
乳腺肿物hTERT蛋白表达与激素受体的相关研究 总被引:4,自引:0,他引:4
近年来人类已证实端粒酶hTERT基因在干细胞及肿瘤细胞中比正常细胞高表达,其活性被认为与癌细胞永生化有关.因此它和肿瘤相关[1-3].但仅限于基因方面的研究,关于端粒酶蛋白与乳腺癌的研究鲜见报道.为了探讨乳腺癌及乳腺增生病变hTERT蛋白表达情况及其与激素受体的关系,研究其对乳腺癌诊断,预后的临床意义,我们用免疫组化方法分析了148例乳腺癌,癌前病变及良性病变中的hTERT蛋白的活性表达,并与hTERT基因及p53,ER,PR蛋白表达进行比较. 相似文献
8.
目的 分析被动吸烟鼠牙槽骨钙、磷含量和碱性磷酸酶(AKP)的活性。方法 40只6周龄健康雄性Wistar鼠被随机等量分为实验组和对照组,每组再被随机等量分为15、30、45和60 d 4个亚组,烟熏法建立被动吸烟的大鼠模型,浓酸消化法提取牙槽骨内钙和磷,光谱分析法和改良Reddi法分别测定钙、磷含量和AKP的活性,行析因设计的方差分析。结果 与各对照组牙槽骨相比,被动吸烟鼠的钙、磷含量在15 d组略有升高,30 d组略有下降,差异无统计学意义(P〉0.05),45、60 d组显著下降(P〈0.01);AKP活性在15、30 d组略升高,45、60 d组略下降,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 本实验周期内,鼠牙槽骨钙、磷含量和AKP活性在被动吸烟初期略有升高,随被动吸烟时间的延长,钙、磷含量呈时间依赖性减少,AKP活性也呈时间依赖性减少的趋势。 相似文献
9.
尼莫地平对缺氧缺血性脑损伤后细胞凋亡基因的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后Bcl-2、Bax基因表达与细胞凋亡的关系及Ca^2+拮抗剂对其的影响。方法建立新生鼠HIBD动物模型,用TUNEL法和免疫组化法观察缺氧缺血和Ca^2+拮抗剂干预后不同时间点细胞凋亡情况及凋亡基因Bcl-2、Bax的变化。结果缺氧缺血组随时间延长脑组织中Bcl-2、Bax的表达增加,Bcl-2/Bax的比值下降,同时凋亡细胞数增加,表明Bcl-2、Bax两者比值的降低促进凋亡的发生。Ca^2+拮抗剂干预组Bcl-2表达增加显著,降低了Bax的表达,凋亡细胞减少。结论Ca^2+拮抗剂可能通过改变凋亡基因的表达而抑制神经细胞的凋亡过程。 相似文献
10.
目的构建和鉴定携带有外源fat-1基因的转基因小鼠。方法将fat-1基因的cDNA与动物表达载体pEF—neo连接,构建pEF-fat-1重组质粒,酶切、测序鉴定正确后,以显微注射法把线性化重组质粒注射到小鼠受精卵的雄原核中,并将受精卵移植到受体鼠的输卵管中产出转基因小鼠,通过PCR、Southern blot杂交等方法确立阳性整合有目的基因的G0代小鼠。结果成功构建了pEF-fat-1重组质粒,将其显微注射到小鼠受精卵中,得到G0代小鼠,PCR、Southern blot杂交确立了4只整合有fat-1基因的首建鼠。结论fat-1基因可整合到小鼠体内,得到的转基因小鼠为研究fat-1基因的生物学功能提供了动物模型。 相似文献