铜绿假单胞菌临床分布及耐药性的不均一性

目的了解住院患者分离的铜绿假单胞菌临床分布及耐药特点,为临床经验使用抗菌药物及医院感染控制提供参考。方法回顾性分析某院2012—2016年住院患者检出的铜绿假单胞菌的临床分布及药敏结果,按不同病区、标本类型和年龄分组进行统计分析。结果 2012—2016年共分离铜绿假单胞菌2 432株,主要科室来源为重症监护病房(727株,29.89%),主要标本来源为痰(2 064株,84.87%)。2012—2016年各年份铜绿假单胞菌对除哌拉西林/他唑巴坦外的其他抗菌药物的耐药率比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。对哌拉西林、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星、环丙沙星的耐药性在2014年达高峰后有下降趋势;对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素的耐药率较低,且呈逐年下降趋势(均P0.05)。除头孢吡肟和妥布霉素外,来源于痰标本的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率均高于其他标本(均P0.05)。≥65岁患者分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率高于65岁患者(均P0.05)。除庆大霉素、妥布霉素外,ICU分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率均高于其他科室,为7.71%~66.02%。外科分离的铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率相对较低,为1.69%~11.86%。结论铜绿假单胞菌耐药性在临床分布呈明显不均一性,抗菌药物的经验用药以及医院感染监控措施的制定应参考不同病区、不同感染部位和不同年龄的耐药监测数据。     

shRNA干扰介导PLCε基因表达下调对膀胱癌T24细胞生长的影响

目的:探讨shRNA干扰沉默PLC ε基因对人膀胱癌T24细胞生长的影响.方法:体外构建PLCε基因的shRNA的重组质粒,Lipofectamilie2000介导法转染T24细胞,采用RT-PCR方法检测特异性shRNA的重组质粒对PLCε基因沉默效果,转染后采用MTT法检测shRNA的重组质粒对细胞增殖的作用,免疫细胞化学染色法检测T24细胞PCNA的表达,电镜观察细胞超微结构的改变.结果:shRNA的重组质粒能有效下调PLCε基因的表达,抑制率为78.01%,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01);细胞增殖活性受到明显抑制,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01);细胞内PCNA含量明显低于空白对照组和阴性质粒组,其差异有统计学意义(P<0.01);细胞形态改变产生凋亡小体.结论:PLCε基因有望成为应用RNAi技术探索治疗膀胱癌潜在的靶基因.     

抗酸染色室间质量评价质控片的标准化制备及评价

目的基于重庆市临床检验中心的平台,尝试利用脓肿分枝杆菌标准菌株ATCC 19977作为实验菌株,以期标准化制备稳定、均一的抗酸染色室间质量评价质控片。方法通过比较不同的培养基、不同的消化液及其消化浓度,以及消化时间确保脓肿分枝杆菌在普通光学显微镜下获得最佳的菌体形态和抗酸染色背景,同时获得不同等级(+～++++)均一、稳定的抗酸染色室间质量评价质控片。结果相较于改良罗氏培养基,血平板是脓肿分枝杆菌生长良好的培养基;浓痰理想的消化液是胰蛋白酶;最佳消化浓度是2%;最佳消化条件是37℃消化20min。结论在血平板上生长3d的脓肿分枝杆菌,调菌悬液到0.50麦氏浓度,分别用消化后的痰液稀释200、100、50、10倍,取10μL制备成2cm~2菌膜可分别制备稳定、均一、不同等级的抗酸染色室间质量评价质控片。     

2011～2013年某院胆道感染病原菌与细菌耐药性分析

目的：了解胆总管结石伴胆道感染患者胆汁中主要病原菌分布及药物敏感性特点,为合理使用抗菌药物提供依据。方法对该院2011年1月至2013年12月296例胆汁标本进行回顾性调查,分析细菌培养结果及耐药情况。结果296例胆汁标本中有199例检出致病菌,阳性率占67．23％,其中21例检出两种细菌,共检出220株病原菌,其中革兰阴性菌158株,占71．82％;革兰阳性菌46株,占20．91％;真菌16株,占7．27％;革兰阴性菌对阿米卡星耐药率均较低,其次对他唑巴坦、氨曲南、三四代头孢菌素及喹诺酮类的耐药率相对较低。革兰阴性菌中耐药性最高的为铜绿假单胞菌和大肠埃希菌,对大部分抗菌药物耐药率均大于50．00％。革兰阳性球菌对替加环素的耐药率均为0,对万古霉素、利奈唑胺的耐药率小于30．00％,而对红霉素、克林霉素、氯洁霉素高度耐药,耐药率70．00％～100．00％。结论296例胆总管结石伴胆道感染患者胆汁,主要病原菌是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌及屎肠球菌,对青霉素类耐药性较高。     

肝细胞黏附分子诱导肾癌786-0细胞系凋亡

目的 探讨肝细胞黏附分子(HEPACAM)基因转染肾癌细胞对其凋亡的影响.方法 将携带HEPACAM基因的重组质粒转染786-0细胞,RT-PCR鉴定HEPACAM基因在786-0中的表达;Hoechst染色结合荧光显微镜观察细胞形态改变;FCM检测细胞周期及细胞凋亡情况;Western印迹法检测BAX、BCL-2、C...     

PLCε shRNA质粒构建及功能鉴定

T24细胞株后对PLCε mRNA及对PLCε蛋白表达均有明显抑制,流式细胞术结果表明细胞阻滞于G0/G1期,MTT检测表明重组的载体质粒明显抑制T24细胞增殖活力.结论 针对PLCε基因的shRNA能有效抑制膀胱癌T24细胞中PLCε基因的表达及膀胱癌细胞增殖.     

重庆市2011-2020年临床微生物室间质量评价运行总结分析

目的分析重庆市2011-2020年临床微生物项目室间质量评价运行情况,为提高该市临床微生物鉴定和药物灵敏度检测能力提供依据。方法收集2011-2020年参加该市临床检验中心临床微生物项目室间质量评价实验室结果,对结果进行统计分析。结果2011-2020年参加的实验室从93家发展至138家,合格率从61.3%到94.2%。10年共发放100株细菌,涉及35个菌属,55个菌种。细菌鉴定和药物灵敏度正确率逐年增高,少见菌鉴定和一些药物灵敏度检测仍存在一些问题。结论通过临床微生物室间质量评价,发现实验室检测的不足,持续改进,提高实验室的检测能力,为临床诊疗提供可靠的依据。     

PKCα活性在膀胱癌BIU-87细胞增殖中的作用及其机制

目的:探讨使用蛋白激酶 Cα( protein kinase Cα,PKCα)特异性抑制剂Safingol抑制其活性后对膀胱癌BIU-87细胞增殖能力的影响.方法:应用PKCα抑制剂Safingol、PKCδ特异性抑制剂Rottlerin和PKC激活剂PMA(phorbol-12-myristate-13-acetate)处理人膀胱癌BIU-87细胞,通过MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR及Western印迹法检测立早基因c-fos和c-jun mRNA和蛋白的表达,FCM检验细胞周期的改变.结果:PKCα特异性抑制剂Safingol可明显抑制人膀胱癌BIU-87细胞的增殖并呈剂量依赖性;而PKCδ特异性抑制剂Rottlerin则无此作用,但能提高BIU-87细胞的增殖能力;PKC激活剂PMA则能明显增加BIU-87细胞的增殖能力;FCM检测结果显示,抑制PKCα的活性可使细胞阻滞于G0/G1期;RT-PCR及Western印迹法检测结果表明, c-fos与c-jun的表达与PKCα的活性相关.结论:抑制PKCα活性可明显抑制膀胱癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与抑制c-fos和c-jun的表达有关.