电针对Aβ25—35致阿尔茨海默病模型大鼠cAMP／PKA／CREB信号转导通路的影响

目的探讨电针对Aβ25-35导致的阿尔茨海默病模型大鼠应用电针刺激后cAMP／PKA／CREB信号转导通路的变化。方法48只健康雌性SD大鼠随机分为AD模型组、电针组、假手术组和正常对照组各12只。模型组与电针组采用Aβ25-35建立AD模型后电针组给予电针刺激,模型组未给予电针刺激;假手术组双侧海马注射等量生理盐水;正常对照组不做任何处理。4组均采用Morris水迷宫实验检测大鼠记忆与空间探索能力,采用分光光度计法检测脑组织超氧化物歧化酶与丙二醛水平,采用放射免疫法检测海马cAMP水平,采用免疫组织化学法检测海马5-羟色胺1A受体、蛋白激酶A与p-CREB蛋白表达水平,采用Westernblot检测海马总Tau蛋白表达水平及Tau蛋白Ser396位点磷酸化情况。结果与模型组比较,电针组、假手术组与对照组逃避潜伏期缩短、跨越平台次数增多、目标象限停留时间延长（P〈0．05）,脑组织中超氧化物歧化酶、5-羟色胺1A受体、蛋白激酶A及p-CREB水平增高（P〈0．05）,丙二醛、总Tau蛋白、pTau—Ser396、c—los蛋白水平降低（P〈0．05）;电针组总Tau蛋白、c—los及PKA水平高于假手术组（P〈0．05）,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论电针可明显提高阿尔茨海默病大鼠学习记忆功能和空间探索能力,可能是通过拮抗cAMP／PKA／CREB信号转导通路相关蛋白的异常改变起作用。     

1α,25-（OH）2D3对大鼠成骨细胞周期及相关蛋白表达的影响

目的研究1a,25-（OH）2D3对SD大鼠成骨细胞增殖及相关蛋白的表达的影响。方法采用流式细胞术（FCM）检测细胞周期,RT-PCR和Westernblotting分别检测细胞G。期调节蛋白细胞周期素D1（cyclinD1）、细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）、p21mRNA和蛋白的表达。结果与0nmol·L-1组比较,各1d,25-（OH）2D3干预组细胞周期发生改变,G0／G1期细胞数递减,而S＋G2/M期细胞比例升高,PI增加,差异显著（P〈0．05）;且1a,25-（OH）2D3可诱导细胞cyclinDl、CDK4mRNA及蛋白表达和下调p21（P〈0．05）。结论置1d,25-（OH）2D3可上调cyclinD1、CDK4表达和抑制负性调节因子p21,调节相关蛋白表达以促进成骨细胞增殖。     

1α，25-二羟维生素D3对成骨细胞增殖分化和OPGmRNA/RANKLmRNA表达的影响

目的研究la,25一二羟维生素D,【la,25一（OH）zD,】对体外培育sD大鼠成骨细胞（oB）增殖、分化和细胞核因子K配体（RANKL）及骨保素（OPG）mRNA表达的影响。方法采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24h新生sD乳鼠颅盖骨分离得到的OB,经lnmol／L、10nmol／L、100nmol／L的lct,25-（OH）：D,干预24h、48h和72h后,MTT比色法检测OB增殖率;PNPP法测定碱性磷酸酶（ALP）活性;应用RT-PCR法检测细胞中OPG和RANKL的mRNA表达。结果lnmol／L组成骨细胞A值在干预24h、48h、72hA,分别为（O．335±0．080）、（0．451±0．086）、（O．545±0．085）;100nmol／L组OBALP活性分别增加至（6．274±1．561）U／g、（5．021±1．703）U／g、（6．854±1．468）U／g;OPGmRNA表达分别降低至（0．365±0．068）、（0．340±0．046）、（O．381±0．051）;RANKLmRNA表达分别增加至（O．622±0．089）、（O．550±0．064）、（O．468士0．062）;与0nmol／L组比较,RANKL／OPG比值分别增加138．53％、153．45％、157．71％,差异均具有统计学意义（P〈O．05）。结论高浓度1％25一（0H）2D2可抑制OB增值和OPGmRNA表达。促进其分化和矿化,上调RANKL／OPG的基因表达,从而促进破骨细胞介导的骨吸收,增强骨更新。