西安地区临床患者EBV 感染血清学特征及疾病谱分析

目的 分析西安地区临床患者Epstein-Barr病毒 (EBV)感染的血清学特征及临床疾病构成,为临床诊疗提供依据。方法 以 2016 ~2021年空军军医大学第二附属医院就诊的 7 455例有不明原因发热、皮疹、肝脾及淋巴结肿大等感染症状的临床患者作为研究对象,酶联免疫吸附法检测患者血清 EBV抗衣壳抗原抗体 IgM（VCA-IgM）、抗衣壳抗原抗体 IgG（VCA-IgG）、抗核抗原抗体 IgG（EBNA-IgG）及抗早期抗原抗体 IgG（EA-IgG）。回顾性分析患者血清四种抗体检测结果,分析 EBV感染的性别及年龄差异、患者的感染状态及疾病的临床分布。结果 VCA-IgG和 EA-IgG在女性患者中的阳性率均高于男性（92.93% vs 91.23%, 15.93% vs 11.16%）,差异具有统计学意义（χ2= 7.269,36.360,均 P<0.05）。随着年龄的增长, VCA-IgG,EBNA-IgG和 EA-IgG占比逐渐增高,均在 41~65岁达高峰分别为 41.16%,42.33%和 44.48%;VCA-IgM在 0~3岁患儿中占比最高,达 24.62%。EA-IgG,VCA-IgM,EBNA-IgG和 VCA-IgG在不同年龄段所占比例不同,差异具有统计学意义（χ2=66.424, 539.576, 1 770.513,2 618.477,均 P <0.05）。临床患者 EBV以既往感染为主,占比 85.88%,急性感染占比 7.78%,无感染占比 6.34%。疾病谱中典型传染性单核细胞增多症（简称传单）69例,占比 6.18%,其余非典型感染中占比最多的是自身免疫性疾病（22.38%）,其次是消化系统和呼吸系统疾病,分别占比 16.29%和 13.97%。结论 VCA-IgG和 EA-IgG阳性率在女性患者中大于男性;学龄前患儿为 EBV现症感染的多发人群;临床患者 EBV感染以既往感染为主,急性感染者中疾病分布广泛,多抗体联合检测可为临床诊断提供更详细和可靠的信息。     

三种梅毒血清学检测方法的实验室评价

目的比较RPR,ELISA,TPHA三种血清学实验诊断方法在临床诊断梅毒中的应用。方法将42例一期梅毒、61例二期梅毒、24例潜伏期梅毒患者及健康人的血清分别用RPR,ELISA,TPHA三种方法进行检测,结果进行统计学处理。结果RPR,ELISA,TPHA三种方法针对梅毒患者血清的敏感度分别为85.8%,94.5%,96.9%;特异性分别为87.3%,98.0%,100.0%。其中一期梅毒RPR,ELISA,TPHA三种检测方法的检出率分别为73.8%,92.9%,95.2%;二期梅毒的检出率分别为96.7%,100.0%,100.0%;潜伏期梅毒的检出率分别为79.1%,83.3%,91.7%。应用统计学处理后发现,RPR与TPHA,ELISA的检出率比较均有显著差异,而ELISA,TPHA两种方法之间的检出率无显著差异。结论ELISA,TPHA 2种检测方法与RPR比较,具有较高的灵敏度和特异性,考虑到ELISA较TPHA方法的试剂成本便宜,且操作简便,为目前梅毒血清学检测的首选方法。     

B7-H3沉默对乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化及生物学功能的影响

目的:探讨B7-H3沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化及生物学行为的影响。方法:通过脂质体Lipofectamine TM 2000转染B7-H3 siRNA干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3到乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选后获得B7-H3沉默细胞株MDA-MB-231-ShB7-H3,利用qRT-PCR及Western blot分别检测对照组(WT)、无关干涉组(ShNC)和B7-H3干涉组(ShB7-H3)细胞中B7-H3、EMT标志分子mRNA及蛋白表达水平;利用Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力;利用MTT细胞增殖实验评价各组细胞增殖情况。结果:通过qRT-PCR和Western blot证实B7-H3沉默表达的MDA-MB-231细胞株构建成功;与对照组细胞相比,B7-H3沉默表达抑制MDA-MB-231细胞EMT进程,上皮细胞标志分子E-cadherin和ZO-1表达上调,而间质细胞标志分子vimentin和αSMA表达下调;Transwell实验及MTT细胞增殖实验结果表明B7-H3沉默抑制MDA-MB-231细胞迁移、侵袭及增殖能力。结论:我们的研究结果强调了B7-H3在人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的重要作用,并提示B7-H3与乳腺癌细胞EMT、转移密切相关,并为以B7-H3为靶点的乳腺癌转移治疗提供初步的实验及理论基础。     

不同剪切形式的小鼠Era对L-929细胞的影响

目的: 构建两种完全可调控诱导不同剪接形式小鼠era的真核表达载体,检测不同剪接形式的鼠Era蛋白对细胞生长状态的影响.方法: 构建两种不同剪接形式鼠era的完全可调控诱导表达载体,分别与受体表达载体pERV3稳定共转染鼠成纤维细胞系L-929.用PonA进行诱导表达后,以Western Blotting检测Era蛋白表达水平,以MTT法测定细胞生长曲线,以流式细胞仪检测细胞周期.结果: 成功获得稳定的可完全诱导表达两种不同剪接形式鼠Era蛋白的细胞系;经过PonA诱导后,过表达两种剪接形式Era蛋白的L-929细胞,生长速度加快,G2/M期细胞数量明显减少.结论: 两种剪接形式鼠Era蛋白在真核细胞周期中发挥重要作用.     

海南地区悬浮红细胞实际容量调查

目的：调查海南地区悬浮红细胞实际容量情况。方法随机抽样1U悬浮红细胞100袋,2 U悬浮红细胞100袋及临床输血后回收血袋各10袋（含10 cm左右血辫子）,采液控制器称量其容量（ml）,计算得到实际血液容量,利用SAS软件进行统计学分析。结果1 U空血袋和2 U空血袋的容量分别为26.4 ml、33.2 ml;1U悬浮红细胞和2 U悬浮红细胞的实际容量分别为161.98 ml、327.92 ml,95%置信区间范围分别为（159.76,174.2）、（323.54,332.29）,1 U悬浮红细胞容量极差62 ml,2 U悬浮红细胞极差82 ml。结论建议海南省地区有需要精确记录液体出入量的患者,对输血前悬浮红细胞容量进行精确称量。     

等位基因特异性PCR结合金磁微粒免疫层析检测膀胱癌患者尿液中TERT突变

目的建立可检测人尿液DNA中端粒酶逆转录酶(TERT)启动子区域突变的方法。方法设计等位基因特异性PCR引物,利用温度梯度PCR确定等位基因特异性PCR程序,利用金磁微粒检测板进行扩增产物检测。收集34例膀胱癌患者的尿液,提取DNA,利用该文建立的等位基因特异性PCR结合金磁微粒免疫层析方法检测TERT启动子区域突变。结果建立了结合等位基因特异性PCR和金磁微粒免疫层析的TERT启动子区域C228T和C250T突变检测方法。34例膀胱癌患者尿液中8例患者存在C228T突变,1例患者存在C250T突变。结论该研究建立了TERT启动子区域C228T和C250T突变检测方法,可应用于膀胱癌患者尿液DNA突变检测。     

不同截短型癌基因AEG-1启动子活性分析

目的:分析不同截短型癌基因AEG-1启动子活性,证实与E6/E7表达相关的转录调控因子对AEG-1启动子活性的影响。方法:以宫颈癌HeLa细胞基因组DNA为模版,扩增AEG-1启动子全长序列（-2710/-491）,并应用本实验室改造的启动子活性研究专用绿色荧光蛋白报告载体构建pGL3-basic-EGFP/AEG-1质粒,通过转染HeLa细胞及血管内皮细胞ECV304检测启动子活性。同时,根据AEG-1启动子序列上与E6/E7作用相关的转录调控因子结合位点位置,设计不同截短型AEG-1启动子序列引物,应用pGL3-basic-EGFP载体构建不同截短型AEG-1启动子载体,并分别转染细胞检测启动子活性。结果:AEG-1启动子全长序列pGL3-basic-EGFP/AEG-1载体转染HeLa细胞可见明显绿色荧光蛋白表达,而在血管内皮细胞ECV304中表达为痕量。包含不同转录调控因子C-Myc、SP1、NF-κB、E2F结合位点的不同截短型AEG-1启动子载体在肿瘤细胞中有活性但存在差异。结论:AEG-1启动子为肿瘤特异性启动子,含有与E6/E7表达相关的转录调控因子NF-κB、E2F结合位点的启动子序列为影响AEG-1基因启动子活性的关键区域。