新生儿细菌性肺炎外周血自然杀伤细胞和淋巴细胞亚群与病程进展的关联研究

目的探讨新生儿细菌性肺炎外周血自然杀伤细胞和淋巴细胞亚群与病程进展的关联。方法选择2017年1月-2019年1月深圳市盐田区人民医院收治的细菌性肺炎新生儿80例为研究对象纳入观察组,另选同期健康体检新生儿50例为对照组。观察组患者、对照组入选者入院时分别采集空腹静脉血,用流式细胞仪检测自然杀伤细胞、淋巴细胞亚群等细胞水平,并进行组间比较。采用Pearson相关性检验对患儿的外周血自然杀伤细胞与淋巴细胞亚群的相关性进行分析探讨。结果观察组患者的自然杀伤细胞包括CD16~+、CD56~+、CD59~+等细胞水平均低于对照组,观察组内急性期患儿的CD16~+、CD56~+、CD59~+细胞水平均低于恢复期患儿,三组间比较差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者的CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平低于对照组,CD8~+水平高于对照组;观察组内急性期患儿的CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平低于恢复期患儿,CD8~+水平高于恢复期患儿,三组间比较差异有统计学意义(P0.05)。经Pearson相关性分析,CD16~+、CD56~+、CD59~+与CD3~+、CD4~+呈正相关性,与CD8~+呈负相关性。结论细菌性肺炎新生儿体内的免疫系统紊乱,外周血自然杀伤细胞和淋巴细胞亚群的变化与疾病的进展及恢复有密切关联。因此,通过对细菌感染性肺炎患儿进行免疫功能的监测,对于疾病的进展、疗效评估有参考价值。     

血清标本放置时间对细胞因子检测结果的影响

目的：探讨风湿病患者血清细胞因子检测的重要性,了解静脉血血清标本不同的放置时间对风湿性自身免疫疾病相关的细胞因子检测结果的影响。方法采集26例风湿病患者静脉血血清,分别于室温下放置0、1、4h后,通过液相悬浮芯片技术对其进行一系列细胞因子测定,并进行统计学分析。结果风湿病患者血清中白细胞介素（IL ）-10、IL-13、干扰素诱导蛋白10（IP-10）和干扰素 g （IFN-g ）等细胞因子水平与患者年龄相关（ P＜0．05）;血清中IL-10、IL-12p70、正常T细胞激活上调性表达因子（RANTES）、IP-10和巨噬细胞炎症蛋白1β（MIP-1β）等细胞因子水平与患者疾病类型相关（P＜0．05）;血清室温放置4 h内各标本中细胞因子水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论液相悬浮芯片技术可高效分析风湿病患者血清细胞因子谱,有助于疾病诊断和评估。风湿病患者血清细胞因子检测时限可延长至室温下4h,可以满足临床和基础研究的检测要求。     

腕踝针疗法对关节镜下肩袖修补术后肩关节功能恢复的影响

【目的】探讨腕踝针疗法对关节镜下肩袖修补术后肩关节功能恢复的影响。【方法】将76例关节镜下肩袖修补术后返院康复的患者随机分为对照组和观察组，每组各38例，对照组给予常规康复治疗，观察组在对照组治疗的基础上，给予腕踝针治疗。治疗1周为1个疗程。治疗1个疗程后，观察2组患者治疗前后视觉模拟量表（VAS）评分的变化情况，以及肩关节活动度（ROM）的情况。比较2组患者治疗前后肩关节功能活动评分（UCLA）的变化情况，并评价2组的安全性及不良反应的发生情况。【结果】（1）研究过程中，观察组失访3例，对照组失访1例。最终观察组35例、对照组37例纳入疗效统计。（2）治疗后，2组患者的VAS、UCLA评分均明显改善（P<0.05），且观察组在改善VAS、UCLA评分方面明显优于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）治疗后，2组患者的肩关节活动度均明显改善（P<0.05），且观察组在改善肩关节活动度方面明显优于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。（4）2组患者治疗期间均未出现明显不良反应，2组患者的不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。【...     

木瓜蛋白酶体外对血小板聚集的抑制作用

目的：以洗涤血小板为模型,观察木瓜蛋白酶在体外对血小板聚集的抑制作用,以探讨其抗血栓作用的可能机制。方法：将不同剂量木瓜蛋白酶与洗涤血小板作用,以血小板聚集分析仪检测ADP、花生四烯酸（AA）、胶原和凝血酶诱导的血小板最大聚集率,以流式细胞仪检测活化血小板膜纤维蛋白原受体（FIB-R）和P-选择素表达水平,以SDS-PAGE分析血小板肌动蛋白聚合体的变化。检测ADP诱导的原发性高血压（PH）及急性心肌梗死（AMI）患者血小板最大聚集率和FIB-R表达水平。结果：木瓜蛋白酶剂量依赖性地抑制血小板聚集,降低血小板最大聚集水平,血小板聚集水平与木瓜蛋白酶剂量呈负相关（P〈0.01）。木瓜蛋白酶剂量依赖性地抑制ADP诱导的血小板FIB-R表达,降低FIB-R表达水平（P〈0.01）。木瓜蛋白酶降低ADP诱导的血小板膜P-选择素表达水平和抑制肌动蛋白聚合体增加（P〈0.01）。木瓜蛋白酶抑制PH及AMI患者血小板聚集和FIB-R表达（P〈0.01）。结论：木瓜蛋白酶通过抑制活化血小板膜纤维蛋白原受体的表达,并抑制肌动蛋白聚合以及释放反应从而剂量依赖性地抑制血小板的聚集反应,有抗血栓形成作用。     

流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌对氟康唑敏感性的研究

目的 建立流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌对氟康唑敏感性试验(FCST)的方法.方法用FCST法对标准菌株在不同实验条件下检测以探讨最佳实验条件,对FCST法与NCCLS M27-A法进行对比,得出最低抑菌浓度(MIC)判断标准;同时对30株临床菌株进行FCST法双份平行检测并与M27-A进行比较.结果 流式细胞术快速检测不同比例死菌与活菌混合液检测值及设定值具有良好的相关性(r=0.999);MIC判断标准为死菌比率在连续系列管中高浓度管比低浓度管出现＞50.0%的增长,并且保持稳定或连续增长,则可判定高浓度管药物浓度为该菌的MIC值;对30株临床分离菌株的检测发现,该法具有很好的重复性,与M27-A比较,两者一致率为93.3%,结果差异无统计学意义(P＞0.05),并有很好的相关性(r=0.822).结论 FCST具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景.     

α-烯醇化酶的翻译后修饰对类风湿关节炎免疫诊断价值

探讨α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)中的诊断意义。经过原核表达、Ni柱纯化等操作,成功得到ENO1蛋白。将纯化的蛋白分别进行瓜氨酸化及氨甲酰化修饰,得到瓜氨酸化α-烯醇化酶(citrullinatedα-enolase peptide,cit-ENO1)、氨甲酰化α-烯醇化酶(carbamylatedα-enolase peptide, carp-ENO1)以及瓜氨酸化氨甲酰化α-烯醇化酶(citrullinated-carbamylatedα-enolase peptide, cit-carp-ENO1)。选取RA患者30例(RA组)以及同期体检正常者35例(对照组),采用ELISA探究未修饰的蛋白以及这3种修饰后的蛋白对RA患者的诊断价值。通过SPSS软件构建ROC曲线对不同修饰蛋白的诊断效能进行评估,当cut-off值取95%的特异度时,carp-ENO1的灵敏度为26.7%,cit-ENO1的灵敏度为46.7%,cit-carp-ENO1的灵敏度为63.3%。ENO1蛋白修饰之后对RA检出率显著提高,提示瓜氨酸化或者氨甲酰化之后的蛋白作为抗原对RA具有一定的诊断参考价值。     

大萼香茶菜甲素对白血病细胞株Kasumi-1体外作用的研究

目的：观察大萼香茶菜甲素（macrocalyxin A,MA）体外对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡的作用。方法：以不同质量浓度的（4、8、12、16μg/mL）MA体外作用于Kasumi-1细胞,运用细胞计数、MTT比色法检测细胞生长抑制率;细胞形态学、细胞免疫表型CD11b、CD13检测研究细胞分化;细胞形态学、Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;DNA亚二倍体及Annexin-V/PI双标记检测细胞凋亡率;质谱分析技术检测用药前后细胞小分子蛋白变化。结果：MA对Kasumi-1细胞有明显的抑制增殖作用,呈现作用时间和剂量的量效关系。较低浓度MA可以诱导细胞分化,CD11b表达明显上升,且有剂量量效关系;高浓度促进细胞凋亡,细胞瑞氏染色后出现典型的凋亡小体,亚G1峰显著增加,Annexin-V＋/PI-表达升高,Hoechst33258荧光染色出现凋亡特征性改变,琼脂糖电泳观察到DNA＂梯状条带＂。质谱分析显示,药物作用组与空白组对照分析出现13个差异蛋白峰,质荷比集中在1053-8581之间。结论：MA能抑制Kasumi-1细胞增殖,促进细胞分化,诱导细胞凋亡的作用。     

冬凌草甲素抗肿瘤机制实验研究概况

冬凌草甲素（Oridonin）具有明显的抗肿瘤作用，既可以抑制细胞增殖，抑制核转录因子-KB（NF—KB），丝裂原活化蛋白激酶（MAPK），表皮生长因子受体等相关信号通路防止肿瘤发生，诱导细胞凋亡，也可以抑制毒性药物损伤自身细胞DNA，增强吞噬细胞吞噬作用等，有望成为一种天然抗癌新药。     

浆膜腔积液图文报告提示早期结核性积液的相关指标及临床意义

目的浆膜积液细胞图文报告诊断早期结核性积液与一般结核性积液及慢性非特异炎症积液进行比较分析,探讨早期结核性积液相关指标及临床意义。方法收集浆膜积液细胞图文报告提示早期结核性积液32例,一般结核积液107例及慢性非特异性炎症积液53例。所选浆膜积液标本经规范计数、推片、染色及图文报告分析。并比较各组恋者临床资料及生化ADA、LDH结果。结果早期结核组和一般结核组积液有核细胞数、ADA、LDH检测值明显高于慢性非特异性炎症组(P<0.01);早期结核组LDH、中性粒细胞比例明显高于一般结核组(P<0.01),而两者有核细胞计效和ADA值无明显区别。结论早期结核性积液细胞图文报告模式有别于一般结核性积液和非特异性炎症性积液,可作为一种独立报告模式。     

四嗪二甲酰胺诱导肺癌细胞株EBC-1凋亡的作用及其机制

目的 研究四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)诱导肺癌细胞株EBC-1凋亡的作用及分子机制.方法 将不同浓度的ZGDHu-1与EBC-1细胞在体外培养,采用5′-溴-2′脱氧尿苷(BrdU)-酶联免疫吸附法(ELISA)观察ZGDHu-1对EBC-1细胞的增殖抑制作用;采用Annexin V/PI双标记染色与ELISA法测定凋亡细胞核小体等技术检测ZGDHu-1诱导EBC-1细胞凋亡的作用;采用流式细胞术检测经ZGDHu-1作用后EBC-1细胞磷酸化p38MAPK和Stat3表达的变化;采用Western blot法检测Bcl-2、Bax、Fas、p53、caspase-3蛋白表达的变化.结果 ZGDHu-1能抑制EBC-1细胞增殖,并呈现作时间和剂量依赖性,作用24、48和72 h后的IC50分别为(295±25)ng/ml、(112±8)ng/ml和(23±2)ng/ml.经ZGDHu-1作用后,EBC-1细胞中的Annexin V+/PI-细胞升高,细胞内核小体含量显著增加,二者均呈现剂量依赖性.EBC-1细胞与50、200和500 ng/ml的ZGDHu-1培养48 h后,磷酸化p38MAPK的表达率分别为67.4%、88.2%和91.1%,空白对照组为10.6%;而磷酸化Stat3的表达率分别为56.5%、43.6%和34.6%,空白对照组为89.1%.Western blot检测结果显示,随药物作用浓度的升高,Bax、Fas和p53蛋白的表达显著上调,Bcl-2的表达没有变化,caspase-3蛋白的表达则明显下调.结论 ZGDHu-1能显著抑制EBC-1细胞增殖,并诱导其凋亡.Fas介导的线粒体途径可能是ZGDHu-1诱导EBC-1细胞凋亡的通路之一,p38MAPK和Stat3激活也参与了ZGDHu-1诱导EBC-1细胞凋亡的过程.