牛蛙血细胞核酸和脊髓运动神经细胞的显色观察

目的建立牛蛙血细胞核酸及脊髓运动神经细胞显色方法,更好地服务教学和临床。方法制备临时装片,用福尔根反应和甲基绿-派洛宁对细胞内的核酸进行显色,用甲苯胺蓝染液对脊髓运动神经细胞进行染色。结果福尔根反应后,细胞核呈紫红色,细胞质呈绿色。该反应的最适条件为室温水解2 min,60℃水解8 min,再室温水解2 min,复染40 s。甲基绿-派洛宁染色后,细胞核呈蓝色,细胞质呈粉红色。甲苯胺蓝染色后,脊髓运动神经细胞被染成深蓝色。结论福尔根反应中亮绿复染的最适时间为40 s。甲基绿-派洛宁能够对细胞内的DNA和RNA同时进行定位、定性分析。该研究方法对实验教学、科学研究和临床实践具有一定的理论和实际意义。     

改良治疗干预计划降低ICU患者身体约束率

目的 探讨改良治疗干预计划(TIP)降低ICU患者身体约束率的效果.方法 将276例ICU患者按住院时间分为对照组和干预组各138例,分别进行常规约束护理和采用改良TIP量表(在原量表的基础上,界定肌力,量化意识状态和定向力评估,完善二、三级标准中的条目)评估并实施约束护理.结果 干预后,干预组患者身体约束率、约束时间、非计划拔管和皮肤损伤发生率显著低于对照组(P＜0.05,P＜0.01).结论 采用改良TIP量表指导身体约束使用,可降低ICU患者身体约束率及不良事件发生率.     

1株引起食物中毒事件的肠炎沙门菌定量蛋白质组学分析

目的 基于蛋白质组学,深入揭示1株引起食物中毒事件的肠炎沙门菌21A的分子特征,从而更好地防控食源性疾病的发生。方法 利用定量蛋白质组学技术对肠炎沙门菌株21A进行分析,使用Tims TOF Pro仪器在数据非依赖采集模式下采集质谱数据,利用MSstats软件完成肽段与蛋白的定量以及差异蛋白统计,并对差异表达蛋白的生物学功能进行GO、KOG功能富集、KEGG通路富集分析与CAZY注释、互作分析。结果 菌株21A中共鉴定出3183种蛋白质,其中差异蛋白300种。GO分析表明,差异蛋白主要与催化、结合、细胞内过程和代谢有关;KOG和KEGG分析显示,差异蛋白主要富集在6种代谢通路中;CAZY分析发现,37.96%的蛋白质为糖苷水解酶。结论 本研究揭示了肠炎沙门菌株21A的蛋白质组学特征,该菌株在入侵和感染过程中采用多种生存策略,包括增强毒力因子表达,增加脂质降解和诱导铁获取等。对代谢相关蛋白质的深入分析,有助于深入了解该菌的传播与感染机制,更好地防控食源性疾病的发生。     

新冠病毒Nsp1蛋白结构与功能的生物信息学分析及原核表达

目的 Nsp1是新冠病毒的主要毒力因子,介导了病毒在宿主细胞中的免疫逃逸,扩大了病毒感染范围。本研究对Nsp1进行系统生信分析及原核表达,有助于全面理解该蛋白在新冠病毒侵染宿主细胞中的分子机理。方法 采用Pfam、TMHMM、ProtScale、ExPASy和SignalP 4.0等工具对Nsp1的翻译后修饰、理化性质、跨膜螺旋、相互作用网络、同源性及进化特点等进行系统分析;利用分子克隆技术构建重组表达载体pET-22b-Nsp1并进行原核表达。结果 Nsp1由180个氨基酸组成,分子量19.78 kDa,等电点为5.36,不稳定指数28.83,在哺乳动物中的半衰期约30 h,在大肠杆菌内超过10 h,有12个可能的磷酸化位点和3个O-糖基化位点,无信号肽和跨膜螺旋,亲水性较强;二级结构分析显示,Nsp1中无规则卷曲占比最高(45.00%),其次是α螺旋(25.56%)和延伸链(20.56%),β-转角占比最低(8.89%);序列对比和进化分析显示,与SARS-CoV-2 Nsp1序列一致性最高的是蝙蝠非典型冠状病毒WIV1(85.0%);原核表达发现Nsp1主要在沉淀中表达,经质谱鉴定目的蛋白就是Nsp1。结论 本研究为新冠病毒Nsp1的表达、纯化及功能分析提供了重要借鉴,有助于进一步揭示Nsp1的生物学功能及开展相关抑制剂和抗病毒药物的研发。     

兔胚泡在着床前的形态变化

用透射电镜观察和比较了交配后4～7天兔胚泡的内细胞团细胞细微结构的变化。结果表明,交配后5天胚泡中的内细胞团细胞排列成单层,并在内侧出现原始内胚层以后,内细胞团细胞开始分化。我们的观察显示,兔胚泡的原始内胚层不是由内细胞团分层形成,而可能是由分散在胚泡壁滋养层内侧、形态与内细胞团细胞相似的一些细胞衍生而成。本文并对极滋养层的断裂和消失全过程进行了描述和讨论。     

中医辨证治疗功能性消化不良的临床研究

目的应用中医理论探讨功能性消化不良(functionaldyspepsia,FD)的发病机制和治疗方法.方法 FD患者138例,年龄14岁～78岁;有典型的消化不良症状,符合FD诊断标准:即有持续或反复发作上腹不适或疼痛、餐后饱胀、腹部胀气、嗳气、恶心、反酸等症状;病程持续或累计超过4wk,随访2a～4a无器质性病变发生,即2 a～4 a以来内镜检查正常或排除糜烂、溃疡及肿瘤等器质性病变,实验室、B超及X线等检查排除肝、胆、脾等器质性病变.全部病例随机分为中医治疗组98例,其中男40例,女58例,年龄16岁～72岁,平均年龄42岁±14岁;西药治疗组(对照组)40例,其中男14例,女26例,年龄14岁～78岁,平均年龄40岁±14岁.经统计学处理,两组差异无显著性,具有可比性(P>0.05).中医治疗组采用中医辨证方法进行治疗,98例FD根据中医辨证分为肝胃不和型、脾胃虚弱型、肝胃郁热型、胃阴不足型、气滞血瘀型,疗程结束后,对患者的临床症状改善情况进行比较分析.结果治疗组98例经中医辨证治疗4 wk后,痊愈24例,显效44例,有效21例,无效9例,总有效率91%;对照组40例应用西药进行治疗4 wk后,痊愈7例,显效21例,有效7例,总有效率87.5%,两组临床疗效比较差异无显著性(P>0.05,x2=1.22).结论中医对功能性消化不良的理论阐述具有较好临床指导意义,中医中药对功能性消化不良的治疗具有较好疗效.     

人ApoE转基因小鼠与TGE_（7－2） TGE_（7－3）转基因鼠系的建立

用含小鼠金属硫蛋白（ＭＴ－１）基因启动子与突变的人ＡｐｏＥ７基因的６．０ＫｂＤＮＡ片段作为目的基因制备转基因小鼠，利用显微注射法将目的基因导入４４１枚受精卵，移植于２０只假孕鼠，其中１５只受孕，共产仔鼠８０只，经ａ－３２Ｐ斑点杂交与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法鉴定出两只整合有人ＡｐｏＥ基因的转基因雌鼠，其拷贝数分别为２和５。将两只首建鼠（雌性Ｆｏ代）与正常雄鼠交配，建立Ｆ１代转基因鼠系ＴＧＥ７－２和ＴＧＥ７－３，为进一步从整体上研究ＡｐｏＥ在脂质代谢中的作用以及ＡｐｏＥ与动脉粥样硬化和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病的关系创造条件。     

纵隔异位甲状腺乳头状腺癌一例

患者女 ,5 1岁。 4个月前不明原因胸闷、心累 ,均在夜间出现 ,伴咳嗽、咳少量白色黏液痰 ,无其他不适。院外CT示右下肺块影。入院后纤维支气管镜显示 ,支气管黏膜炎症改变。入院检查 :颈部无包块 ,CT示前中纵隔肿块 ,以畸胎瘤可能性大。术中见肿块位于主动脉与心脏交界区 ,大小约6 .0cm× 5 .0cm× 5 .0cm ,包膜完整 ,边界清楚 ,其包膜与心包黏连 ,手术完整切除肿块。病理检查 :巨检 :灰红色不规则结节 3.6cm× 3.6cm×2 .8cm ,包膜完整 ,切面灰白灰红色 ,质软 ,可见部分囊性区 ,囊内可见白色混浊液体。镜检 :肿瘤组织由薄层纤维组织构成…     

新冠病毒受体蛋白ACE2结构与功能的生信分析及原核表达

目的：构建ACE2原核表达载体并对其进行结构与功能的生物信息学分析，探究其介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制。方法：采用Protparam、ProtScale、NetPhos3.1、SignaIP 4.1、YinOYang 1.2 Server、NetNGlyc 1.0 Server、SOPMA、SWISS-MODEL、Blast、Clustal X2和MEGA7.0等对ACE2的生物学特性、同源性及进化性进行系统分析。采用分子克隆技术构建pET-22b-ACE2，在大肠杆菌中进行表达。结果：ACE2全长805个残基，呈酸性，分子量为92.5 kD,pI=5.36，共含77个潜在的磷酸化位点和14个糖基化位点，是一种亲水性较强的跨膜蛋白。ACE2主要散布于内质网膜、高尔基体和胞质膜，二级结构组成以α-螺旋为主。原核表达结果显示，细菌裂解后，沉淀中ACE2表达多于上清与全菌，为疫苗研发提供了理论依据。多序列比对和进化分析显示，倭黑猩猩与智人亲缘关系最近。结论：本研究为ACE2蛋白的纯化及研究奠定了基础，有助于阐明ACE2介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制，对SARS-Co...