原发性食管淋巴上皮瘤样癌1例并文献复习

淋巴上皮瘤样癌(lymphoepithelioma-like carcinoma,LELC)最早于1921年由Regaud等报道,指发生于鼻咽部之外,但在组织病理学上与鼻咽部淋巴上皮瘤相似的肿瘤,其形态学特点是未分化癌组织中伴有大量淋巴细胞浸润。LELC可发生于胃、肺、涎腺、膀胱、胸腺、子宫颈、阴道和皮肤等部位,其中以原发于食管的LELC最为罕见。     

急性缺血缺氧诱导肝癌细胞自噬及其相关机制

目的:研究急性缺血/缺氧时肝癌细胞HepG2增殖率及自噬的变化,探讨自噬的作用及机制。方法 :以Western印迹法检测缺氧诱导因子-1(hypoxia induced factor-1,HIF-1)表达并确定体外模拟模型的可靠性;吖啶橙染色后采用荧光显微镜定性观察自噬;以自噬特异性蛋白LC3及P62(P62/SQSTM1)信号蛋白的变化表明自噬的诱导和可能的调控机制;以CCK8检测3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬前后急性缺血/缺氧下HepG2细胞的增殖率变化。结果:急性缺血/缺氧2 h后,HepG2细胞显著表达HIF-1α蛋白,表明体外急性缺血/缺氧模型的可靠性。急性缺血/缺氧可快速诱导肝癌细胞HepG2产生自噬,继而出现HepG2细胞显著增殖活跃;3-MA抑制自噬后,可特异性抑制急性缺血/缺氧所诱导的HepG2细胞增殖;急性缺血/缺氧条件下HepG2细胞P62信号蛋白表达显著下调,自噬抑制后逐渐恢复正常表达水平。结论:自噬在肝癌体外急性缺血/缺氧过程中对肿瘤起到保护作用,其机制可能与P62蛋白的清除有关;抑制自噬可显著降低肝癌细胞增殖率。自噬可能成为肝癌治疗的新靶点。     

病理T1期浸润性肺腺癌不同病理亚型的临床特征及其预后分析

目的：研究T₁期浸润性肺腺癌5种常见病理亚型的临床病理特征及其对预后的影响,为肺腺癌临床监测及治疗提供参考。方法：纳入上海交通大学医学院附属瑞金医院2009年1月至2011年1月间行肺癌手术,且术后经病理检查证实为浸润性肺腺癌、肿瘤直径≤3 cm的患者,分别选取贴壁状为主型、腺泡为主型、乳头状为主型、微乳头状为主型、实性为主型各24例,5组共计120例。对患者的临床病理资料包括年龄、性别、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）水平、肿瘤分化程度、病理亚型等进行回顾性分析,应用Kaplan-Meier法计算生存率,Log-Rank检验比较生存差异;多因素COX回归分析判定预后的危险因素。结果：5组不同病理亚型肺腺癌患者的年龄、性别、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）水平、肿瘤细胞分化程度差异均无统计学意义（P>0.05）,而5组间的胸膜浸润、有无淋巴结转移、术后TNM分期及术后有无复发进展情况差异有统计学意义（P<0.05）。5种肺腺癌亚型中,微乳头状为主型的淋巴结转移率（62.5%）和术后复发转移率（41.6%）最高。进一步行生存率分析显示,贴壁状为主型患者的预后最好,5年生存率为96.0%,微乳头状为主型患者预后最差,5年生存率为66.7%,2组间差异有统计学意义（P<0.05）。病理亚型、淋巴结转移情况、术后TNM分期是影响T₁期浸润性肺腺癌患者预后的危险因素,且病理亚型、淋巴结转移情况还是影响其预后的独立危险因素（OR均>1）。结论：T₁期浸润性肺腺癌患者的预后与其病理亚型有关,而其中微乳头状为主亚型患者有着较高的淋巴转移率和更差的预后,对于该亚型的T₁期浸润性肺腺癌患者,在术后可能需采取更积极的治疗和严密观察。     

利用RNA干扰诱导产生的CD8+CD28-抑制性T淋巴细胞的免疫学特性

目的 探讨通过RNA干扰技术诱导产生的CD8+ CD28-抑制性T淋巴细胞(Ts细胞)的免疫学特性.方法 取SD大鼠骨髓,培养分离树突状细胞(DC),设计、合成主要组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类小片段干扰RNA(siRNA),以MHC Ⅰ siRNA转染DC.先以Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液刺激转染MHCI siRNA的DC,然后将DC与从SD大鼠脾脏分离得到的CD8+T淋巴细胞共同培养,通过磁珠法分离出Ts细胞.分别在由SD大鼠脾脏淋巴细胞(反应细胞)和Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞(刺激细胞)组成的混合淋巴细胞培养体系中加入数量不等的Ts细胞,检测反应细胞增殖情况;分别以Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞和卵白蛋白(OVA)刺激SD大鼠脾脏淋巴细胞,然后再按不同比例加入Ts细胞,检测各组脾脏淋巴细胞的增殖情况;在由SD大鼠脾脏淋巴细胞、Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液和Ts细胞组成的混合淋巴细胞培养体系中加入可溶性重组白细胞介素2(rrIL-2),观察IL-2对Ts细胞功能的影响;采用实时定量聚合酶链反应(PCR)测定Ts细胞中转化生长因子β(TGF-β和γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达,流式细胞仪和实时PCR检测Ts细胞上CD25分子的表达.结果 Ts细胞对SD大鼠脾脏淋巴细胞和Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞之问的混合淋巴细胞反应(MLR)具有抑制作用,但对于SD大鼠脾脏淋巴细胞和OVA之间的MLR则无抑制作用.在SD大鼠脾脏淋巴细胞、Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液和Ts细胞组成的混合淋巴细胞培养体系中加入rrIL-2后,SD大鼠脾脏细胞的增殖并无明显增加(P＞0.05).与CD8+CD28+T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞比较,Ts细胞的TGF-β和IFN-γ mRNA的表达量明显升高(P＜0.01,P＜0.05),而CD25的表达量明显降低(P＜0.05).结论 采用经MHC I siRNA干扰的DC能够诱导CD8+T淋巴细胞产生CD8+ CD28-Ts细胞;Ts细胞在体外具有免疫抑制特性,其免疫抑制作用不被外源性IL-2所逆转,且其免疫调节作用具有抗原特异性.     

FGFR3在大鼠肝硬化模型中的动态表达研究

目的：观察大鼠肝硬化形成过程中成纤维细胞生长因子受体3（Fibroblast growth factor receptor3,FGFR3）的表达变化。方法：70只雄性SD大鼠,随机取10只作为对照组,其余60只作为肝硬化组。采用剂量频次渐变式四氯化碳（CCL）腹腔内注射建立肝硬化大鼠模型。检测2组大鼠的血清ALT、体重、肝体比,病理组织行包括HE和嗜银染色．并采用荧光定量聚合酶链反应（real—timePCR）和蛋白质印迹（Western blot）检测FGFR3基因和相应蛋白在肝硬化形成过程中的表达变化。结果：肝硬化组大鼠的血清ALT、肝体比和死亡率均显著高于对照组（P均〈0．01）;而体重则显著低于对照组（P〈0．01）;肝硬化组大鼠肝组织大体观察、HE染色及嗜银染色均呈明显肝硬化表现,而对照组则无该表现：real-timePCR及Western-blot结果显示,FGFR3在肝硬化形成过程中总体表达逐渐增强。结论：剂量频次渐变式GEl4腹腔内注射法是一种高效、低成本的大鼠肝硬化建模方法。而肝组织FGFR3在肝硬化发生、发展过程中的动态表达在一定程度上反映了肝纤维化及肝硬化程度。     

索拉非尼抑制肝癌细胞增殖中自噬的作用及其机制

目的：研究分子靶向药物索拉非尼在体外对人肝癌细胞株HepG_2增殖抑制过程中自噬的表达及作用,并探讨其可能机制。方法：以吖啶橙染色荧光显微镜对自噬进行定性观察;cell counting kit-8检测活性氧（reactiveoxygen species,ROS）抑制前后HepG_2细胞成活率的变化;RT-PCR检测自噬基因Beclin-1表达的变化。Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin-1的变化：荧光分光光度计检测胞内二氯荧光素DCF的荧光强度。结果：索拉非尼对肝癌细胞HepG_2具有显著的抑制作用;索拉非尼可诱导肝癌细胞HepG_2产生自噬及ROS,自噬在基因及蛋白水平表达均增加;抑制ROS的产生可减少索拉非尼诱导的肝癌细胞HepG_2自噬的表达量,自噬的抑制增强了索拉非尼对肝癌细胞的抑制作用。结论：ROS参与索拉非尼诱导肝癌细胞HepG_2的自噬表达,索拉非尼在抑制肝癌细胞自噬过程中自噬可能起到保护作用,抑制自噬可能为提高进展期肝癌病人索拉非尼分子靶向治疗敏感性提供新的思路。     

右半结肠特发性巨结肠手术治疗一例

1病例介绍 患者女,62岁,因＂反复腹胀、便秘2年余,加重1月＂入院。于2010年3月起开始出现腹胀、大便不畅,既往偶有便秘,1-2天排便一次。外院诊为＂肠梗阻、慢性传输型便秘”。予以灌肠、导泻等保守治疗症状缓解。此后患者又间断性出现上述症状数次,均以灌肠保守治疗后好转。     

Beclin-1在肺腺癌发生发展中的作用及其对预后的影响

目的研究自噬特异性标志物Beclin-1在肺腺癌发生、发展中的变化及其对术后患者预后的影响。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法分别检测108例正常肺组织、肺不典型腺瘤样增生(AAH)、肺原位腺癌、肺微浸润性腺癌及浸润性腺癌组织标本中自噬特异性标志物Beclin-1在基因及蛋白水平的表达,比较Beclin-1在不同组织中及不同病理分期肺腺癌患者肿瘤组织中的变化,分析其对肺腺癌患者术后预后的影响。结果肺腺癌Beclin-1基因及蛋白水平的表达均显著低于正常肺组织(P0.05),浸润性肺腺癌组织表达最低;早期肺腺癌(Ⅰ~Ⅱ期)患者肿瘤组织Beclin-1的表达高于中晚期肺腺癌(Ⅲ~Ⅳ期)患者(P0.05)。肺腺癌伴淋巴结转移者肿瘤组织Beclin-1的表达低于淋巴结阴性患者(P0.05)。肺腺癌肿瘤组织Beclin-1阳性表达患者术后生存时间显著高于Beclin-1阴性表达者(P0.05)。结论 Beclin-1的表达与肺腺癌的发生、发展相关;肺腺癌Beclin-1的表达缺失预示肺腺癌患者术后生存率较差。Beclin-1可能成为预测肺腺癌患者术后预后的重要标志物。     

全胸腔镜肺叶切除术的学习体会(附169例报告)

目的总结全胸腔镜肺叶切除术操作步骤及技巧的学习体会。方法对2011年11月—2012年5月,在瑞金医院胸外科学习期间参加169例全胸腔镜下肺叶切除术的操作步骤进行详细总结。结果全组手术顺利,无手术死亡患者,中转开胸小切口辅助13例,中转开胸率7.69%;手术时间70~139 min,平均117 min;手术出血50~1 200 mL,平均250 mL。结论全胸腔镜肺叶切除手术操作难度大,严格掌握手术的适应症,有传统的开放解剖性肺叶切除手术经验,借鉴成熟的手术操作程序,可缩短学习曲线。     

自噬在吉西他滨诱导肺癌细胞A549凋亡中的作用及其相关机制

  目的  研究自噬对吉西他滨(gemcitabine, GEM)诱导的肺癌细胞A549凋亡的影响并探讨其可能机制。  方法  MDC染色后采用荧光显微镜对自噬进行形态观察; 以CCK8检测3-MA抑制自噬前后经吉西他滨诱导的A549细胞存活率; RT-PCR检测自噬相关基因Beclin-1表达的变化。Western blot分别检测自噬相关性蛋白Beclin-l及凋亡活化蛋白Caspase-3的变化。  结果  吉西他滨可诱导肺癌细胞A549产生自噬, 自噬在基因及蛋白水平表达均增加; 3-MA和吉西他滨联合用药可增强肺癌A549细胞凋亡。  结论  吉西他滨诱导肺癌细胞A549凋亡的过程中自噬可能起到保护作用, 3-MA特异性抑制自噬后可增强吉西他滨诱导的A549细胞凋亡。