叶下珠复方Ⅱ号对肝癌HepG2细胞lncRNA CCAT1表达的调控作用

目的 探讨叶下珠复方Ⅱ号通过抑制长链非编码RNA（lncRNA）结肠癌相关转录因子1（CCAT1）的表达,恢复小分子RNA let-7a（microRNA let-7a）的表达,从而发挥抗肝癌的作用机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测正常肝细胞LO2与肝癌HepG2细胞lncRNA CCAT1的表达,比较2种细胞的表达差异。采用噻唑蓝（MTT）比色法测定肝癌HepG2在不同浓度的叶下珠复方Ⅱ号与5-氟尿嘧啶（5-FU）作用24,48,72 h后细胞增殖的情况。体外培养肝癌HepG2细胞,设空白组,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组（1.6,0.8 g·L^-1）,应用Real-time PCR检测各组lncRNA CCAT1,microRNA let-7a和其靶基因高迁移率蛋白A2（HMGA2）,N-RAS基因（N-RAS）mRNA表达改变;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组HMGA2和细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）的蛋白表达。结果 与LO2细胞比较,肝癌HepG2细胞lncRNA CCAT1的表达明显上调（P<0.05）。通过MTT比色实验测定出叶下珠复方Ⅱ号和5-FU作用于肝癌HepG2细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为1.649,0.044 648 g·L^-1;与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组（1.6,0.8 g·L^-1）均可抑制肝癌HepG2细胞增殖（P<0.05）,叶下珠复方Ⅱ号高质量浓度组（1.6 g·L^-1）最为显著。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组（1.6,0.8 g·L^-1）lncRNA CCAT1 的表达明显抑制（P<0.05）,高质量浓度组microRNA let-7a表达明显上调（P<0.05）,叶下珠复方Ⅱ高、低质量浓度组HMGA2 mRNA表达均明显下调,高质量浓度组N-RAS mRNA表达明显下调（P<0.05）。Western blot结果表明,与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组（1.6,0.8 g·L^-1）的HMGA2,Cyclin D₁蛋白表达均明显下调（P<0.05）。结论 叶下珠复方Ⅱ号可以通过抑制HepG2细胞lncRNA CCAT1表达,恢复microRNA let-7a表达,并抑制其下游相关靶基因的mRNA和蛋白表达,进而抑制肝癌细胞增殖,发挥抗肝癌作用。     

门静脉癌栓血管内射频消融联合支架植入近中期临床观察:初步经验

目的 观察Habib~(TM) Ves Open射频消融导管对门脉癌栓进行血管内治疗联合覆膜支架植入的临床效果,探索术中门脉癌栓组织活检的安全性和可行性。方法选择自2014年6月~2015年12月肝癌门脉癌栓患者13例,应用Habib消融导管血管内射频消融联合覆膜支架植入治疗。在造影了解癌栓的部位、范围后;采用5F活检钳在透视下对癌栓抓取活检共3例;然后自鞘内送5F Habib~(TM) Ves Open射频消融导管至癌栓对癌栓行逐段消融,结束后对消融段植入覆膜支架。术后观察患者临床症状改善情况及生存状况,并实验室相关指标复查及影像学检查,观察门静脉癌栓消融治疗后的状态3~18个月。结果 所有13例患者均顺利实施了血管内射频消融联合覆膜支架植入,无严重并发症发生。3例Ⅱ型癌栓者成功活检送病理,2例增生型,1例坏死型。9例上腹胀满者术后明显缓解;4例合并腹腔积液者中2例明显缓解,2例完全消失;1例顽固性腹泻者术后第3天停止。随访3~18个月,6例Ⅱ型癌栓者病情稳定,消融通道血流通畅,1例Ⅱ型、5例Ⅲ型和1例Ⅳ型癌栓者先后出现癌栓进展,消融通道狭窄甚至闭塞。生存时间超过3个月者12例;超过6个月10例;超过12个月8例;超过18个月5例。结论Habib TM Ves Open消融导管对门脉癌栓进行血管内射频消融联合覆膜支架植入可能获得比单纯血管内消融更好的疗效。在血管鞘的保护下,用活检钳对癌栓进行抓取活检技术上是安全可行的。     

低位直肠癌双吻合器保肛术后吻合口瘘的预防

目的：探讨低位直肠癌双吻合器保肛术后预防吻合口瘘的措施。方法：回顾性分析我院行双吻合器保肛手术的76例低位直肠癌患者的资料。结果：所有病例均顺利完成手术,术后切缘病理检查均未见癌细胞浸润,无吻合口瘘及手术死亡。68例获得随访,随访时间3—52个月,平均31个月,肝脏转移5例（6．58％）,其中2例分别于术后9个月及12个月行肝段切除术;盆腔复发3例（3．95％）,腹腔广泛转移2例（2．63％）,吻合口局部复发1例（1．32％）,术后14个月再次行Miles术。结论：双吻合技术为低位直肠癌患者提供更多的保肛机会,使用得当可有效预防吻合口瘘的发生。     

太原市部分居室甲醛污染状况调查

为了解太原市居室甲醛污染状况,笔者于2006年7-12月对太原市示范点两个社区的部分居室空气甲醛浓度进行了监测.     

内镜下3种组织胶注射治疗GEV1型胃底静脉曲张的疗效对比研究

目的:对比3种组织胶注射方法治疗食管胃底静脉曲张1型(GEV1)的疗效.方法:组A患者组织胶注射点位于胃底近贲门小弯侧;组B患者组织胶注射点位于胃底近贲门小弯侧和大弯侧;组C患者组织胶注射点位于胃底近贲门大弯侧.注射组织胶后,观察1～10 min,4周内复查胃镜.结果:3组患者组织胶注射后,曲张静脉均实变.复查时,曲张静脉完全阻塞率组A为100%,组B为100%,组C为61.9%.组A和组B治疗效果相当,高于组C(P<0.05).结论:在胃底近贲门小弯侧注射组织胶治疗GEV1更加完美.     

肝细胞癌合并周围型动-门静脉瘘介入治疗方案及效果

目的探讨肝细胞癌合并周围型动-门静脉瘘(artery-portal fistula,APF)介入治疗方案及效果。方法选取2009年8月至2016年9月于首都医科大学附属北京地坛医院诊治的肝细胞癌合并周围型动-门静脉瘘(artery-portal fistula,APF)患者82例为研究对象。所有患者均经肝动脉化学栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗,根据术中造影显示的分流量选择1~2种栓塞剂,常用的栓塞剂为碘化油、罂粟乙碘油、明胶海绵颗粒栓塞剂(1400~2000μm),均用洛铂稀释后化疗灌注,观察并比较患者治疗后的疗效。结果介入治疗前合并食管胃底静脉曲张者51例,中度至重度腹水者30例,门静脉癌栓者41例,治疗后11例患者腹水症状消失,17例患者腹水明显减少。65例(79.3%)患者APF瘘口术后完全消失,11例(13.4%)瘘口部分闭合,15例患者术后继续治疗中发现APF瘘口再次复发,11例患者出现新的APF。52例(63.4%)患者肿瘤明显缩小,19例(23.3%)肿瘤增大,11例(13.4%)肿瘤无明显变化。术前59例甲胎蛋白阳性患者介入治疗后41例甲胎蛋白水平下降。术后有4例患者出现上消化道出血。随访中61例病死患者的中位生存期为11.4个月。结论对于肝细胞癌合并周围型APF患者,应根据不同分流量选择合理的栓塞剂,可有效缓解患者临床症状并提高生活质量,最大程度降低术后并发症。     

基于NF-κB信号通路研究荔枝核有效部位群对糖调节受损大鼠炎症反应的影响北大核心CSCD

目的观察荔枝核有效部位群(SLEC)对糖调节受损(IGR)大鼠炎症因子表达的作用,探讨其与核因子-κB(NF-κB)信号通路关系。方法长期喂养不同配比高糖高脂饲料构建糖调节受损大鼠模型,检测其空腹血糖(FBG)水平及口服葡萄糖耐量试验(OGTT),观察糖调节受损模型成模周期、计算造模成功率,筛选并优化高糖高脂饮食配方。采用优化后高糖高脂饮食配方复制糖调节受损大鼠模型,设模型组、SLEC高剂量组(12 g·kg^(-1))、SLEC中剂量组(6 g·kg^(-1))、SLEC低剂量组(3 g·kg^(-1))、二甲双胍组(0.2 g·kg^(-1))和正常对照组,连续给药6周。ELISA法检测大鼠血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)含量,荧光定量PCR法检测大鼠胰腺组织TGF-β1、MCP-1、MIF m RNA表达,Western blot法检测大鼠胰腺组织NF-κB抑制蛋白(IκBα)和NF-κB p65表达。结果 3种不同配比高糖高脂饲料均能成功诱导糖调节受损大鼠模型,3者间不存在显著性差异(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠血清中TGF-β1、MCP-1和MIF含量均明显升高,胰腺组织TGF-β1、MCP-1和MIF m RNA表达水平均明显上调,胞浆蛋白IκBα表达降低,核蛋白NF-κB p65表达升高(P<0.01);与模型组比较,SLEC中、高剂量组与二甲双胍组血清中TGF-β1、MCP-1和MIF含量均明显降低,胰腺组织TGF-β1、MCP-1和MIF m RNA表达水平均显著下调,胞浆蛋白IκBα表达升高,核蛋白NF-κB p65表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 SLEC通过NF-κB信号通路下调糖调节受损大鼠中TGF-β1、MCP-1和MIF的表达,减轻大鼠炎症反应。     

叶下珠复方Ⅱ号对肝癌细胞增殖和胰岛素样生长因子-1受体信号通路转录的作用

目的:观察叶下珠复方Ⅱ号(CPUⅡ)对肝癌Huh7细胞增殖以及叶下珠复方Ⅱ号对胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号通路转录的影响,探讨叶下珠复方Ⅱ号抗肝癌作用机制。方法:采用小分子干扰RNA技术(siRNA)转染肝癌Huh7细胞,构建抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞(anti-IGF-1R Huh7),选择稳定表达的抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞,将肝癌Huh7细胞以及抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞分别分为4组:空白组,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组(3.0,1.5 g·L-1)以及5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.03 g·L-1),采用噻唑蓝(MTT)比色法测定药物对各组细胞增殖的影响,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)以及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IGF-1R以及其下游相关指标mRNA及蛋白表达。结果:与空白组比较,转染(SASI_Hs01_00126196及SASI_Hs01_00126196_AS)序列肝癌Huh7 IGF-1R mRNA及蛋白表达量最低,选择该细胞进行实验。MTT比色实验结果表明,与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号能够抑制Huh7细胞以及抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞增殖,并且siRNA抑制IGF-1R基因表达后,叶下珠复方Ⅱ号还能继续抑制Huh 7细胞增殖,且IGF-1R,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶3(Akt3)mRNA表达量进一步下降(P0.05)。结论:叶下珠复方Ⅱ号能够抑制Huh7细胞增殖,作用机制可能是抑制IGF-1R及其下游mRNA转录有关。