孕期高中链脂肪膳食对后代UCP3基因的影响

目的:探讨孕期膳食对子代肥胖和肥胖相关基因解偶联蛋白3(UCP3)表达的影响,寻找肥胖预防和治疗的靶标。方法:W istar孕鼠分别食用标准膳食和高中链脂肪膳食,所产雄性子鼠分别为对照组和高中链脂肪酸组(HMCFA),3周断乳后大鼠均食用标准膳食至成年,将对照组的大鼠随机分为两组:一组继续食用标准膳食;另一组为高脂对照组(HFCON),HFCON和HMCFA组的大鼠均高脂膳食诱导肥胖6周。分别在大鼠出生、断乳、成年、高脂诱导肥胖后各处死一批大鼠,取褐色脂肪检测UCP3 mRNA的表达。结果:与孕期标准膳食的子代相比,孕期高中链脂肪膳食可持续降低子代大鼠的体重和肥胖率(P<0.05),同时也可持续升高UCP3 mRNA的表达。结论:孕期高中链脂肪膳食可降低子代成年高脂诱导肥胖的发生;其机制为通过程序性升高子代UCP3基因的表达增加脂肪氧化和热能散失。     

五味子乙素B对人胃癌细胞MGC－803增殖和迁移能力的影响

目的：观察五味子乙素B（ Schisandrin B , Sch B）对人胃癌细胞MGC－803增殖、迁移能力及基质金属蛋白酶－9（matrix metalloproteinase 9, MMP－9）mRNA表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法：采用CCK－8法检测50、100、200、400和800μmol／L Sch B对胃癌细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞生长状态变化,并计数细胞分裂指数;细胞划痕实验检测200μmol／L Sch B对细胞迁移能力的影响;定量PCR检测细胞MMP－9 mRNA的表达。结果：CCK－8结果显示,Sch B对胃癌细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;胃癌细胞经不同浓度Sch B处理24、48、72 h,光镜下可见大量细胞皱缩,胞膜界限模糊,核质浓缩及凋亡小体形成,细胞分裂指数随Sch B剂量增加和作用时间延长而降低;200μmol／L Sch B作用24、48、72 h,细胞迁移率分别为（39．57±9．14）％,（56．57±10．04）％和（68．21±11．43）％,明显低于对照组（P＜0．05）;PCR结果显示,胃癌细胞中MMP－9 mRNA表达显著低于对照组。结论：Sch B对胃癌细胞的增殖抑制呈剂量和浓度依赖性,并降低胃癌细胞迁移能力,可能与下调MMP－9基因的表达有关。     

许旺细胞提取与纯化的新方法

背景：许旺细胞移植可改变损伤局部的微环境,有利于神经创伤的修复,获取大量高纯度、具有增殖活性的许旺细胞是研究的关键。 目的：探求一种简单且快速提取和纯化许旺细胞的方法。 方法：实验组大鼠在无菌条件下切断坐骨神经远端,使坐骨神经在体内预变性;对照组大鼠的坐骨神经不予任何处理。术后7 d切取两组坐骨神经,采用混合酶消化、组织块移植法提取许旺细胞;通过低酶消化、2次接种差速贴壁法分离纯化许旺细胞。相差显微镜下观察细胞形态,并行免疫荧光染色鉴定;计算细胞纯度;MTT法检测细胞增殖能力。 结果与结论：实验组培养第7天可见典型呈双极或三极的许旺细胞,细胞间建立连接;对照组细胞突起较短,与周围细胞较少关联。S-100免疫荧光染色后,细胞呈阳性绿色表达。实验组细胞增殖较快,第15天迅速形成漩涡状,成纤维细胞数量相对较少,细胞纯度达96.1%;对照组细胞在培养过程中增殖较缓慢,成纤维细胞数量多,细胞纯度较低。MTT法检测结果显示,原代培养时两组许旺细胞增殖能力均较弱;传代后与对照组比较,实验组许旺细胞增殖能力明显增强(P < 0.05或0.01),第三四代达峰值。结果证实体内预变性、体外混合酶消化、组织块移植结合低酶消化、双差速贴壁分离许旺细胞是一种简便、快速的提取纯化许旺细胞的方法。     

3～20周人胚和胎儿肾小体的组织发生

应用光、电镜对3～20周22例人胚和胎儿肾小体的组织发生进行了观察.受精后第25天胚肾已有肾小体发生.随着胚龄的增长,肾小体的发生数目增多,肾小体的形成方式是:胚肾内先形成许多厚壁小管,在一部分厚壁小管的诱导下,另一部分厚壁小管的一侧壁呈帽状增厚,分化形成造血干细胞、毛细血管内皮及肾小囊脏层,对侧壁形成肾小囊壁层.即厚壁小管的双侧壁形成肾小体.     

卵巢癌化疗的研究进展

卵巢癌的治疗方法主要是手术和化疗两种方法,其中化疗有非常重要的意义,有效的化疗可以防止早期卵巢癌的复发,提高治愈率,缓解晚期卵巢癌的症状,延长生存期,对提高手术治疗的效果也有无可替代的作用,现综述近年有关卵巢癌化疗方面的研究进展.     

成纤维细胞复合染料染色法

成纤维细胞是疏松结缔组织中常见的细胞,也是功能较重要的细胞.迄今为止,各种书籍、文献均介绍:在光镜下成纤维细胞轮廓不清,只能从核及胞质上辨别.给教学工作带来了极大的不便.为了改变这种状态,我们尝试用复合染料染成纤维细胞,得到了良好的效果.1 材料和方法(1)取材大白鼠肠系膜.(2)固定100%乙醇50ml,甲醇50ml配成的混合固定液,固定10分钟.(3)染色复合染料染色20分钟(复合染料配制:2%碱性品红,2%偶氮焰红,各50ml分别溶解后,两种溶液混合,滤过、沉淀,取沉淀物在烤箱中烤干,取沉淀物0.5克,加70%酒精100ml,再加三聚乙醛1ml为原液.取原液10ml加70%乙醇30ml,再加0.1     

许旺细胞提取与纯化的新方法

背景:幼年动物脂肪组织中前脂肪细胞的生物学行为与肥胖的发病和防治关系密切,而采用细胞生物力学实验方法直接观测力学振荡对前脂肪细胞生物力学行为变化可为推拿按摩治疗单纯性肥胖原理研究提供更直接的实验证据.目的:通过对体外培养的幼鼠前脂肪细胞实施不同频率的机械力刺激,观测细胞活力、增殖与细胞凋亡的变化.方法:体外培养SD幼鼠前脂肪细胞.对细胞进行鉴定后,通过细胞恒温培养振荡器对前脂肪细胞实施动态机械力学刺激.根据不同处理频率分别分为0(空白对照).1.5和3 Hz共3个组,每组振荡时间均为30 min,每12 h振荡1次,共处理3 d.观察细胞活力、增殖与凋亡率的变化.结果与结论:培养初期细胞形态似成纤维细胞,油红O染色后,细胞内出现红染颗粒,证明体外培养的幼鼠细胞经鉴定为前脂肪细胞.随实验振荡力的刺激,前脂肪细胞的活力和增殖有显著抑制(P<0.05或P<0.01),但力学振荡刺激对前脂肪细胞的凋亡与空白对照组比较差异无显著性意义(P>0.05).结果提示推拿防治青少年单纯性肥胖的细胞生物学机制可能主要是通过抑制前脂肪细胞的活力和增殖而作用的.     

组织胚胎学PBL教学体系的构建

针对组织胚胎学中PBL教学体系的构建,从师资培训、立体化教材的建立、问题设计、课堂实施以及考核标准等几方面进行了论述,指出构建中不仅要依其学科特点,而且要与传统教学方式相结合,才能既保证学生课程知识的系统性,又达到PBL教学目的。     

大鼠骨髓基质干细胞体外培养

目的：建立分离纯化、快速扩增大鼠骨髓基质干细胞（Bone mesenchymal stem cells,BMSCs）的方法。方法：用全骨髓接种贴壁法,培养分离纯化大鼠BMSCs,传代扩增、测定生长曲线和贴壁率,形态学观察、免疫细胞化学法鉴定细胞膜抗原。结果：全骨髓贴壁法能有效分离纯化大鼠BMSCs,细胞在10%胎牛血清BMSCs培养基中生长状态稳定,第2代细胞生长曲线呈S型、第2、4、6代贴壁率基本相同,贴壁速度无显著性差别,p〉0.05。CD29、CD44和CD90免疫组化鉴定细胞均呈阳性。结论：全骨髓接种贴壁培养法能有效分离纯化大鼠BMSCs,在含10%胎牛血清的BMSCs培养液中,细胞稳定扩增,可能与细胞培养微环境良好有关。     

五味子乙素联合氟尿嘧啶对人胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨五味子乙素(SchB)与5-氟尿嘧啶(5-FU)体外协同作用及对人胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测不同浓度SchB单用或与5-FU联用对细胞增殖的抑制作用;光学显微镜观察细胞生长状态变化并计数细胞分裂指数;电镜观察药物对细胞超微结构的影响;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:SchB单独应用对细胞增殖的抑制作用弱,与5-FU联用抑制作用显著,呈剂量依赖性;药物处理48h后,联合用药组细胞分裂指数为(1.1±0.28)%,与SchB组(13.7±0.43)%、5-FU组(5.1±0.52)%比较显著降低,P<0.05;电镜下可见细胞皱缩,胞膜界限模糊,核膜消失,核质浓缩及凋亡小体形成,以双药联用最为显著。TUNEL法分析示,联合用药组细胞凋亡率为(73.9±5.1)%,与SchB组(16.4±2.4)%、5-FU组(34.6±3.2)%比较差异有统计学意义,P<0.05。结论:SchB与5-FU联合应用能有效抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,二药具有协同增效作用。