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1.
目的:观察五味子乙素B( Schisandrin B , Sch B)对人胃癌细胞MGC-803增殖、迁移能力及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)mRNA表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:采用CCK-8法检测50、100、200、400和800μmol/L Sch B对胃癌细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞生长状态变化,并计数细胞分裂指数;细胞划痕实验检测200μmol/L Sch B对细胞迁移能力的影响;定量PCR检测细胞MMP-9 mRNA的表达。结果:CCK-8结果显示,Sch B对胃癌细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;胃癌细胞经不同浓度Sch B处理24、48、72 h,光镜下可见大量细胞皱缩,胞膜界限模糊,核质浓缩及凋亡小体形成,细胞分裂指数随Sch B剂量增加和作用时间延长而降低;200μmol/L Sch B作用24、48、72 h,细胞迁移率分别为(39.57±9.14)%,(56.57±10.04)%和(68.21±11.43)%,明显低于对照组(P<0.05);PCR结果显示,胃癌细胞中MMP-9 mRNA表达显著低于对照组。结论:Sch B对胃癌细胞的增殖抑制呈剂量和浓度依赖性,并降低胃癌细胞迁移能力,可能与下调MMP-9基因的表达有关。  相似文献   
2.
目的:探讨自体骨髓基质干细胞(MSCs)移植联合促红细胞生成素(EPO)对大鼠脊髓损伤(SCI)治疗的效果。方法:培养与纯化骨髓基质干细胞。80只SD大鼠制备脊髓损伤模型,随机分为4组:干细胞移植组、EPO组、联合组和对照组。采用BBB法进行运动能力评分和组织切片观察来评定修复情况。结果:三个实验组与对照组相比,差异具有统计学意义(P〈0.05),三个实验组均可明显促进大鼠运动功能和损伤后组织结构的恢复,其中联合组效果更显著。结论:骨髓基质干细胞移植联合EPO具有促进大鼠脊髓损伤后神经功能的修复。  相似文献   
3.
背景:骨形态发生蛋白2可能是参与胆碱能神经元前体细胞分化的细胞外调控因子。目的:观察骨形态发生蛋白2在孕14d胎鼠端脑神经干细胞诱导成胆碱能神经元过程中的作用。方法:取孕14d胎鼠端脑,用含EDTA的胰酶和Ⅰ型胶原酶消化,无血清培养基培养细胞,种植于涂有多聚赖氨酸的培养板,细胞原代培养24h后半量换液,加入10μg/L骨形态发生蛋白2继续培养。结果与结论:胶原酶消化得到的神经干细胞呈单层贴壁生长;Nestin免疫荧光鉴定细胞为阳性,获取的神经干细胞纯度大于99%;ChAT免疫荧光鉴定骨形态发生蛋白2可以将孕14d胎鼠端脑神经干细胞诱导成胆碱能神经元,细胞纯度大于97%。  相似文献   
4.
背景:许旺细胞是神经创伤修复的种子细胞,获取大量高纯度、高活性许旺细胞是研究的关键.目的:比较乳鼠和成年鼠许旺细胞的体外培养、纯化和形态学的差别,探讨简单可行的、可以获得高纯度许旺细胞的培养方法.方法:出生1~3 d SD大鼠20只和成年大鼠10只(体质量150~200 g),实验按细胞的来源分为新生组和成年组.双酶分步消化,二次接种差速分离纯化细胞;倒置显微镜观察细胞形态、贴壁速度;细胞计数,纯度计算;MTT法检测细胞增殖能力,绘制两组许旺细胞的增殖曲线,判定增殖速度;S-100免疫化学法鉴定细胞.结果与结论:乳鼠的许旺细胞贴壁速度快于成纤维细胞,成鼠的许旺细胞贴壁速度慢于成纤维细胞,两组许旺细胞纯度均达96%以上;MTT法检测两组许旺细胞增殖均活跃,由增殖曲线显示乳鼠许旺细胞增殖更快(P < 0.05);S-100免疫化学反应均呈阳性.提示双酶分步消化,二次接种差速分离纯化细胞,可以获取纯度高、活性良好的许旺细胞;乳鼠许旺细胞的增殖、贴壁能力更强.  相似文献   
5.
背景:许旺细胞移植可改变损伤局部的微环境,有利于神经创伤的修复,获取大量高纯度、具有增殖活性的许旺细胞是研究的关键。 目的:探求一种简单且快速提取和纯化许旺细胞的方法。 方法:实验组大鼠在无菌条件下切断坐骨神经远端,使坐骨神经在体内预变性;对照组大鼠的坐骨神经不予任何处理。术后7 d切取两组坐骨神经,采用混合酶消化、组织块移植法提取许旺细胞;通过低酶消化、2次接种差速贴壁法分离纯化许旺细胞。相差显微镜下观察细胞形态,并行免疫荧光染色鉴定;计算细胞纯度;MTT法检测细胞增殖能力。 结果与结论:实验组培养第7天可见典型呈双极或三极的许旺细胞,细胞间建立连接;对照组细胞突起较短,与周围细胞较少关联。S-100免疫荧光染色后,细胞呈阳性绿色表达。实验组细胞增殖较快,第15天迅速形成漩涡状,成纤维细胞数量相对较少,细胞纯度达96.1%;对照组细胞在培养过程中增殖较缓慢,成纤维细胞数量多,细胞纯度较低。MTT法检测结果显示,原代培养时两组许旺细胞增殖能力均较弱;传代后与对照组比较,实验组许旺细胞增殖能力明显增强(P < 0.05或0.01),第三四代达峰值。结果证实体内预变性、体外混合酶消化、组织块移植结合低酶消化、双差速贴壁分离许旺细胞是一种简便、快速的提取纯化许旺细胞的方法。  相似文献   
6.
背景:骨形态发生蛋白2可能是参与胆碱能神经元前体细胞分化的细胞外调控因子。目的:观察骨形态发生蛋白2在孕14d胎鼠端脑神经干细胞诱导成胆碱能神经元过程中的作用。方法:取孕14d胎鼠端脑,用含EDTA的胰酶和Ⅰ型胶原酶消化,无血清培养基培养细胞,种植于涂有多聚赖氨酸的培养板,细胞原代培养24h后半量换液,加入10μg/L骨形态发生蛋白2继续培养。结果与结论:胶原酶消化得到的神经干细胞呈单层贴壁生长;Nestin免疫荧光鉴定细胞为阳性,获取的神经干细胞纯度大于99%;ChAT免疫荧光鉴定骨形态发生蛋白2可以将孕14d胎鼠端脑神经干细胞诱导成胆碱能神经元,细胞纯度大于97%。  相似文献   
7.
许旺细胞提取与纯化的新方法   总被引:3,自引:1,他引:2  
背景:幼年动物脂肪组织中前脂肪细胞的生物学行为与肥胖的发病和防治关系密切,而采用细胞生物力学实验方法直接观测力学振荡对前脂肪细胞生物力学行为变化可为推拿按摩治疗单纯性肥胖原理研究提供更直接的实验证据.目的:通过对体外培养的幼鼠前脂肪细胞实施不同频率的机械力刺激,观测细胞活力、增殖与细胞凋亡的变化.方法:体外培养SD幼鼠前脂肪细胞.对细胞进行鉴定后,通过细胞恒温培养振荡器对前脂肪细胞实施动态机械力学刺激.根据不同处理频率分别分为0(空白对照).1.5和3 Hz共3个组,每组振荡时间均为30 min,每12 h振荡1次,共处理3 d.观察细胞活力、增殖与凋亡率的变化.结果与结论:培养初期细胞形态似成纤维细胞,油红O染色后,细胞内出现红染颗粒,证明体外培养的幼鼠细胞经鉴定为前脂肪细胞.随实验振荡力的刺激,前脂肪细胞的活力和增殖有显著抑制(P<0.05或P<0.01),但力学振荡刺激对前脂肪细胞的凋亡与空白对照组比较差异无显著性意义(P>0.05).结果提示推拿防治青少年单纯性肥胖的细胞生物学机制可能主要是通过抑制前脂肪细胞的活力和增殖而作用的.  相似文献   
8.
目的介绍利用胶原酶消化特点,简单而快速地实现神经干细胞原代单层化贴壁培养的方法。方法孕14d的SD大鼠无菌条件下取胎鼠端脑,剪碎后用含EDTA的Ⅰ型胶原酶消化,无血清培养基培养细胞,种植于涂有多聚赖氨酸的培养板;Nestin免疫荧光鉴定细胞性质;计算细胞纯度。结果细胞Nestin免疫荧光阳性;获取的神经干细胞纯度>99%。结论本方法可以简单而快速地获得原代单层化贴壁生长的神经干细胞。  相似文献   
9.
目的:观察五味子乙素诱导人胃癌细胞株MGC-803凋亡作用。方法:用10、50、100、200μmol/L浓度五味子乙素作用胃癌细胞株48 h,倒置显微镜下观察细胞增殖情况;MTT法检测五味子乙素对细胞增殖的抑制作用;凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果:倒置显微镜下,随着五味子乙素作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降;MTT法亦检测到上述结果;当五味子乙素作用浓度是100μmol/L时,可检测到明显的凋亡细胞。结论:高浓度的五味子乙素可诱导胃癌细胞株MGC-803细胞的凋亡,具有量效依赖关系。  相似文献   
10.
消化系恶性肿瘤患者血浆Hcy水平检测及临床分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)是一种含硫基的氨基酸,是蛋氨酸代谢的中间产物。近年来,随着Hcy检测技术的不断改进和发展,高Hcy血症与心、脑、血管尤其是冠心病、动脉粥样硬化等疾病的相关性被提出,而受到广泛的重视。已证明,Hcy是这类疾病的一个新的、重要的独立危险因素[1]。但Hcy在肿瘤发生中的作用研究较少,为此,本文测定消化系各类恶性肿瘤患者血浆Hcy水平,并同时检测叶酸(FA)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)含量,与正常对照组比较,以探讨其在消化系恶性肿瘤中的意义。1对象和方法1.1对象1.1.1恶性肿瘤组为本院明确诊断…  相似文献   
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