647株金黄色葡萄球菌儿童分离株的分布和耐药性分析

目的了解儿童金黄色葡萄球菌(金葡菌)分离株耐药情况,为临床治疗用药提供依据。方法采用微生物检验报告系统统计分析金葡菌分离株中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)比率,并分析MRSA和甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)对主要抗菌药物的耐药性差异。结果共分离到647株金葡菌,其中MRSA194株,占29.98%。MRSA和MSSA对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、奎奴普丁-达福普汀和呋喃妥因均100%敏感,对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑、阿米卡星、青霉素的耐药率差异无统计学意义;MRSA对大多β内酰胺类药物及其含酶抑制剂、红霉素、四环素、利福平、庆大霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率较MSSA高,差异有统计学意义。结论金葡菌儿童临床感染形势严峻,MRSA和MSSA对多种抗菌药物耐药率差异明显,儿童金葡菌相关性感染可根据病情及参考药敏结果选用敏感的抗菌药物治疗。     

谭氏引流管固定法在一例空肠造瘘术中的应用

正在普通外科的临床工作中,我们面对各种消化道瘘的引流管,常需要考虑如何固定避免其脱落。瘘口旁就近缝扎皮肤,使用丝线固定引流管,还是采用蝶形胶布缠绕引流管固定,或多种方法联合使用,可能大家都尝试过,总之对于消化道瘘的引流管固定是一件棘手的事情。笔者之前介绍了一种谭氏引流管固定法[1-2],不仅廉价,而且固定效果确切。近期空军军医大学第二附属医院普通外科对1例永     

金黄色葡萄球菌肠毒素B基因在大肠杆菌中的克隆及表达

目的扩增金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,并进行诱导、表达,为其应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEB的基因序列,设计一对分别含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增后,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切,并与做相应酶切的pET-28α(+)连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序,用IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot印迹鉴定表达产物。结果成功扩增出SEB基因,基因大小为801bp,重组PET-28α(+)-SEB双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEB在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99%。经IPTG诱导后,pET-28α(+)-SEB/BL21在相应的相对分子质量(35×103)可见融合蛋白以包涵体形式表达,免疫印迹在相应分子量检测到目的蛋白。结论克隆了SEB基因,并成功在大肠杆菌BL21中以包涵体形式表达,为肠毒素B应用研究奠定了基础。     

悬吊法肝切除在第二肝门旁肝肿瘤切除术中的应用

目的:探讨肝脏悬吊法进行第二肝门旁肝肿瘤肝切除的可行性与安全性.方法:回顾性分析201 1年8月-2012年8月收治的7例第二肝门旁肝肿瘤病患者的临床资料.结果:7例术中顺利放置悬吊胶管并成功手术.行右半肝切除2例,右半肝+右肾周脂肪囊切除1例,右半肝切除+左肝内外叶2个血管瘤分别切除1例,右半肝+Ⅳ段部分切除术1例,左半肝+右肝Ⅷ段+右膈肌浆膜切除1例,右肝Ⅵ,Ⅶ段规则切除术1例.术中无断肝时误伤下腔静脉者,行右膈肌浆膜修补1例.中位手术时间375 min(295～460 min),中位出血量2 000 mL (750～8 000 mL),中位输血量1 000 mL(0～4 000 mL).术后胸腔积液2例,均经穿刺抽液恢复.无胆瘘,无腹腔感染.均痊愈出院,平均术后住院时间20 d.术后随访1～12个月,1例肝细胞癌有局部复发.结论:应用悬吊法进行第二肝门旁肝肿瘤肝切除是安全可行的.     

肠道病毒71型VP1基因的扩增、克隆、表达及蛋白分析

目的 对肠道病毒71型VP1基因片段进行扩增、克隆、生物信息学分析、原核表达、纯化,初步证实重组表达产物的生物学活性。方法 根据GenBank中EV71序列设计一对特异性引物,以EV71患者咽拭子标本中提取病毒核糖核酸为模板,RT-PCR扩增EV71 VP1基因,酶切后插入表达载体pET28a。构建pET28a-EV71 VP1原核表达载体。转化E.coli DH5α,IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE及Western blot分析表达结果,利用软件对测序结果进行生物信息学分析。纯化蛋白并包被反应板,用ELISA分别检测EV71阳性与COX A16阳性患者VP-1IgG抗体,进行统计学分析。结果 目的基因经BLAST比对,同源性与GenBank登录号为JQ766207.1 EV71 VP1一致性达99%。EV71 VP1蛋白相对分子质量约为32×103,主要以包涵体形式存在。生物信息学分析得出,EV71 VP1蛋白为亲水性蛋白,无跨膜区,不具有N-端信号肽序列,存在三级结构。ELISA结果显示EV71阳性患者OD值为(2.425±0.521),COX A16阳性患者OD值为(1.205±0.314),健康对照组OD值为(0.353±0.128)。EV71 VP1蛋白检测敏感性和特异性分别为84%和88%。结论 成功构建了pET28a-EV71 VP1表达载体;通过对手足口患者血清进行ELISA初步分析,得出目的蛋白有较高的敏感性和特异性,初步证实具有生物学活性,可进一步用于EV71诊断及疫苗的相关研究。     

基于病证结合特点的绝经后骨质疏松症动物模型分析

绝经后骨质疏松症（PMOP）病证结合动物模型在中医药研究中应用较多,但建立方法各式各样且缺乏统一的评价标准。文章从中医学和现代医学临床角度出发,就目前PMOP模型动物选择、构建方法和模型动物与临床吻合度进行对比,结合病证结合动物模型构建思路,从PMOP病证结合动物模型的构建和进一步完善评价方法进行归纳总结,以期为PMOP实验研究提供新思路。     

高血压脑出血治疗过程中发生脑静脉窦血栓形成一例

高血压脑出血(HICH)治疗过程中发生脑静脉窦血栓形成(CVST)较为罕见.作者回顾性分析和总结了1例HICH治疗过程中出现CVST病例,提示临床医师HICH治疗过程中患者不明原因的意识障碍加重,需警惕CVST.HICH治疗过程中,甘露醇和止血药物使用不当可能是发生CVST的病因,抗凝治疗可作为有效治疗方案.     

针刀干预对膝骨关节炎兔股四头肌肌腱拉伸力学的影响

目的:观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔行为学、形态学及拉伸力学的影响,探讨针刀治疗KOA的生物力学效应。方法:24只新西兰雄兔随机分为4组:正常组、模型组、电针组、针刀组,每组各6只。模型组以改良Videman左后肢伸直位固定制动固定6周建立兔KOA模型。电针组电针左侧梁丘、血海、内膝眼、外膝眼,每周3次,治疗3周。针刀组以针刀松解左侧股四头肌肌腱,每周1次,治疗3周。分别于造模措施解除1周后和治疗结束1周后应用Lequesne MG膝关节评估法进行行为学检测,治疗结束1周后进行HE染色和力学测试。结果:行为学治疗前观察显示:在局部疼痛、步态反应、关节活动和关节肿胀方面,正常组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),而模型组、电针组和针刀组之间差异无统计学意义(P0.05)。治疗后结果显示:与正常组相比,模型组、电针组和针刀组在局部疼痛、步态反应、关节活动和关节肿胀上差异均有统计学意义(P0.05);在局部疼痛上,电针组较模型组降低,差异无统计学意义(P0.05),针刀组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),电针组和针刀组之间比较差异无统计学意义(P0.05);在步态改变上,模型组与电针组比较差异有统计学意义(P0.05);针刀组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);在关节活动度方面,电针组、针刀组与模型组相比,差异均有统计学意义(P0.05);在关节肿胀上,电针组和针刀组分别与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01),而电针组和针刀组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。力学方面:与空白组相比,模型组的极限载荷显著降低(P0.01),电针组极限载荷有下降趋势(P0.05),针刀组极限载荷有上升趋势(P0.05);与模型组比较,电针组极限载荷升高(P0.05),针刀组极限载荷显著升高(P0.01);与电针组相比,针刀组极限载荷有上升趋势(P0.05)。与空白组比较,模型组的最大位移显著降低(P0.01),电针组和针刀组最大位移均有下降趋势(P0.05),与模型组比较,电针组最大位移有升高趋势(P0.05),针刀组最大位移显著升高(P0.05),与电针组相比,针刀组最大位移有上升趋势(P0.05)。在刚度方面各组数据间均无统计学意义(P0.05)。结论:针刀干预可使行为学及形态学发生明显改变,可显著改善股四头肌肌腱拉伸力学特性,并发挥其生物力学效应从而达到治疗KOA的目的。     

食管空肠overlap与π形吻合术后短期疗效及患者生活质量的对比研究

目的:对比全腹腔镜全胃切除术后食管空肠overlap吻合与π形吻合术的短期疗效及患者生活质量。方法:回顾性收集2012年1月—2017年8月期间符合要求的104例接受全腹腔镜全胃切除的胃腺癌患者临床资料,其中59例行食管空肠overlap吻合(overlap吻合组),45例行π形吻合(π形吻合组),比较两组患者的临床数据及其术前与术后1年的生活质量调查问卷资料。结果:两组患者术前资料具有可比性。π形吻合组平均吻合时间明显短于overlap吻合组(28.9 min vs.41.5 min,P0.05),但两组平均手术时间无明显差异(287.6 min vs. 315.6min,P0.05)。两组在术中失血量、切口长度、术后短期疗效及术后1年营养状况、生活质量方面均无统计学差异(均P0.05)。结论:全腹腔镜全胃切除术食管空肠overlap吻合与π形吻合均安全可行。吻合方式的不同并没有对术后短期疗效及患者生活质量产生明显影响。在临床工作中,可根据患者具体身体状况及肿瘤的生长部位等因素对两种吻合方法的应用进行选择。