基于谱效相关的何首乌抗血小板聚集药效物质研究

应用体外抗血小板聚集生物活性检测方法,并结合化学指纹图谱进行谱效相关分析,探索何首乌抗血小板聚集的活性物质。采用体外抗血小板聚集法进行检测,何首乌50%乙醇提取物的抗血小板聚集作用强于10%或90%的乙醇提取物,超声提取优于回流提取。对正交试验的不同提取物进行抗血小板聚集活性评价,抑制率在32.03%~74.56%。谱效相关分析结果表明,反式二苯乙烯苷、顺式二苯乙烯苷、儿茶素与抗血小板聚集活性的相关系数较高且具有统计学意义,分别为0.963(P0.01),0.902(P0.01)和0.656(P0.05);进一步对上述3种与活性相关系数较高化合物的单体进行活性验证,均有较好的抗血小板聚集活性;最后根据3种单体化合物在何首乌中的含量差异计算相对活性贡献度可知,反式二苯乙烯苷是何首乌体外抗血小板聚集的主要活性物质。     

脂肪乳对PT、APTT和Fib凝血结果的影响与对策

目的探讨减少脂肪乳对凝血酶原(PT)、部分凝活酶时间(APTT)和纤维蛋白原(Fib)干扰的方法。方法制备正常新鲜混合血浆并检测PT、APTT、Fib;在正常新鲜混合血浆中加入不同浓度的脂肪乳并检测其PT、APTT和Fib,取均值计算干扰物影响度,同时在强生干化学分析仪VITRO FS5.1上检测血浆指数,并分析血浆指数与脂肪乳干扰之间的关系。通过CS2000i自带的稀释功能,寻找最佳的稀释倍数,减少脂肪乳对Fib的干扰。结果当添加干扰物脂肪乳4.76%体积分数时,对PT、APTT和国际标准化比值(INR)影响均7.5%,未超过1/2 CLIA’88规定的允许误差;脂肪乳添加的体积与血浆指数存在良好的线性相关:y=18.284x+4.557 9,R2=0.993 3;脂肪乳添加的体积与衍算纤维蛋白原(PT-der fibrinogen,PT-DFbg)添加前后的差值也存在良好的线性相关:y=0.146 9x-0.891 4(x≥6),R2=0.961 7;标本稀释可以很好地消除脂肪乳对Fib检测结果的干扰。结论利用血浆指数,可以减少一定浓度内脂肪乳对PT、APTT和Fib的干扰,标本稀释可以很好地消除脂肪乳对Fib检测结果的干扰。     

hVEGF165在兔骨髓间充质干细胞中的表达

目的培养和鉴定兔骨髓间充质于细胞，基因转染后观察hVEGF165在其中的表达。方法体外培养兔骨髓间充质干细胞，以流式细胞仪检测其表面抗原（CD29、CD44、CD45、HLA—DR）的表达。通过腺病毒载体转染hVEGF165后，采用RT—PCR、Western blot法检测hVEGF165在细胞中的表达。结果通过流式细胞仪检测表明培养的细胞为兔骨髓间充质干细胞，RT—PCR法、Western blot法检测结果均表明hVEGF165基因转染兔骨髓间充质干细胞后能在其中表达。结论成功培养兔体外骨髓间充质干细胞，基因转染后细胞能有效表达hVEGF165。     

Sysmex CS2000i全自动凝血分析仪性能评价

目的对Sysmex CS2000i全自动凝血分析仪(以下简称"CS2000i仪")的性能进行系统评价。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)相关标准对CS2000i仪进行精密度、准确度、线性、生物参考区间、携带污染率评价,同时用CS2000i仪与Sysmex CA1500全自动凝血分析仪检测5份临床标本,并进行比较。结果 CS2000i仪检测凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、D-二聚体等主要参数的批内、日间不精密度变异系数、携带污染、准确度、线性等均符合该室质量目标。结论 CS2000i仪各方面性能良好,检测结果可用于临床诊治相关疾病。     

干化学和湿化学方法测定尿蛋白结果的比较

目的探讨干化学与湿化学不同方法测定尿蛋白（UPRO）的差异。方法选用强生干化学仪器的干化学法和日立7170A仪器连苯三酚红显色湿化学法测定尿蛋白,同时检测53份标本,进行相关性比较,结果采用t检验、相对偏差、回归分析．进行统计分析。结果湿化学结果与干化学结果相比明显偏低：低值、中值和高值分别偏低22．8％、39．7％和26．2％。t值分别为3．452、6．352、6．956,P〈0．01,差别有极显著意义。其回归曲线：y=0．7936x-64．224,对b（总体斜率）与a（总体截距）的检验,tb=5．397、8．502、5．741、5．520,ta=2．502、1．944、1．259、0．818;两种方法学测定UPRO结果的系统误差属临床不可接受水平。结论两种方法的测试结果有显著性差异,有条件的实验室应使用千化学方法定量检测尿蛋白。     

高效液相色谱法测定广西产美味猕猴桃根中熊果酸的含量

目的测定广西产美味猕猴桃根中熊果酸的含量。方法以熊果酸含量为考查指标,采用正交实验优选提取工艺。采用高效液相色谱法,色谱柱为Thermo Hypersil BDS C18色谱柱（5μm,4.6 mm×250 mm）;柱温20℃;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（85∶15）;流速1.0 ml/min;检测波长210 nm。结果熊果酸的浓度在0.012 5～0.150 0 mg/ml时与峰面积呈良好的线性关系,样品的平均回收率为99.35%,RSD为1.52%（n=6）。结论该方法准确可靠,重复性好,适用于美味猕猴桃根药材的质量控制。     

静脉动脉化再植完全性离断拇指12例体会

我院自2004年3月至2007年3月,采用静脉动脉化再植完全性离断拇指12例,取得良好临床效果. 临床资料     

尿激酶型纤溶酶原激活因子cDNA的克隆与原核表达

目的构建尿激酶型纤溶酶原激活因子（uPA）原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21中表达,为进一步研究uPA奠定基础。方法应用逆转录RT—PCR,从人肝细胞cDNA中扩增人尿激酶型纤溶酶原激活因子基因序列,与原核表达质粒pET32a重组,获得表达质粒uPA—pET32a。用氨苄青霉素平板筛选转化子。双酶切与DNA测序进行鉴定,用IPTG诱导表达,并用Westernblotting进行鉴定。结果从肝细胞cDNA中扩增的uPA基因片段长1296bp,酶切及DNA测序证实uPA-pET32a重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为68900Mr,经Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒uPA—pET32a。并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期的相一致．为进一步的研究奠定了基础。     

健脾化痰法治疗糖尿病胃轻瘫思路探讨

从健脾化痰探讨糖尿病胃轻瘫的治疗思路。认为糖尿病胃轻瘫是糖尿病患者在患病后出现的脾胃功能失调的病证,其基本病机为消渴病日久阴损气耗,脾胃升降失和;以脾气虚弱、运化无力为本,气滞、湿阻、痰浊、食积等引起胃失和降为标,为虚实夹杂之证。在治疗上应衷中参西,病证并治,在西药控制血糖的基础上配合中药治疗,以健脾化痰为法,平调寒热,调畅气机。