破骨细胞分化过程中的信号通路及信号因子的研究进展

破骨细胞（osteoclast,OC）来源于骨髓,在生长发育过程中,起着骨吸收的重要功能,其增多或减少会引起骨质疏松或骨质硬化等相关的骨代谢性疾病。本文将从OC分化过程中所涉及的信号通路（NF-κB、Src-PI3K-Akt、MAPK、CN/NFAT、IDO/Tryptophan通路等）及相关信号因子（PU 1、 Lhx2、TNF-α、 M-CSF、TGF-β等）方面,对OC分化的信号通路及相关信号因子的研究进展进行简要综述,以期能为相关骨代谢性疾病的治疗提供新的思路。     

锦州市2011年-2013年餐具消毒质量监测结果分析

目的：分析锦州市2011年-2013年餐具消毒质量监测结果,探讨其影响因素,为进一步制定科学有效的管理措施提供依据.方法：采用大肠菌群纸片法,按国家规定的检测方法进行检测.结果：总体合格率为83%,2011年、2012年合格率均低于80%,2013年为97%,合格率差异具有统计学意义（χ^2 =61.6,P〈0.05）. 不同季节中,第三季度合格率最低,平均合格率为76%.被检单位类型中,餐具消毒服务机构提供的集中式餐具合格率稍低于酒店和学校食堂,三种类型的被检单位合格率差异具有统计学意义（χ^2 =6.535,P〈0.05）.结论：分析结果表明,2013年锦州市餐具消毒合格率已较前两年有大幅度提高.餐具消毒的合格率与相关部门的监督管理力度、餐饮人员的卫生服务意识与重视程度、季节及餐饮单位类型均有密切关系.     

妇产科阴道分娩产后出血相关因素分析及应对措施

目的：分析妇产科阴道分娩产后的出血因素并且探讨其应对措施,为今后的临床研究与治疗提供参考。方法随机选取我院妇产科中的产妇100例,按是否正常分娩,随机分为两组,并详细记录出血产妇的观察组与正常阴道分娩的对照组的临床情况,并分析原因。结果两组产妇在三个产程的时间均无显著性区别(P>0.05),观察组的产妇出血量、分娩前后的血红蛋白指标差值、胎儿体重均明显高于对照组,(P<0.05),两组有显著性差异。且在产后出血相关因素的研究中,以子宫收缩乏力为主要因素,占总出血的58%。结论由本次研究可知,产妇阴道分娩产后出血的主要原因主要包括子宫收缩乏力、胎儿过大而造成产道出现裂伤、胎盘未及时处理等方面以及产妇自身的凝血功能障碍,故实际临床中须对产前、产中和产后2h内给与高度的重视和有效地处理。     

饮水型氟中毒动物模型建立及硬组织形态学改变的研究

目的建立慢性饮水型氟中毒动物模型并观察其硬组织形态学改变。方法 48只Wistar大鼠随机分成4组,建立氟中毒动物模型。染氟组分别饮用含氟化钠浓度为50、100、150 mg/L的自来水,对照组饮用常规自来水。8周后取大鼠切牙及股骨,通过组织HE染色方法观察各组大鼠切牙成釉细胞和大鼠骨组织形态学改变,采用氟离子选择电极测定各组大鼠血氟、牙氟及骨氟浓度。结果实验组大鼠切牙出现不同的氟牙症表现。各染氟组大鼠血氟(F=11.234,P<0.05),牙氟(F=275.148,P<0.05),骨氟(F=217.337,P<0.05)含量显著高于对照组,且随浓度增加而增加,各组间均具有显著差异。HE染色发现实验组大鼠切牙成釉细胞排列不规则呈多层,高柱状细胞结构变矮或消失,少量细胞发生扭曲,且随氟浓度增加以上病理学改变加重。大鼠股骨HE染色发现实验组骨组织出现骨小梁增多,排列致密等骨硬化性表现,骨骺板增厚,增殖层软骨细胞排列紊乱,随浓度的增加以上病理学改变加重。结论长时间饮用高浓度含氟水可引起慢性氟中毒,硬组织出现氟斑牙和氟骨症的病理学改变。     

呼吸机相关性肺炎影响因素分析及护理对策

目的:探讨呼吸机相关性肺炎(VAP)的病原学特点和影响因素,并提出有效的护理对策。方法:将256例行有创机械通气患者根据VAP诊断标准分为VAP组和非VAP组,再将VAP组分成早发性VAP组和迟发性VAP组。分析VAP发生的影响因素、VAP病原菌分布情况、耐药性及VAP治疗方法并提出对策。结果:VAP发病率为38.67%,病死率为41.41%;造成VAP发生的独立危险因素主要包括患者年龄、性别、上机时间和H2受体阻断剂应用情况。早发性VAP病原菌以G+为主,而迟发性VAP病原菌以G-为主,在两类VAP病原菌中,真菌占有一定比例,且病原菌有明显的耐药性。结论:VAP作为重要的院内感染,影响其发生的危险因素较多,在临床护理过程中应针对这些危险因素展开相应的干预措施,可有效降低VAP发病率和病死率,从而提高临床治疗效果。     

氟对小鼠成骨细胞增殖与分化及骨保护蛋白和核因子κβ受体活化因子配体mRNA 表达的影响

目的 观察氟对体外培养的小鼠成骨细胞增殖、分化、骨保护蛋白(OPG)mRNA及核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达的影响.方法 取出生1～2 d昆明小鼠颅盖骨,分离成骨细胞后进行传代培养.按培养液中加入不同浓度氟化钠(NaF)将成骨细胞分为0(对照)、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3 mol/L组,分别在培养72 h或120 h后检测氟对成骨细胞增殖、分化(碱性磷酸酶,ALP)的影响;提取成骨细胞总mRNA,采用RT-PCR方法分析成骨细胞OPG mRNA、RANKL mRNA表达,并进行半定量分析.组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 培养72 h后,成骨细胞增殖组间比较差异有统计学意义(F=13.806,P<0.05);与对照组(0.434±0.010)比较,10-7～10-4mol/L组成骨细胞增殖明显增加(0.448±0.010、0.453±0.013、0.454±0.016、0.449±0.018,P均<0.05),10-3 mol/L组成骨细胞增殖降低(0.401±0.009,P<0.05).成骨细胞ALP活性组问比较差异有统计学意义(F=9.021,P<0.05);其中10-7～10-5 mol/L组[(2.447±0.756)×106、(2.603±0.183)×106、(2.687±0.886)×106 U/L]ALP活性明显高于对照组[(1.677±0.682)×106U/L,P<0.05或<0.01];10-4mol/L组[(1.479±0.366)×106 U/L]ALP活性明显低于对照组(P<0.05).OPG mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=11.299,P<0.05);与对照组(11000±0.000)比较,10-7～10-4 mol/L组表达增强(1.058±0.027、1.053 ±0.026、1.088±0.055、1.069±0.008,P<0.05或<0.01),10-3mol/L组表达降低(0.941±0.029,P<0.05).成骨细胞RANKL mRNA表达组间比较差异无统计学意义(F=1.311,P>0.05).RANKL mRNA/OPG mRNA比值,在104～10-5mol/L组逐渐降低,10-4、10-3mol/L组升高,但组间比较差异无统计学意义(F=1.376,P>0.05).结论 氟对小鼠成骨细胞增殖、分化呈双向调节作用,表现为低剂量刺激而高剂量抑制.低剂量染氟可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,抑制骨吸收;而高剂量可能通过降低OPG的表达来促进破骨细胞的分化、成熟,促进骨吸收.

Abstract：

Objective To investigate the effect of sodium fluoride(NaF) on proliferation, differentiation and the mRNA expression of osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor κβ ligand (RAN KL) of mouse osteoblasts. Methods Osteoblasts were isolated from calvarias of Kunming mice born in 1 - 2 d and cultured. Various concentrations of NaF(0, 10-8, 10-7, 10-6, 10-5, 10-4, 10-3mol/L) were added to the culture medium, the proliferation and activity of alkaline phosphatase(ALP) was determined after 72 h or 120 h. The expression of OPG mRNA and RANKL mRNA was analyzed by semi-quantification RT-PCR. Difference among groups was analyzed by One-Way AN0VA. Difference between two groups was analyzed by LSD-t test. Results There was significant difference in cell proliferation among groups after 72 h(F = 13.806, P < 0.05). Compared with control group(0.434 ± 0.010) , the proliferation was significantly induced in 10-7 - 10-4 mol/L groups treated osteoblasts (0.448 ± 0.010, 0.453 ± 0.013, 0.454 ± 0.016, 0.449 ± 0.018, all P< 0.05), and was significantly suppressed in 10-3 mol/L group(0.401 ± 0.009, P < 0.05). There was statistic difference in the activity of ALP among groups(F = 9.021, P < 0.05). Compared with control group (1.677 ± 0.682), the activity of ALP significantly increased in 10-7 - 10-5 mol/L groups[ (2.447 ± 0.756) × 106, (2603 ± 0.183) × 106, (2.687 ± 0.886) × 106 U/L, P < 0.05 or P < 0.01 ] and significantly decreased in 10-4 mol/L group[ (1.479 ± 0.366) × 106 U/L, P < 0.05 ]. There was significant difference in the expression of OPG mRNA among groups(F = 11.299, P< 0.05). Compared with control group (1.000 ± 0.000), the expression of OPG mRNA was significantly increased in 10-7 - 10-4 mol/L groups( 1.058 ± 0.027, 1.053 ± 0.026, 1.088 ± 0.055, 1.069 ± 0.008, P < 0.05 or P < 0.01) , while significantly decreased in 10-3 mol/L group (0.941 ± 0.029, P< 0.05). There was no difference in RANKL mRNA expression among groups (F= 1.311, P> 0.05). The ratio of RANKL/OPG decreased with increasing doses of fluoride and increased in 10-4, 10-3 mol/L groups, but there was no difference between groups(F = 1.376, P> 0.05). Conclusions A biphasic pattern of proliferation and differentiation has been induced in mouse osteoblasts, which manifests stimulation effect in low doses and suppression in higher doses. Low doses of sodium fluoride suppress differentiation and maturation of osteoblasts by increasing expression of OPG mRNA, while high doses of sodium fluoride enhance differentiation and maturation of osteoblasts by decreasing expression of OPG mRNA.     

氟中毒大鼠肝脏超微结构观察

目的 研究氟对大鼠肝脏超微结构的影响。方法 在饮水中加入不同剂量的氟化钠（0、50、100和150mg／L）喂词大鼠3个月后，透射电镜下观察肝脏超微结构的改变。结果 染氟各组大鼠肝组织超微结构发生改变，表现为肝细胞线粒体肿胀，嵴断裂或消失；内质网呈片层状；染色质边集于核膜下；胞质内多见白色脂滴。结论 氟损伤亚细胞膜性结构和DNA，造成肝脏损伤。     

野生型及突变型人白细胞介素13的原核表达及活性分析

目的:在大肠杆菌中表达野生型和突变型重组人IL13,经纯化复性获得具有有活性的蛋白。方法:用PCR扩增IL13基因片段,用定点突变PCR获得其突变体(IL13’)基因。将IL13和IL13’基因分别克隆至原核表达载体pET30a( )中,构建重组体pET30a( )IL13和pET30a( )IL13’,分别命名为pETIL13和pETIL13’。以重组体转化E.coliBL21(DE3)在IPTG诱导下进行表达。表达产物用NiNTA层析柱进行纯化。纯化产物用氧化还原谷胱甘肽系统透析复性后,检测其生物学活性。结果:在E.coliBL21(DE3)中表达了IL13/IL13’His6融合蛋白。经SDSPAGE显示,融合蛋白的Mr约17000,经Westernblot证实为人IL13。表达的融合蛋白以包涵体的形式存在,纯化后得到较高纯度的重组蛋白。复性后的包涵体检测具有生物学活性。结论:成功地获得具有生物学活性的野生型和突变型人IL13重组蛋白,为下一步研究奠定了基础。     

青春期学生血压变化规律分析

目的了解青春期学生血压变化规律,为儿童青少年血压标准的制定与评价提供依据。方法采用中山市2005-2010年学生体检资料,经匹配个人信息后形成2 690人的队列数据,描述调整身高增速高峰年龄前、后儿童血压水平和血压增长速率变化情况。结果进入青春期后,男、女生血压增速明显增加,增加起始于身高增速高峰年龄前1～2 a,身高增速高峰年龄时增速达到最高峰,从血压增长加速到回落需3～4 a;女生血压增长加速较男生早2～3 a,男生血压增速幅度高于女生,增速回落较女生缓慢。使用调整身高增速高峰年龄的方法分析青春期血压的变化规律,优于直接分析各年龄血压水平。结论青春期学生血压增长速率明显增加,男、女生情况有所不同。