人源性抗HBsAg单链抗体在大肠埃希菌中分泌表达条件的研究

目的 研究抗HBsAS单链抗体A-15在大肠埃希菌中的高效表达,增加该抗体在培养基中的产量.方法 改变工程菌的诱导时机、诱导剂浓度和诱导时间,以观察这些因素对单链抗体表达的影响.另外,加入不同浓度的蔗糖、甘氨酸和Triton X-100,以考察三种化学物质对单链抗体在培养基中分泌量的影响.结果 工程菌培养4 h后,加终浓度0.5 mmol/L IPTG诱导表达8 h为抗HBsAS单链抗体A-15较佳的表达条件.终浓度0.3 mol/L蔗糖,2%甘氨酸和1%Triton X-100同时加入诱导时的培养基中,可使培养基中表达的单链抗体亲和活性分别增加16.78倍.经测定抗HBsAg单链抗体A-15在培养基中最终表达量为7.4 mg/L.结论 抗HBsAg单链抗体A-15的分泌表达条件得到优化,表达量明显提高,这为更有效地制备该抗体用于其结构和功能研究提供了一个切实可行的方法.     

肌氨酰胺亚硝脲药效及药代动力学研究进展

肌氨酰胺亚硝脲(SarCNU)为亚硝脲类抗癌药,同已在临床使用的亚硝脲类药物相比,该药物具有较高的抗癌活性,同时毒性较低。本文结合国内外相关文献从药效学、药代动力学两个方面对该药物的研究进展进行综述,为SarCNU临床应用和进一步研发提供参考。     

眼眶炎性假瘤中IL-1β和IL-6表达的研究

目的探讨炎性因子与眼眶特发性炎性假瘤（IOIP）的关系。方法利用目前最先进的基因芯片和蛋白液相芯片检测IOIP样本和正常样本中IL-1β基因水平和IL-1β、IL-6蛋白水平。结果与正常对照组相比,IOIP组IL-1β基因和蛋白水平均明显升高;两组间IL-6蛋白水平无统计学差异。结论炎症因子IL-1β与IOIP发病相关。     

INPP5E 基因影响小鼠胚胎神经管闭合的 分子机制研究

目的 探讨肌醇多聚磷酸5- 磷酸酶（INPP5E）基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制。 方法 采用前期复制的神经管缺陷（NTD）小鼠模型,在体视显微镜下观察胚胎表型、苏木精- 伊红染色情况, 测量胚胎顶臀长、体重等指标;重亚硫酸盐测序法检测NTD 组及对照组胚胎发育第11.5 天小鼠胚胎神经组 织中INPP5E 基因启动子区DNA 甲基化情况;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting 检测胚胎神经组 织中INPP5E 蛋白和mRNA 相对表达量;超高效液相色谱串联质谱法检测胚胎神经组织中叶酸（FA）、5- 甲 基四氢叶酸（5-MeTHF）、5- 甲酰四氢叶酸（5-FoTHF）及同型半胱氨酸（Hcy）水平。结果 NTD 组小 鼠胚胎神经组织INPP5E 基因启动子区甲基化水平、INPP5E 蛋白和mRNA 相对表达量在胚胎发育第11.5 天 时较对照组低（P <0.05）。NTD 组胚胎神经组织的FA 和Hcy 水平较对照组升高（P <0.05）,而5-MeTHF 和5-FoTHF 水平较对照组低（P <0.05）。结论 INPP5E 基因在调节小鼠胚胎神经管闭合中起重要作用。FA 代谢紊乱引起的INPP5E 基因启动子区甲基化水平降低,可能通过影响其表达水平参与NTD 的发生。     

生物医学工程专业量子生物学课程建设的探索

量子生物学是一门新兴的交叉学科,其课程教学是培养生物、医药等领域创新型人才的重要内容。我国部分高校已经开设了生物医学工程等相关专业的研究生量子生物学课程,但目前尚处于起步阶段,其课程体系有待完善和发展。因此,精选教学内容、改进教学方法和探索考核方式对于提高教学质量具有重要意义,是加快量子生物学课程建设的重要途径。     

生物医学工程专业《仪器分析》双语教学探索与实践

仪器分析作为生物医学工程专业的专业基础课之一,其双语教学对于提高教学质量具有重要意义。结合仪器分析课程双语教学的实践经验,阐述了双语教学的重要意义,并在教材的选择、课堂的组织和目前存在的问题等方面进行了探讨,为仪器分析课程双语教学改革提供参考。     

BALB/c 3T3细胞转化实验的优化及其在致癌物协同作用研究中的应用

目的 优化BALB/c 3T3细胞转化实验,并应用于致癌物间协同致癌作用的研究.方法 从血清浓度、培养基类型和致癌物作用时间三个因素对BALB/c 3T3细胞转化实验进行优化.采用优化的实验方案,选择致癌物作用7 d后重新接种,再以含5%胎牛血清的DMEM/F12(1:1)培养基培养进行细胞转化实验,对致癌物间的协同作用进行检测,通过小鼠体内致瘤实验对转化灶细胞的恶性特征进行验证.结果 二乙基亚硝胺(DEN)与2、3、7、8-四氯二苯并二恶英间有较强的协同致癌作用.微囊藻毒素单独具有较强促细胞恶性转化能力,但这种促转化能力却受到DEN的抑制.实验诱发的转化灶具有Ⅱ型转化灶的特征,并可在体液与细胞免疫缺陷(SCID)小,鼠体内致瘤.结论 经优化的BALB/c 3T3细胞转化方案既充分模拟了致癌物联合作用的方式,又缩短了实验周期,可有效应用于致癌物间协同作用的研究.     

293细胞检测致癌物的应用研究

目的 探讨应用293细胞对致癌物进行细胞转化及致瘤性等研究,为检测可疑致癌物提供实验依据.方法 应用微囊藻毒素LR(Microcystin LR,MC-La)对293细胞进行转化培养,取转化后的细胞进行软琼脂克隆实验、血清依赖性实验以及免疫缺陷小鼠体内致瘤实验来验证MC-LR转化的293细胞的致癌性.结果 293细胞在MC-LR的作用下,逐渐表现出转化细胞的特性:血清依赖程度显著降低,在软琼脂培养基中锚着独立生长并形成细胞集落,在SCID小鼠体内形成浸润性肿瘤组织.结论 293细胞易于培养并对环境致癌物敏感,可用于可疑致癌物的检测.     

亚硝基脲抗癌机理的研究进展

亚硝基脲作为一种重要的双官能团抗癌烷化剂,目前广泛的应用于多种恶性肿瘤的临床治疗.研究表明,亚硝基脲分解生成活泼素电子中间体而与DNA形成加合物,诱导互补碱基对横向交联、链的断裂等损伤,最终导致癌细胞凋亡.由于亚硝基脲在治疗肿瘤的过程中均可能产生二次肿瘤,有关亚硝基脲抗癌作用机制的研究,已成为癌症防治领域中的热点问题.本文对近几年有关亚硝基脲抗癌机理及其应用进行综述.     

儿童原发性肾病综合征尿蛋白质组样品预处理方法的研究

目的：优化儿童原发性肾病综合征尿蛋白质组样品的预处理方法。方法：取原发性肾病综合征儿童尿液，采用称量、SDS-PAGE及双向电泳（2-DE）等方法比较不同pH、冷丙酮沉淀不同时间等条件下所得到的蛋白质，优化蛋白提取的条件。结果：pH 2.7条件下所得到的蛋白种类最多；冷丙酮沉淀0.5 h获得的蛋白量明显少于1 h及2 h的蛋白量（P<0.05），而冷丙酮沉淀 1 h 和2 h获得的蛋白量没有显著性差异。pH 2.7条件下冷丙酮沉淀1 h为样品预处理的最佳条件，可获得满意的2-DE分离效果。结论：pH 2.7条件下，冷丙酮沉淀1 h为尿蛋白质组样品预处理的最佳条件。