AAV-hVEGF165及AAV-TGFβ1转染兔椎间盘纤维环细胞的实验研究

目的探讨应用hVEGF165与TGFβ1基因逆转椎间盘退变的可行性。方法用分子克隆技术，从pcDNA3（＋）-AAV-hVEGF165获得AAV-hVEGF165cDNA，并克隆至AAV包装质粒pSNAV上，构建成pSNAV-hVEGF165的AAV重组质粒。经酶切及测序鉴定后，用脂质体介导pSNAV-hVEG165转染HEK293细胞和血管内皮细胞。荧光免疫组化方法检测hVEGF165蛋白，并用MTT法测定hVEGF165对血管内皮细胞增殖的影响。由本元正阳公司对pSNAV-hVEGF165进行AAV-hVEGF165包装。AAV-hVEGF165与AAV-TGFβ1联合转染退变的椎间盘纤维环细胞，Western blot检测hVEGF165与TGFβ1的表达以及纤维环细胞Ⅰ型胶原表达量的变化。结果经酶切鉴定及基因测序证实AAV包装质粒pSNAV-hVEGF165构建完成，荧光免疫组化显示hVEGF165蛋白表达，MTT法显示hVEGF165蛋白对血管内皮细胞增殖有促进作用。本元正阳公司包装出具有生物学功能的AAV-hVEGF165与AAV-hVEGF165构建成功。Western blot显示hVEGF165与TGFβ1在纤维环细胞中表达，AAV-hVEGF165与AAV-TGFβ1双基因联合转染的纤维环细胞Ⅰ型胶原表达量较hVEGF165与TGFβ1基因各自单独转染的细胞Ⅰ型胶原表达量明显增多。结论hVEGF165在体外能够协同TGFβ1促进退变纤维环细胞Ⅰ型胶原表达增加。     

血液灌流对急性重度有机磷农药中毒的疗效探讨

目的探讨血液灌流对急性重度有机磷农药中毒治疗方面的临床效果。方法将急诊收治的急性重度有机磷农药中毒病例40例分为观察组11例,对照组29例。对照组采取常规治疗方式,观察组在此基础上予以血液灌流治疗,对比两组病例的治愈率、昏迷到清醒的时间长短、阿托品的用量及灌流前后胆碱酯酶水平的变化。结果两组病例在治愈率、阿托品总用量方面差异无统计学意义（P〉0．05）,而昏迷至清醒的时间差异有统计学意义（P〈0．05）,观察组病例治疗前后,血液胆碱酯酶的水平差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用血液灌流治疗急性重度有机磷农药中毒效果较为满意,应大力推广使用。     

多模态医学影像数据融合三维构建肢体肿瘤及其周围解剖整体结构

目的利用多模态医学影像数据三维重建和配准融合的方法构建肢体肿瘤及瘤周解剖整体结构,明确肿瘤的局部特征和三维空间关系,为肿瘤外科治疗术前评估和计划提供客观的空间可视化信息。方法采集4例肢体肿瘤患者盆部和大腿上段CT、MRI和MRA影像数据,分别导入三维重建软件,基于CT和MRI对人体不同组织结构成像敏感度的差异,从各模态影像数据中分别提取肿瘤及其周围目标结构进行三维重建。依据体内解剖参照点对各个组织的三维结构进行配准融合,构建肢体肿瘤及瘤周解剖整体结构。结果通过CT、MRI和MRA影像数据构建出包括肿瘤及周围骨骼、肌肉、神经、血管、盆腔脏器等组织的三维整体结构,显示了肿瘤的大小、形状、部位等局部特征以及肿瘤与其周围结构的三维空间关系。结论以多模态影像数据通过三维重建和配准融合的方法可以构建肿瘤区域多种组织的三维整体结构,清楚而直观地显示肿瘤的局部特征以及与周围结构的空间解剖关系,具有个体化肿瘤术前评估和计划的应用价值。     

连续肾替代抢救重症肾功能衰竭伴多器官衰竭40例临床研究

目的探讨重症。肾功能衰竭伴多器官衰竭（MODS）患者实施连续肾替代抢救治疗（CRRT）的临床效果。方法选取2011年6月至2013年6月连云港市第一人民医院肾功能衰竭患者40例,随机分为普通组和治疗组,普通组实施常规治疗,治疗组在常规治疗基础上实施CRRT治疗,对比两组治疗后尿素氮、血二氧化碳、血钾、肌酐、血氯、血钠等指标。结果普通组患者死亡10例（50．00％）,治疗组患者死亡6例（30．00％）,治疗组死亡率明显低于普通组（P〈0．05）;治疗组治疗后血肌酐、血尿素氮、血钾、血钠、血氯、血二氧化碳均有明显改善,优于普通组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论重症肾功能衰竭伴多器官衰竭患者实施连续肾替代抢救治疗的临床效果显著,可以有效提升抢救成功率。     

基于CT和MRI影像数据融合构建个体化OA膝关节三维解剖模型

目的探究一种基于CT和MRI影像数据融合构建包含主要解剖结构的骨关节炎(OA)膝关节三维模型的方法,并准确表达膝关节OA的解剖学特征。方法采集膝关节OA患者的CT和MRI影像数据,以DICOM格式导入Mimics软件中构建膝关节骨性结构模型和非骨性结构模型,基于图像特征的同层多点至多点的配准方法进行配准融合,构建OA膝关节三维解剖模型。结果基于CT和MRI影像数据融合构建出包括膝关节骨骼及关节软骨、半月板、韧带等结构的膝关节OA三维解剖模型,模型显示了关节间隙狭窄、半月板损伤、关节软骨磨损等膝关节OA的解剖学特征。结论通过CT和MRI影像数据融合可以个体化构建膝关节OA三维解剖模型,该模型能够真实且直观地展示骨性结构和非骨性结构的解剖学特征和空间解剖关系,为相关解剖学及生物力学研究提供三维解剖模型。     

人血管内皮细胞生长因子腺相关病毒包装质粒pSNAV-hVEGF165的构建及在HEK293细胞的表达

目的构建人血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）腺相关病毒（adenoassociated virus，AAV）表达载体包装质粒pSNAV-VEGF165，并体外检测pSNAV-VEGF165表达和生物学活性。方法采用分子克隆技术，从pcDNA3（＋）-VEGF165质粒获得VEGF165cDNA，并克隆至AAV包装质粒pSNAV上，构建pSNAV-VEGF165的AAV重组质粒，经酶切及测序鉴定正确，用脂质体介导pSNAV-VEGF165转染HEK293细胞和血管内皮细胞（vascular endothelial cell，VEC），荧光免疫组化方法检测VEGF165蛋白，并用MTT法测定VEGF165对VEC增殖的影响。结果经酶切鉴定及基因测序证实AAV包装质粒pSNAV-VEGF165构建成功，荧光免疫组化显示VEGF165蛋白的表达，对照组未见VEGF165蛋白的表达，MTT法显示VEGF165蛋白对VEC增殖有促进作用。结论构建的AAV包装质粒pSNAV-VEGF165在体外具有生物学活性，可作为AAV-VEGF165表达载体的包装质粒。     

3D打印技术在膝关节置换中的应用研究

<正>随着以计算机和机器人为代表的信息技术的快速发展,外科手术已进入由生物学、信息学、物理学相互融合的生物智能时代,微创和术前计算机辅助必然成为外科手术发展的趋势[1]。骨骼作为人体的支架, 担负着支持、承重、造血的功能,是人体运动功能的重要器官,膝关节是人体重要的承重关节,其结构复杂[2]。骨关节炎是一种以关节软骨退化伴随骨增生性改变的常见疾病[3]。在中老年群体中,膝关节炎(knee osteoarthritis,KOA)发病率较高,常伴     

亚低温对心肺复苏术后缺血缺氧性脑病的影响

目的：分析亚低温对心肺复苏术后缺血缺氧性脑病患者的影响。方法收集我院收治的60例行心肺复苏术患者的临床资料,在心肺复苏术成功且自主循环恢复后,随机分为观察组和对照组,每组30例,对照组进行常规治疗,观察组进行亚低温治疗,即将中心体温降至33℃左右,并维持24 h。7 d后对2组复苏后神经功能良好率和病死率进行分析和比较。结果对照组良好转归3例（10.0％）,中度残疾6例（20.0％）;不良转归6例（20.0％）;死亡15例（50.0％）。观察组13例良好转归（43.3％）,中度残疾3例（10.0％）,不良转归2例（6.7％）,死亡12例（40.0％）。结论亚低温治疗心肺复苏术后缺血缺氧性脑病操作简单、安全可靠、无痛苦,结合抗感染、防止电解质紊乱等治疗心肺复苏术后缺血缺氧性脑病效果显著,值得临床推广使用。     

四种平衡方法在减少全髋关节置换术后下肢不等长作用中的效果比较

目的观察全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)四种下肢平衡方法在减少下肢不等长(leg length discrepancy,LLD)的临床效果。方法单侧THA手术病人120例,随机分为A、B、C、D组4组,每组各30例,A组术中采用Shuck试验法进行下肢平衡,B组采用双侧髌骨平齐法,C组采用克氏针测量法,D组采用缝线测量法。术后测量病人双髋关节正位片和髂前上棘与内踝尖距离计算LLD,比较4组病人LLD的差异。结果 120例病人中有42例术后发生LLD(≥5 mm),其中7例LLD≥10 mm。当LLD5 mm时,四种下肢平衡方法之间比较差异无统计学意义(P0.05);当LLD介于5～10 mm和≥10 mm时,缝线测量法和克氏针测量法减少LLD的效果最佳。结论克氏针测量法和缝线测量法可有效减少THA术后LLD,优于Shuck试验法和双侧髌骨平齐法。     

百令胶囊干预肾小球硬化大鼠TGF—β 1 mRNA表达的研究

目的研究百令胶囊对大鼠肾小球硬化的干预作用,并探讨其与转化生长因子（TGF-β1）mRNA表达的关系。方法正常Wistar大鼠36只随机分为正常对照组,模型组和百令胶囊组。模型组和百令胶囊组行5／6肾切除制备进行性肾小球硬化模型,百令胶囊组以百令胶囊混悬液[4g／（kg·d）]灌胃治疗,模型组和正常对照组每天给予等量的自来水灌胃,大鼠自由饮水、进食。末次术后9周各组分别处死大鼠12只,测定血生化指标和尿蛋白排泄量;采用逆转录PCR（RT-PCR）检测大鼠肾组织中TGF-β1mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测。肾组织TGF-β1的表达。结果与模型组相比,百令胶囊组大鼠血浆白蛋白（Alb）增高,胆固醇（choles-terin）和低密度脂蛋白（LDL）降低,尿蛋白排泄（UAE）减少,血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平下降;TGF-β1 mRNA的表达明显减少（P〈0．01）,免疫组化检测示TGF-β1的表达减弱（P〈0．05）。结论随着5／6肾切除大鼠肾小球硬化程度加重,TGF-β1的表达增加,提示TGF-β1参与了肾小球硬化的进展;百令胶囊干预后,肾小球硬化大鼠TGF-β1的表达明显下调,可能是百令胶囊延缓。肾小球硬化进展的机制之一。