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目的探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对高糖诱导的A549细胞炎性小体生成的影响。方法 25 mmol/L高糖完全培养基体外培养肺泡上皮A549细胞,实验分为4组:对照组,ALDH2激动剂20μmol/L Alda-1组,ALDH2阻断剂60μmol/L Daidzin组,20μmol/L Alda-1+60μmol/L Daidzin组。干预处理24 h后,四甲基噻唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测细胞增殖活力,二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)荧光染色检测细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测ALDH2及炎性小体主要成员核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)蛋白的表达。结果与对照组相比,Alda-1特异性激动ALDH2后,细胞增殖活力无明显变化,细胞ROS水平和细胞迁移率均明显降低(P<0.05),ALDH2蛋白表达增加(P<0.05),炎性小体主要成员NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05);Daidzin特异性阻断ALDH2后,细胞增殖活力、细胞ROS水平、细胞迁移率、ALDH2蛋白和ASC蛋白表达无明显变化,NLRP3蛋白表达明显升高(P<0.05),caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与Alda-1组相比,Alda-1+Daidzin组细胞增殖活力及ROS水平无明显变化,细胞迁移率明显增高(P<0.05),ALDH2蛋白表达降低(P<0.05),NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论提高ALDH2在肺泡上皮A549细胞中的表达可减轻高糖诱导的细胞炎症反应,可能是通过降低细胞ROS水平、降低炎性小体的表达来实现。 相似文献
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纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值 总被引:21,自引:0,他引:21
目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标 相似文献
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以40%甘油作为保护液,红细胞在-80℃低温保存,实现了稀有血型红细胞、自身输血者的红细胞的长期保存使用(使用年限为10年)[1]。笔者采用40%甘油冰冻红细胞,用血细胞处理机洗涤红细胞去甘油化,最后添加MAP液制备成冰冻解冻去甘油红细胞,各项技术指标检测结果较为满意,现报告如下。1材料与方法1.1材料57.1%的甘油、三珠袋、9%的浓氯化钠(北京博得桑特输血器材公司);羟乙基淀粉40氯化钠(江苏常熟制药厂);0.9%的氯化钠(上海市血液中心)。1.2仪器RC.12BP离心机(美国Sorvall公司);Haemon-etics115细胞洗涤系统(美国血液公司);Julabo MP.19循… 相似文献
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目的:探讨凋亡:抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用。方法:①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组:空白对照组,脂质体10mg/L组(仅加空脂质体),NSODN 500nmol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500nmol/L组,bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测)。②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1,于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数:(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。(3)计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果:①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin mRNA明显下调,反义寡核苷酸500nmol/L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62.72%和67.43%。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用;联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64.9%,优于单独应用(单用bcl-2反义寡核苷酸为34.2%)(P〈0.01),两药相互作用指数为0.708。锥虫蓝拒染实验显示,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组细胞死亡率为62.1%,高于两药单用时的31.4%和41.4%。流式细胞仪检测凋亡显示,与各对照组相比,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡,凋亡率分别为43.6%和30.7%,两者联用凋亡率提高到58.6%(p〈0.01)。结论:①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达,并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。 相似文献
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纤维支气管镜诊治支气管异物24例临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨纤维支气管镜(纤支镜)在支气管异物诊断及治疗中的作用。方法:对24例经纤支镜确诊和治疗的支气管异物患者的临床资料进行回顾性分析。结果:主要临床表现为咳嗽、咳黄痰、发热、咯血、喘息,体格检查有呼吸音减低、吸气相干啰音及湿啰音;院外误诊为肺癌4例,肺炎4例,肺结核2例,支气管哮喘1例,结核性胸膜炎1例;右侧异物17例,左侧7例;动物性异物14例,植物性异物6例;均经纤支镜取出。结论:支气管异物临床上容易误诊,纤支镜在支气管异物的诊断和治疗中具有重要的意义。 相似文献
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通过对9、10月份间杭州高校的无偿献血情况的分析,并以街头流动点的献血者作为对照,笔者发现高校大学生普遍对无偿献血有着积极态度,踊跃参加无偿献血.在这两个月间,此两类采血点共有14892例无偿献血者,其中高校学生5120例,占34.4%,是献血队伍中不可低估的力量.针对高校学生心理承受能力较差的特点,尤其是新生和初次献血者,心理疏导是重要的环节,采取防范措施,减轻献血后的不适反应,防止严重反应,确保在校大学生的安全,是有积极意义的. 相似文献