激动线粒体乙醛脱氢酶2可降低高糖诱导的A549细胞炎性小体生成

目的探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对高糖诱导的A549细胞炎性小体生成的影响。方法 25 mmol/L高糖完全培养基体外培养肺泡上皮A549细胞,实验分为4组:对照组,ALDH2激动剂20μmol/L Alda-1组,ALDH2阻断剂60μmol/L Daidzin组,20μmol/L Alda-1+60μmol/L Daidzin组。干预处理24 h后,四甲基噻唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测细胞增殖活力,二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)荧光染色检测细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测ALDH2及炎性小体主要成员核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)蛋白的表达。结果与对照组相比,Alda-1特异性激动ALDH2后,细胞增殖活力无明显变化,细胞ROS水平和细胞迁移率均明显降低(P<0.05),ALDH2蛋白表达增加(P<0.05),炎性小体主要成员NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05);Daidzin特异性阻断ALDH2后,细胞增殖活力、细胞ROS水平、细胞迁移率、ALDH2蛋白和ASC蛋白表达无明显变化,NLRP3蛋白表达明显升高(P<0.05),caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与Alda-1组相比,Alda-1+Daidzin组细胞增殖活力及ROS水平无明显变化,细胞迁移率明显增高(P<0.05),ALDH2蛋白表达降低(P<0.05),NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论提高ALDH2在肺泡上皮A549细胞中的表达可减轻高糖诱导的细胞炎症反应,可能是通过降低细胞ROS水平、降低炎性小体的表达来实现。     

细胞洗涤机去甘油化技术的应用

以40%甘油作为保护液,红细胞在-80℃低温保存,实现了稀有血型红细胞、自身输血者的红细胞的长期保存使用(使用年限为10年)[1]。笔者采用40%甘油冰冻红细胞,用血细胞处理机洗涤红细胞去甘油化,最后添加MAP液制备成冰冻解冻去甘油红细胞,各项技术指标检测结果较为满意,现报告如下。1材料与方法1.1材料57.1%的甘油、三珠袋、9%的浓氯化钠(北京博得桑特输血器材公司);羟乙基淀粉40氯化钠(江苏常熟制药厂);0.9%的氯化钠(上海市血液中心)。1.2仪器RC.12BP离心机(美国Sorvall公司);Haemon-etics115细胞洗涤系统(美国血液公司);Julabo MP.19循…     

凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

目的：探讨凋亡：抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用，探讨其在抗癌方面的作用。方法：①实验于2002-08／2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组：空白对照组，脂质体10mg／L组（仅加空脂质体），NSODN 500nmol／L组（该3组均为对照组），survivin反义寡核苷酸500nmol／L组，bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组（分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸，48h后收取细胞进行以下检测）。②在脂质体介导下，以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1，于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数：（静止期／DNA合成前期）占整个细胞周期的百分比；增殖指数=（DNA复制期＋合成后期／有丝分裂期）占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后，用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数，锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。（3）计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果：①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后，出现生长抑制和细胞凋亡，细胞survivin mRNA明显下调，反义寡核苷酸500nmol／L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62．72％和67．43％。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用；联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64．9％，优于单独应用（单用bcl-2反义寡核苷酸为34．2％）（P〈0．01），两药相互作用指数为0．708。锥虫蓝拒染实验显示，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组细胞死亡率为62．1％，高于两药单用时的31．4％和41．4％。流式细胞仪检测凋亡显示，与各对照组相比，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡，凋亡率分别为43．6％和30．7％，两者联用凋亡率提高到58．6％（p〈0．01）。结论：①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达，并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。     

普通型向重型演变的新型冠状病毒肺炎病人的危险因素分析

目的 探讨新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病人普通型向重型演变的临床危险因素。 方法 收集24例普通型向重型演变COVID-19病人的临床资料（演变组）,分析临床特征、血液检验、炎性指标、胸部CT影像学特征及抗病毒治疗,并与同期41例普通型病人（普通型组）的临床资料进行比较,分析COVID-19病人普通型向重型演变的可能危险因素。 结果 临床特征,演变组在合并基础疾病和呼吸频率上与普通型组比较差异有统计学意义（P<0.05）,但在性别、年龄和临床症状上2组病人差异无统计学意义（P>0.05）。血液学检验结果分析,演变组淋巴细胞计数和血浆白蛋白明显低于普通型组（P<0.05）,演变组血糖和尿素明显高于普通型组（P<0.05）。但在白细胞计数、血小板计数及丙氨酸氨基转移酶差异均无统计学意义（P>0.05）。演变组炎性指标明显高于普通型组（P<0.05）。COCID-19普通型病人影像学表现为双肺磨玻璃阴影、斑片状影及实变影,双肺弥漫性磨玻璃阴影伴支气管充气征,两肺大面积实变影伴肺间质改变更易向重型演变,临床应重视。两种抗病毒药物联合和三种药物联合,在演变组和普通型组间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 COVID-19普通型向重型演变的可能危险因素有合并基础疾病、呼吸频率、淋巴细胞计数、血糖、白蛋白、尿素水平、炎症因子和影像学表现。     

纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值

目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标     

气管多发型鳞状细胞乳头状瘤1例并文献复习

目的：分析气管乳头状瘤的临床特点,以提高对气管乳头状瘤的认识,做到早诊断、早治疗。方法：对1例形态学表现气管多发性鳞状细胞乳头状瘤患者的病史、临床表现、胸部CT、纤维支气管（纤支镜）镜检查及病理并结合有关文献进行回顾性分析。结果：临床表现以进行性呼吸困难常见,反复咳嗽、咳痰（偶有黄脓痰）,咯出＂肉样物＂次之,咯血也可见到;胸部CT、气管三维重建及纤支镜检查尤为重要。结论：成人气管乳头状瘤少见,早期容易误诊,行纤支镜检查可明确诊断;经支气管镜引导下介入治疗安全可靠。     

纤维支气管镜在诊断肺真菌病中的应用

目的：探讨纤维支气管镜（纤支镜）下肺真菌病的形态,以及对肺真菌病的诊断价值。方法：对21例肺真菌病患者的临床资料及纤支镜检查结果进行回顾性分析。结果：21例患者临床表现以咳嗽、咳痰最为常见,其次为痰血,发热、胸闷等少见。胸部影像学表现为：肺不张3例,结节影3例,肿块12例,片状及斑片影4例,气管腔内结节影1例。纤支镜下形态学表现为：新生物14例（其中12例表面覆盖灰白坏死物）,气管腔内坏死物5例,管壁黏膜结节样隆起1例,未见明显异常1例。病理结果：均经纤支镜活检病理学确诊为肺真菌病,其中7例明确合并肺癌。结论：纤支镜下肺真菌病的形态学表现多样,且多无特异性,经纤支镜行组织病理学检查,对肺真菌病有较高的诊断价值。