镍精炼烟尘致NIH/3T3细胞NLRP3炎性小体的表达

采用某镍精炼厂沉降尘对NIH/3T3细胞进行染毒,染毒浓度分别为12.5、25、50μg/ml,以未染毒组(0μg/ml)作为对照。染毒48 h后,通过Cell-counting Kit-8实验检测细胞存活率,ROS试剂盒检测细胞内活性氧的生成量,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞内炎性因子NLRP3和ASC的表达水平,ELISA试剂盒检测caspase-1和IL-1β生成量。结果显示,随着染毒浓度的增加,细胞存活率逐渐下降,且差异具有统计学意义(P0.05);细胞内ROS生成量明显增加,NLRP3、ASC表达量不断增加,caspase-1和IL-1β生成量不断增加,且差异均有统计学意义(P0.05)。提示镍精炼烟尘可以激活炎性小体,促使炎性小体相关蛋白表达。     

线粒体分裂对甲苯二异氰酸酯诱导人支气管上皮细胞NLRP3炎性小体活化的影响

目的 探讨线粒体过度分裂对甲苯二异氰酸酯（TDI）诱导人支气管上皮细胞（HBECs）NLRP3炎性小体激活的影响。方法 （1）制备TDI-人血清白蛋白（HSA）偶联物，分别采用Gutmann法和BCA蛋白定量法测定偶联物中TDI和HSA的水平。（2）以不同浓度TDI-HSA（0.00、40.00、80.00和120.00 mg/L）处理HBECs 12 h，采用荧光探针法检测细胞中活性氧（ROS）水平，酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）的水平，蛋白质印迹法（Western blot）检测NLRP3炎性小体相关蛋白（ASC、NLRP3、Caspase-1）的表达水平以及线粒体分裂蛋白DRP1、融合相关蛋白MFN2和OPA1的表达水平。（3）采用线粒体分裂抑制剂Mdivi-1（10 μmol/L）预处理HBECs 2 h后，再用TDI-HSA（120.00 mg/L）处理12 h，检测细胞中ROS及IL-18、IL-1β的水平，测定NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Caspase-1，线粒体分裂蛋白DRP1及融合相关蛋白MFN2、OPA1的表达水平。结果 （1）合成的TDI-HSA偶联物中TDI和HSA质量浓度分别为22.80、2 120.00 μg/L，摩尔比为4.19。（2）与对照组相比，随着TDI-HSA染毒剂量的增加，HBECs细胞中R0S和IL-18、IL-1β水平明显增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组相比，TDI-HSA 80.00、120.00 mg/L剂量染毒组NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Cleaved Caspase-1的表达水平增加（P<0.05）；线粒体分裂蛋白DRP1表达水平增加，融合相关蛋白MFN2、OPA1表达降低（P<0.05）。（3）与TDI-HSA 120.00 mg/L染毒组相比，TDI-HSA+Mdivi-1组HBECs细胞中ROS和IL-18、IL-1β水平明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；NLRP3炎性小体相关蛋白ASC、NLRP3、Cleaved Caspase-1的表达明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；线粒体分裂蛋白DRP1表达明显降低，融合相关蛋白MFN2、OPA1表达升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 TDI可以剂量依赖性方式促进HBECs线粒体过度分裂及融合抑制，促进NLRP3炎性小体活化。采用线粒体分裂抑制剂Mdivi-1处理HBECs后，可显著抑制NLRP3炎性小体的活化，表明TDI诱导的线粒体过度分裂是NLRP3炎性小体活化的重要原因。     

儿童重症肺炎支原体肺炎与NLRP3炎症小体通路的关联

目的 研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路与儿童重症肺炎支原体肺炎发生的关系,并分析其诊断价值。方法 选取2020年5月-2022年12月济南市第二妇幼保健院收治的187例肺炎支原体肺炎患儿,其中重症组86例、轻症组101例,选取同期体检的健康儿童120名为对照组,检测外周血NLRP3、接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱天冬酶1(caspase-1)信使核糖核酸(mRNA)水平,不同病情患儿社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDSTx)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平,分析两类指标之间的相关性及NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA对儿童重症肺炎支原体肺炎的诊断价值。结果 对照组、轻症组、重症组NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA水平呈逐渐升高趋势(P<0.05);重症组CARDSTx、IL-1β、IL-18水平高于轻症组(P<0.05);肺炎支原体肺炎患儿两类指标水平呈正相关关系(P<0.05); NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA联合诊断儿童重症肺炎支原体肺炎的曲线下面积(AUC)为...     

雌马酚对血管内皮细胞凋亡和增殖影响

目的探讨大豆异黄酮(SI)代谢物雌马酚对血管内皮细胞凋亡和增殖的影响。方法体外培养血管内皮细胞(ECV-304),采用不同浓度雌马酚(0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00μmol/L)处理24 h,收集细胞,采用流式细胞术分析细胞内活性氧(ROS)、细胞凋亡和细胞周期;采用免疫组织化学技术分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3表达;采用噻唑蓝(MTT)法分析雌马酚对ECV-304细胞增殖影响。结果与对照组比较,6.25μmol/L雌马酚组ECV-304细胞内ROS含量下降,100.00μmol/L雌马酚组ECV-304细胞内ROS含量升高;与对照组比较,25.00、50.00、100.00μmol/L雌马酚组ECV-304细胞早、晚期凋亡率明显升高,并可导致细胞G1期阻滞(P<0.05);MTT实验结果显示,0、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μmol/L雌马酚组ECV-304细胞增殖抑制率分别为-(8.23±2.21)%、-(3.29±1.07)%、(6.75±1.73)%、(25.46±4.82)%和(36.93±4.66)%,低剂量雌马酚对细胞生长具有促进作用,高剂量雌马酚对细胞生长具有抑制作用;与对照组比较,25.00μmol/L雌马酚组作用24 h后,细胞内Bax和caspase-3表达增加,而Bcl-2表达减少。结论低浓度雌马酚可降低细胞内ROS含量,促进ECV-304细胞增殖;高浓度雌马酚可导致细胞凋亡、细胞周期阻滞,抑制细胞增殖。     

阿特拉津对大鼠支持细胞凋亡的影响

目的探讨阿特拉津对雄性SD大鼠睾丸支持细胞凋亡的影响及其作用机制。方法选用18~21日龄雄性SD大鼠,建立支持细胞原代培养模型。设溶剂对照组和阿特拉津10、50、100和200μmol/L 4个染毒剂量组,对支持细胞染毒24 h后,采用MTT法检测细胞活性,免疫荧光法观察波形蛋白的表达,流式细胞术测定细胞凋亡率,Real time-PCR与ELISA分别检测Fas L、caspase-3与caspase-8的mRNA表达及蛋白含量。结果阿特拉津50、100和200μmol/L染毒组细胞活力分别为82.47%、75.23%和53.76%,与溶剂对照组比较分别降低17.53%(P<0.05)、24.77%(P<0.05)、46.24%(P<0.01)。波形蛋白表达受抑制。阿特拉津50、100和200μmol/L染毒组细胞凋亡率分别为8.53%、13.07%和14.45%,与溶剂对照组比较分别升高86.86%(P<0.01)、186.13%(P<0.01)、216.06%(P<0.01)。Fas L、caspase-3、caspase-8的mRNA表达及蛋白含量上调(P<0.05或P<0.01)。结论阿特拉津可影响大鼠支持细胞活性,可通过Fas L途径诱导支持细胞凋亡。     

糖尿病大鼠心肌缺血再灌注细胞炎性坏死机制与NLRP3炎症小体活化的研究

目的探究糖尿病大鼠心肌缺血再灌注细胞炎性坏死机制与NLRP3炎症小体活化的相关性。方法制作糖尿病大鼠模型,将30只大鼠分为糖尿病观察组、对照组,观察组15只大鼠置于高脂饲料饲养,对照组15只大鼠置于普通饲料饲养。喂养3个月后处死大鼠后分别在12 h、24 h、36 h、48 h取组织细胞后对各组结果进行统计分析。结果 12 h、24 h、36 h后观察组大鼠组织细胞的caspase-3水平、caspase-1、NLRP3及NF-κB较对照组表达略有上升,差异无统计学意义(P>0.05),48 h后观察组大鼠组织细胞的caspase-3水平、 caspase-1、NLRP3及NF-κB较对照组表达显著上升(P<0.05);通过对ASC检测,凋亡因子也较正常对照组明显上升(P<0.05);观察组血糖、肌酐、24 h尿蛋白均较对照组升高(P<0.05);与对照组比较,观察组血清CK-MB和LDH活性升高、心肌梗死面积百分比pro-caspase-1、IL-1β表达上调(P<0.05)。结论糖尿病大鼠心肌缺血再灌注细胞炎性坏死机制与NLRP3炎症小体活化有关。     

白芍总苷对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞焦亡机制的研究

目的 观察白芍总苷(total glueosides of paeony,TGP)对缺血后再灌注乳鼠心肌细胞细胞焦亡的影响。方法 乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组、模型组及低、中、高剂量TGP组(TGP终浓度分别为25,50,100mg/L）,测定收集细胞上清液中LDH 含量;以MTT法检测每组活细胞数目;流式细胞仪检测各组心肌细胞焦亡率;Western Blotting检测心肌细胞焦亡相关斑点样蛋白（ASC）、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶1(caspase-1)以及白细胞介素1β（IL-1β）表达。结果 与缺血再灌注组相比,随白芍总苷浓度提升,心肌细胞缺血再灌注后的细胞活力升高,而LDH分泌量,焦亡率,NLRP3、ASC、caspase-1 、IL-1β的表达均下降,结论 白芍总苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用明显,可通过caspase-1途径来抑制缺血再灌注心肌细胞的焦亡。     

低剂量氢醒对TK6淋巴母细胞生物学性状及miR-221表达影响

目的 探讨低剂童氮醌(HQ)对TK6淋巴母细胞的生物学性状及小分子非编码RNA(microRNA)-221(miR-221)表达的影响.方法 磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0 μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组.应用CCK-8试剂盒检测细胞活力和细胞增殖,通过磷脂结合蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞调亡,用实时荧光定童-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测milR-221的表达改变.结果 细胞增殖以48 h最为明显,2.5、5.0和10.0 μmol/L组细胞增殖指数分别为1.33(P<0.05)、1.14(P<0.05)和1.12(P<0.05);milR-221表达改变以72h最为明显,2.5、5.0、10.0 p.μmol/L HQ组细胞milR-221表达量分别抑制了0.31倍(P<0.05)、0.39倍(P<0.05)和0.33倍(P<0.05).结论　低剂量HQ能抑制TK6细胞调亡和milR-221的表达,促进细胞增殖.     

槲皮素抑制HSP70表达的体外研究

目的探讨不同浓度槲皮素抑制正常细胞和肿瘤细胞热休克蛋白70(HSP70)的表达规律,寻找槲皮素抑制HSP70表达的最佳浓度,为研究HSP70的功能提供一种可行的方法。方法加入槲皮素至终浓度为50,100,150,200μmol/L,继续37℃培养6 h后,置42℃水浴受热1 h,于37℃恢复培养2 h,收获细胞。设立37℃培养组(正常对照)、42℃培养组(阳性对照)和0.1%DMSO组(溶剂对照)。分别处理肿瘤细胞株A549细胞和正常细胞株2BS细胞,用Western-blot检测细胞HSP70的表达水平。结果在A549细胞和2BS细胞中,随着槲皮素浓度的增加,HSP70表达逐渐降低。与正常对照组相比,阳性对照组和溶剂对照组的HSP70水平表达增高,差异有统计学意义(P<0.01)。在A549细胞中,当槲皮素浓度达到50μmol/L时,HSP70表达开始下调,但与阳性对照组相比,差异没有统计学意义(P>0.05);当槲皮素浓度达到100μmol/L时,与阳性对照组相比,HSP70表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);当槲皮素浓度达到150,200μmol/L时,与阳性对照组相比,A549细胞HSP70表达降低更加明显(P<0.01);150μmol/L组和200μmol/L组相比,HSP70水平差异无统计学意义(P>0.05)。在2BS细胞中,当槲皮素浓度达到50μmol/L时,HSP70表达开始下调,与阳性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);当槲皮素浓度达到100,150,200μmol/L时,与阳性对照组相比,HSP70水平也有显著性降低(P<0.01);150μmol/L组和200μmol/L组相比,HSP70水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论槲皮素可以抑制肿瘤细胞和正常细胞HSP70的表达,150μmol/L的槲皮素处理A549和2BS细胞,抑制HSP70表达的效果最佳。     

青蒿琥酯联合热疗诱导肺腺癌A549细胞凋亡作用

目的 探讨青蒿琥酯联合热疗诱导肺腺癌A549细胞凋亡的线粒体途径作用机制.方法 150μmol/L青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗(43℃,1 h)作用A549细胞24 h,流式细胞技术检测细胞周期和凋亡率情况.荧光显微镜观察线粒体膜电位变化.免疫组化、western blot检测细胞色素c、Bcl-2和caspase-3表达,CaspACE<'TM>检测试剂盒检测活性caspase-3表达.结果 青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗作用A549细胞24 h后,G0/G1期细胞数增多,S期和G2/M期细胞数减少(P<0.01);凋亡率分别是16.77%和28.90%(P<0.01).线粒体膜电位下降率分别为18.05%,50.98%(P<0.01).细胞色素c蛋白、caspase-3表达增加而Bcl-2蛋白表达减少(P<0.01).活性caspase-3蛋白水平增加A值分别为0.2641±0.0027,0.3613±0.0019,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗可诱导肺腺癌A549细胞凋亡,激活线粒体途径可能是诱导凋亡重要作用机制.     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。     

Problem of methodology of evaluation of the quality of public health

The basic general methodological assessments of public health quality are considered. An analogy is drawn with quality assessment in industry, approaches to the development of multi-aspect and multi-parameter assessment of public health quality are substantiated. A term of "qualimetry " of public health is suggested.