淫羊藿素联合达拉菲尼抑制黑素瘤增殖和转移

目的探讨淫羊藿素联合达拉菲尼对人黑素瘤A375细胞增殖和转移的抑制作用及可能的机制。方法采用不同浓度淫羊藿素和达拉菲尼单独及联合作用于A375细胞;CCK-8法检测细胞生长抑制率,进行协同性分析;Transwell和划痕实验检测细胞迁移和侵袭能力;qPCR及Westernblot检测MMP-2、MMP-9、Vimentin和E-cadherin的表达情况。结果淫羊藿素和达拉菲尼均能下调A375细胞MMP-2、MMP-9和Vimentin的表达,上调E-cadherin的表达,抑制其增殖、迁移和侵袭,且两药低浓度联合具有协同效应。结论淫羊藿素能协同达拉菲尼抑制A375细胞MMP-2、MMP-9和Vimentin的表达,促进E-cadherin的表达,抑制黑素瘤细胞的增殖和转移。     

植物黄酮对肝癌细胞HIF-1α表达影响的研究

肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率极高。近期研究表明,肝细胞癌在缺氧条件下的增殖、浸润与HIF-1α所调控的基因表达有关,而植物黄酮对于肿瘤的发生、增殖、迁移、血管的生成以及耐药性等都具有显著的抑制作用,其抗肿瘤分子药理机制与HIF-1α基因表达有关。本文主要就HIF-1α生物学特性及植物黄酮对肝癌细胞HIF-1α表达的影响进行综述。     

应用型本科院校课程模式创新的现实困难和有效出路

针对应用型本科院校课程模式创新,阐述优先于课程教学组织实施的情感、认知、探索和应用创新目标的系统配合,以激发创新情感为核心目标,适用知识的认知能力和自主探索能力为基础目标,建构实现应用创新能力养成训练的课程创新模式。为课程模式创新"教什么"和"如何教"提供一些思路和借鉴。     

响应面分析法优化黄芩总黄酮提取工艺的研究

目的优选超声波法提取黄芩总黄酮的工艺条件,为工业化生产黄芩总黄酮提供参考。方法采用超声波法提取黄芩总黄酮,对使用Al（NO3）3-NaNO2显色法测定黄芩总黄酮进行方法学考察;选取乙醇浓度、液固比、提取时间3个影响因素进行BoxBenhnken中心组合设计,利用响应面分析法（RSM）对提取工艺参数进行优化。结果方法学考察结果表明本实验室采用Al（NO3）3-NaNO2显色法测定黄芩总黄酮及超声提取工艺可靠;提取黄芩总黄酮最佳提取工艺为：乙醇浓度60%,液固比40mL/g,提取时间45min;预测值为1.776%,实际得率为1.704%,两者吻合度较高。结论 Box-Benhnken设计结合响应面分析法对黄芩总黄酮提取工艺进行优化既方便又快捷,得出的参数可信度高、实用性好。     

毫米波辐照对心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的观察毫米波辐照对心肌成纤维细胞增殖及胶原合成功能的影响。方法取原代培养的心肌成纤维细胞,随机分为A、B、C、D组。A组为对照组。B、C、D组分别给予波长8.4 mm（频率35.75 GHz）、功率10 mW/cm^2的毫米波辐照15、30、60 min,1次/d,共5 d。辐照2、5 d用MTT法检测各组细胞增殖活性,辐照1、2、3、4、5 d分别用羟脯氨酸碱水解法和放射免疫分析法分别检测各组细胞培养液上清中的羟脯氨酸（HYP）和Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢNP）。结果与A组相比B、C、D组CFbs增殖活性升高,细胞培养液上清中HYP和PⅢNP水平升高（P均〈0.05）,且升高程度均随毫米波每次照射时间及照射天数增加而增加（P均〈0.05）。结论毫米波辐照可以促进成纤维细胞的增殖及胶原蛋白合成。用毫米波辐照治疗心血管疾病时,每次辐照时间及疗程较长有导致心肌纤维化的可能性。     

复叶耳蕨提取物体外抗HIV-1 RT活性的研究

目的对鳞毛蕨科复叶耳蕨属植物复叶耳蕨不同提取部位体外抗HIV-1逆转录酶活性进行研究。方法在体外无细胞系统内采用酶联免疫吸附测定HIV-1逆转录酶的半数有效浓度(IC50)。结果复叶耳蕨乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物抑制HIV-1逆转录酶的半数有效浓度IC50分别为84.069,.74μg.ml-1,水提取物抑制HIV-1逆转录酶的半数有效浓度IC50>200μg.ml-1。结论复叶耳蕨乙酸乙酯提取物与正丁醇提取物具有体外抑制HIV-1逆转录酶作用。     

PCR法与RPR法检测梅毒的比较

本文比较了ＰＣＲ法与ＲＰＲ法检测梅的阳性率，在一期梅毒ＰＣＲ法的阳性率显著高于ＲＰＲ法，在二期梅毒两种方法的阳性率接近。作者认为对一期梅毒的诊断价值ＰＣＲ法比ＰＲＰ法高。作者还分析了目前二期梅毒的临床发现率比一期梅毒高的原因，提出对ＳＴＤ患乾应常规检测梅毒。     

低氧对人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响

目的 探讨低氧对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向神经细胞分化的影响.方法 将第2代hBM-SCs进行传代、纯化,取第4代hBMSCs进行流式细胞仪检测鉴定;以含1％ FBS的α-MEM为基础诱导培养基,根据处理条件不同分为4组:常氧对照组、低氧对照组(3％氧浓度)、常氧诱导组[添加20 ng/mL表皮生长因子(E GF)及20 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]、低氧诱导组(3％氧浓度下添加20 ng/mL EGF及20 ng/mL bFGF).连续诱导3d后,采用RT-PCR及Western blot技术检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白2(MAP-2)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在基因及蛋白水平表达变化.结果 第4代hBMSCs流式鉴定结果示:骨髓基质标志CD105、CD90、CD29表达分别为95.8％、98.2％、95.1％,而造血细胞标志CD19表达为0.2％;与常氧对照组比较,低氧对照组NSE、MAP-2、GFAP在基因及蛋白水平表达均无明显改变(P＞0.05),而常氧诱导组及低氧诱导组相应表达均升高(P＜0.05),且低氧诱导组表达高于常氧诱导组(P＜0.05).结论 低氧促进EGF联合bFGF对hBMSCs向神经元细胞及神经胶质细胞分化的诱导作用.     

晚期糖基化终末产物通过氧化应激诱导大鼠软骨细胞损伤

目的:探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)能否通过氧化应激引起大鼠软骨细胞损伤。方法:原代培养SD大鼠软骨细胞,对细胞表型进行鉴定;应用CCK-8法检测软骨细胞生存率;DCFH-DA染色荧光显微镜下检测胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的水平;Hoechst 33342核染色法及Annexin V-FITC/PI流式细胞法测定软骨细胞的凋亡率;RT-PCR法检测软骨细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、MMP3、MMP13和COL2的mRNA水平;Western blotting法检测软骨细胞中cleaved caspase-3、MMP3、MMP13和COL2的蛋白水平。结果:与对照组相比,AGEs可显著上调胞内ROS水平(P0.05),但经抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制后ROS的生成明显减少(P0.05);另外,NAC可抑制AGEs引起的软骨细胞凋亡相关分子Bax/Bcl-2和caspase-3水平的上调,并减少MMP3和MMP13表达及COL2的丢失(P0.05)。结论:AGEs可通过氧化应激诱导大鼠软骨细胞损伤。     

GDF-5和Dex通过Wnt/β-catenin信号通路促进rBMSCs体外成软骨分化

目的利用生长分化因子(GDF-5)联合地塞米松(Dex)诱导大鼠BMSCs成软骨分化,并探讨Wnt/β-catenin信号通路在其中的作用。方法用全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,取P3代细胞随机分成6组:BMSCs组、BMSCs+Dex组、BMSCs+GDF-5组、BMSCs+GDF-5+Dex组、BMSCs+GDF-5+Dex+SB216763组和BMSCs+GDF-5+Dex+XAV-939组。连续诱导培养14 d,倒置相差显微镜观察细胞形态,Alcian blue染色检测细胞的蛋白聚糖,RT-PCR检测成软骨分化相关基因aggrecan、Col2、Sox9、Col1,Wnt/β-catenin信号通路相关基因Dvl1、Gsk3β、β-catenin mRNA表达,Western blot检测Ⅱ型胶原蛋白和β-catenin蛋白表达。结果与BMSCs组相比,BMSCs+GDF-5+Dex组能够使诱导的细胞蛋白聚糖分泌明显增加;Aggrecan、Col2、Sox9基因表达明显增加(P0.05);Ⅱ型胶原蛋白表达增加(P0.05);β-catenin mRNA及蛋白表达水平也增加(P0.05)。与BMSCs+GDF-5+Dex组相比,添加SB216763组蛋白聚糖,Ⅱ型胶原基因和蛋白表达增加(P0.05);相反,添加XAV-939组相应的成软骨分化基因及蛋白表达下降(P0.05)。结论 GDF-5联合地塞米松(Dex)可诱导大鼠BMSCs成软骨分化,Wnt/β-catenin信号通路可能在其中发挥促进作用。