实验课期间进行组织学实验考试的可行性策略

由于组织学实验考试范围相对局限,为确保实验考试的公平、公正,通常在仅有的实验室中各班连续相继考试,短时间(如1d)内使各班实验考试全部完成.此举不仅需要学校教学管理部门协调安排考试时间,而且影响到了其他课程的正常进行,干扰了原有的教学秩序.同时,随着各院校招生规模的扩大,及专科接本科教育的实施,受实验室资源所限,相当一部分院校组织学的考试已无法在短时间内完成.     

地高辛标记的金黄地鼠RPL30cDNA探针的制备和应用

目的制备地高辛标记的核糖体蛋白RPL30cDNA探针并用其研究RPL30在神经管发育过程中的表达状况。方法利用分部分排除技术（SSS法）从金黄地鼠神经管cDNA文库中逐级筛选得到RPL30cDNA的全长序列；随机引物法制备地高辛标记RPL30cDNA探针，点杂交法检测探针的灵敏度；Northern杂交检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况。结果本研究从构建的神经管cDNA文库中得到RPL30cDNA片段，全长535bp；制备探针的浓度达到50mg／L；Northern杂交检测发现E8d～E12d神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平。结论该研究结果为进一步探讨RPL30与神经管发育和神经管畸形发生之间的关系奠定基础。     

多种维生素及微量元素对高温致神经管畸形的保护作用及其对纤维粘连蛋白和层粘连蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨高温致神经管畸形(NTD)的因素及多种维生素和微量元素对NTD的保护作用。方法:实验孕鼠随机分为A组(孕前第8天开始灌服多种维生素及微量元素)、B组(孕后第1天开始灌服)和C组(不灌服)孕鼠高温处理。对各组胎鼠进行形态学观察,记录NTD发生率;用原位杂交技术检测纤维粘连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)在神经上皮细胞及其周围间充质中的转录状况。结果:(1)各组鼠胚均出现不同类型的NTD,C组NTD发生率最高,为77.5%。(2)各组鼠胚神经上皮细胞及其周围间充质中见FN和LN mRNA阳性转录信号,C组明显弱于其他组。结论:FN和LN转录降低是NTD发生的重要因素之一,多种维生素及微量元素对高温致NTD有一定的保护作用。     

研究生组织学技术教学的探索与实践

《组织学技术》作为一门实践性很强的实验科学,是研究生教学的基础课程,也是实现人才培养目标的重要教学环节。我们从转变教学观念、拓宽教学内容及改革教学方法、加强教材建设、加强实践环节、强化考核手段等方面进行了探索,取得了良好效果。     

成年肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓增殖细胞的分化

目的 探讨成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内增殖细胞的类型及分化情况. 方法 对ALS转基因鼠发病期进行BrdU标记,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光双标及三标染色技术检测ALS转基因鼠病变进展过程中脊髓内增殖细胞的分化情况. 结果 成年ALS转基因鼠发病期脊髓的中央管、灰质、白质均未检测到BrdU/DCX双标记阳性细胞和BrdU/NeuN双标记阳性细胞.灰质、白质和中央管周围检测到大量NG2阳性细胞,阳性细胞数量随病变进展逐渐减少,NG2阳性细胞多呈BrdU阳性表达;可检测到少量BrdU/A2B5双标记阳性细胞;ALS转基因鼠发病期脊髓BrdU/GFAP双标记阳性细胞较多,部分双阳性细胞呈Nestin阳性,而野生型鼠脊髓内未检测到BrdU/GFAP双标记阳性细胞.结论 神经退行性病变激活ALS转基因鼠脊髓内源性增殖细胞向神经胶质细胞方向分化,未检测到向神经元方向分化,内源性增殖细胞尚不能有效地促进退行性病变的修复.     

叶酸及维生素C对高温致神经管畸形的保护作用

目的探讨叶酸及维生素C对高温引起的神经管畸形（NTD）的保护作用。方法孕鼠随机分为实验组（A，B，C）和对照组，A组（孕前第8天开始灌服叶酸及维生素C）、B组（孕后第1天开始灌服）和C组（不灌服）孕鼠分剐于孕第8天高温处理。对各组胎鼠进行形态学观察，记录并计算植入数、活胎数、死胎数、畸形数及NTD发生率。结果各组鼠胚均出现不同类型的NTD，C组NTD发生率最高，为78．3％．结论叶酸及维生素C对高温致NTD有一定的保护作用。     

研究生组织学技术教学改革尝试

组织学技术作为研究生教学课程,对研究生进一步掌握机体形态结构和生理机能之间的关系有非常重要的作用.作为一门应用性较强、发展较快的技术,在教学过程中需要不断地补充研究方法的最新进展,这在一定程度上增加了教学的难度.因此在教学过程中如何提高教学效果,使研究生既掌握基本的理论方法,又能灵活地运用到将来的科研工作中,是这门课程最关键的问题.我们在近年的教学实践过程中进行了以下几方面的改革,取得了良好的效果.     

胰腺十二指肠同源框1基因在大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用

目的:探讨胰腺十二指肠同源框1基因(PDX-1)在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用。方法:新型纳米载体Superfect介导含有PDX-1基因的真核表达载体转染骨髓MSCs,G418筛选,分步法进行体外诱导;流式细胞仪检测诱导后胰岛素阳性细胞的比例,SABC免疫细胞化学染色和Western印迹法检测诱导后细胞胰岛素蛋白的表达;ELISA法检测诱导后细胞对葡萄糖刺激的反应能力。结果:Superfect可高效介导重组载体在骨髓MSCs表达,随着转染时间延长,表达逐渐增强PDX-1~ MSCs分化为胰岛素阳性细胞数较转染空白载体和PDX-1~-MSCs组明显增多;诱导后细胞表达胰岛素,转染PDX-1基因后表达明显增加;PDX-1~ MSCs对不同浓度的葡萄糖刺激表现出不同的胰岛素分泌反应。结论:骨髓MSCs体外能分化为胰岛素分泌细胞,PDX-1能显著提高其分化效率。     

连环蛋白及其在白血病细胞中的表达和临床意义

连环蛋白是一组分布和作用十分广泛的细胞内糖蛋白,是细胞与细胞之间相互粘附结构的一种重要成份,磷酸化后又可作为细胞内信号传导因子和基因转录调节因子,在恶性肿瘤的发生、发展、转移和转化机制中发挥重要作用。近年来发现其与白血病细胞恶性行为密切相关。EGF、TGFa、PDGF、HGF和CSF-1等细胞因子均能使连环蛋白磷酸化,磷酸化后的连环蛋白成为白血病细胞逃避杀伤的生存信号。因此,抑制连环蛋白的磷酸化可望成为肿瘤治疗的一种新方法。     

热休克蛋白在高温处理后鼠胚心脏的表达

目的：探讨热休克蛋白在高温处理后金黄地鼠胚心脏的表达变化。方法：将金黄地鼠孕鼠于受孕第8d置42℃水浴持续20min，定时剖腹取胎，制备石蜡切片。利用免疫组织化学(SABC法)染色，观察心脏正常发育和异常分化过程中热休克蛋白(HSP70和HSP90)的表达。结果：高温处理后8h，实验组鼠胚内皮细胞及心胶质HSP70和HSP90的表达较对照组明显增强；16h，表达最强；24h，仍较对照组强；48h，和对照组的表达无显著性差异。结论：高温诱导金黄地鼠胚心脏热休克蛋白表达增强，对心脏的异常发育具有保护作用。