Fas/FasL在移植免疫中的作用

Fas/FasL是介导细胞凋亡的关键性效应分子,在参与器官和组织的移植免疫过程中起着十分重要的作用,表现为发生急性排斥时Fas或FasL表达水平明显升高;介导造血干细胞移植的移植物抗宿主病的免疫损伤;某些表达FasL的组织对移植物产生免疫豁免的保护。     

磁共振检测重型β-地中海贫血患者内分泌腺体铁过载的临床意义

目的 联合肝脏、胰腺、垂体磁共振T2-star（MRI T2＊）评估重型β-地中海贫血（β-TM）患者相关脏器铁过载的临床意义,分析去铁酮治疗前后的肝脏、胰腺、垂体MRI T2＊变化的临床意义。方法 选择长期（输血史≥ 1年,输血次数＞ 10 次）治疗β-TM患者中选择年龄≥ 10岁26例,其中男性7例,女性19例。2010年7月 ～ 2011年7月规律输血,仅口服去铁酮去铁治疗,治疗前、服用去铁酮满1年时分别赴香港威尔斯亲王医院进行胰腺MRI T2＊（胰腺T2＊）、肝脏MRI T2＊（肝脏T2＊）、垂体MRI T2＊（垂体T2＊）检测。结果 服用去铁酮治疗前,肝脏铁浓度（LIC）（22.42 ± 7.21） mg/g;服用去铁酮满1年时,肝脏LIC（21.46 ± 7.69） mg/g。治疗前后肝脏、胰腺、垂体MRI T2＊值[（1.48 ± 1.23） ms vs （1.55 ± 1.18） ms,（9.09 ± 9.96） ms vs （9.51 ± 13.0） ms,（9.74 ± 4.46） ms vs （10.14 ± 4.76） ms]比较,差异无明显统计学意义（P 〉 0.05）。治疗前后肝脏与胰腺MRI T2＊值均呈正相关（P 〈 0.05）;治疗前后LIC与胰腺T2＊值均呈负相关（P 〈 0.05）。肝脏与垂体、胰腺与垂体MRI T2＊值治疗前后均不相关（P 〉 0.05）。年龄与肝脏、胰腺及垂体的MRI T2＊值无相关关系（P 〉 0.05）。结论 MRI T2＊可以作为评估β-TM患者胰腺、垂体铁负荷有效、安全的检测工具;可通过肝脏铁负荷来推测胰腺铁负荷,胰腺铁负荷与年龄无关;但肝脏负荷并不能作为垂体铁负荷的推测手段。去铁酮的临床疗效难以定论,有待进一步研究。     

儿童重型β-地中海贫血造血干细胞移植后肝静脉闭塞病防治的临床观察

目的:观察肝素联合前列地尔脂质微球体(凯时)和人血白蛋白在防治儿童重型β-地中海贫血造血干细胞移植后肝静脉闭塞病(HVOD)中的作用。方法:对38例重型β-地中海贫血患儿,年龄在2~14岁之间,平均年龄为6.1岁,共进行46例次造血干细胞移植,从-3d开始应用肝素, 1d开始应用前列地尔脂质微球体和人血白蛋白预防HVOD,观察其临床效果。结果:46例次的造血干细胞移植过程中有20例发生程度不一的肝静脉闭塞病。肝素、前列地尔脂质微球体和人血白蛋白联合应用过程中未观察到明显的毒副作用。结论:肝素联合前列地尔脂质微球体和人血白蛋白在预防儿童重型β-地中海贫血造血干细胞移植后肝静脉闭塞病是有效的。     

实践教师团队模式 促进儿科学教学改革

为顺应现代教学模式发展 ,针对儿科学教学中存在的困难和问题 ,探索和实践教师团队模式 ,最大程度地发挥教师的个人专长和特色 ,实现优势互补 ,保证教学质量平衡发展 ;充分调动学生学习积极性 ;促进教师的自身发展 ;高效利用教师资源 ,缓解师资压力 ,从而促进儿科学的教学相长     

Fas死亡信号激发域cDNA的克隆、表达及体外生物学效应

目的：克隆及表达Fas死亡信号激发域(Fas Activation Domain，FasAD)片段，获得具有生物学活性的FasAD多肽。方法：应用半巢式逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增Fas死亡信号激发域cDNA片段，构建Intein表达型原核表达载体FasAD-pTYB12，应用IMPACT^TM-CN系统表达及进行一步法亲合层析分离、纯化FasAD多肽。结果：DNA序列测定显示克隆的FasAD cDNA碱基排列顺序与Genebank(M67454)所示完全一致。重组表达载体FasAD-pTYB12经IPTG诱导，成功表达可溶性融合蛋白，进一步分离、纯化获得分子量约5000的FasAD多肽，Westem blot显示FasAD多肽能被兔抗人Fas多抗识别。初步的生物学活性鉴定显示，该FasAD多肽抑制rhFasL诱导的细胞凋亡的生物学活性最高可达70％。结论：可利用IMPACT^TM-CN系统制备Fas死亡信号激发域的小分子量多肽，为深入研究Fas结构与功能的关系及与配体的相互作用提供了相关的实验基础，为进一步开发相关的生物免疫调节剂提供了实验依据。     

PCR－小卫星DNA指纹图在异基因造血干细胞移植植活指标监测中的应用

为了解异基因骨髓移植治疗某些遗传及恶性血液性疾病的植活监测指标，用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增具有高度多态性的小卫星ＤＮＡ３３．１、３３．６位点，联合地高辛标记的位点特异性寡核苷酸探针杂交的方法，以小卫星ＤＮＡ指纹图为特异性遗传标志，对６例异基因骨髓移植，１例脐血移植进行植活指标监测，６例获得供者源性细胞植活证据。结果显示：小卫星ＤＮＡ指纹图个体特异性强，可作为监测异基因造血干细胞移植植活的可靠格标，尤其是同血型，同性别，ＨＬＡ配型表型全相合的移植；该方法程序简单，操作方便，灵敏度高，可达０．５％，最早获得植入证据的时间是＋１５天，仅需模板ＤＮＡ１００ｎｇ；如果扩增位点增加，可提高个体识别能力。     

小鼠到大鼠骨髓移植诱导供者特异的免疫耐受

目的　探索适用临床的异种骨髓移植诱导免疫耐受的方案。方法　受体SD大鼠接受亚致死剂量照射(5 5Gy)当天尾静脉注射BALB/c小鼠骨髓细胞 8× 10 7,2d后腹腔内注射环磷酰胺 15 0mg/kg。分别于移植后 3 0 ,60及90d取受体大鼠外周血 ,用特异性单抗作直接免疫荧光染色后上流式细胞仪 (FACS)分析 ,检测骨髓植入的嵌合情况 ,并于 4周后作皮片移植和混合淋巴反应 (MLR) ,检查免疫耐受情况。结果　受体大鼠外周血可检测到小鼠骨髓源性细胞 ,嵌合体在 90d时仍存在。皮片移植和MLR证明受体SD大鼠对供体BALB/c小鼠产生特异性免疫耐受 ,对无关第 3者C5 7BL/ 6小鼠仍有强烈免疫应答。结论　小鼠到大鼠骨髓移植成功地诱导了特异性免疫耐受。     

急性白血病凋亡因子Fas配基的表达研究

目的：研究Fas配基在急性白血病的表达与意义。方法：用免疫组化SP法检测临床55例急性白血病Fas配基的表达。结果：16/55的急性白血病患者出现白血病细胞Fas配基阳性;阳性病例均为急性髓性白血病(16/39);Fas配基阳性细胞占白血病细胞总数的(59.6±29.8)％。结论：Fas配基在部分急性髓性白血病中高表达,Fas/Fas配基途径可能参与这部分急性髓性白血病的免疫逃避。     

PCR—DNA指纹图识别异基因骨髓移植后重建造血的细胞起源

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增多态性小卫星ＤＮＡ的３３．１，３３．６位点，联合地高辛标记寡核苷酸探针杂交方法，以小卫星ＤＮＡ的ＰＣＲ－ＤＮＡ指纹图为特异性遗传标志，识别２例慢性粒细胞白血病患接受同供髓的骨髓移植后造血重建的细胞起源。结果显示均有供源性造血细胞植活。该方法灵敏度高，特异性强，无同位素污染，尤其适用于同性别、同血型、ＨＬＡ全相合的异基因骨髓移植植活指标的监测。