金黄色葡萄球菌肠毒素B基因在大肠杆菌中的克隆及表达

目的扩增金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,并进行诱导、表达,为其应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEB的基因序列,设计一对分别含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增后,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切,并与做相应酶切的pET-28α(+)连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序,用IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot印迹鉴定表达产物。结果成功扩增出SEB基因,基因大小为801bp,重组PET-28α(+)-SEB双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEB在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99%。经IPTG诱导后,pET-28α(+)-SEB/BL21在相应的相对分子质量(35×103)可见融合蛋白以包涵体形式表达,免疫印迹在相应分子量检测到目的蛋白。结论克隆了SEB基因,并成功在大肠杆菌BL21中以包涵体形式表达,为肠毒素B应用研究奠定了基础。     

游离脂肪酸诱导胰岛β细胞损伤的分子机制

2001年,Banting奖得主McGarry教授在美国糖尿病学会(ADA)年会上作了题为"在2型糖尿病发病中的脂肪酸代谢异常"的报告,指出脂代谢异常为2型糖尿病(T2DM)的原发性病理生理事件,同时基于脂代谢紊乱常先于糖尿病发病前数年存     

系统化评估与风险预判培训对护士评判性思维能力的影响分析

目的 分析系统化评估与风险预判培训对护士评判性思维能力的影响。方法 于 2020 年 5 月至 2021 年 5 月期间我院开展 传统方式培训,选取此时工作的护士 100 名作为研究对象,并将相关资料纳入传统组。于 2021 年 6 月至 2022 年 6 月期间我院 开展系统化评估与风险预判培训,选取此时工作的护士 100 名作为研究对象,并将相关资料纳入实践组。比较两组的专业成绩、 批判性思维能力、培训认可度的差异性。结果 实践组的专业成绩高于传统组（P<0.05）。实践组的批判性思维能力高于传统 组（P<0.05）。实践组的培训认可度高于传统组（P<0.05）。结论 医院护士培训实施系统化评估与风险预判,能够拓展护士专 业知识,提升批判性思维能力,提高培训认可度。     

某省部分三级甲等医院甲状腺癌诊治现状抽样调查分析

甲状腺癌是内分泌系统肿瘤中最常见的恶性肿瘤,占人类全部肿瘤的1%.男女发病率为1:2～1:3.临床发现的甲状腺结节中有5%～10%为甲状腺癌.     

红细胞参数及计算公式对缺铁性贫血与地中海贫血鉴别诊断效能比较

目的比较8种红细胞参数及计算公式对缺铁性贫血与地中海贫血鉴别诊断的实际效能。方法用全自动血球仪对本院产检接收的110例缺铁性贫血和211例地中海贫血患者的红细胞参数进行检测,以文献报导的8种红细胞参数及计算公式(依次标记为F1-F8)为鉴别指标,分析它们的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、阳性似然比、阴性似然比、对应的ROC曲线以及曲线下面积(AUC)。结果发现公式F7、F8和F5的鉴别效能明显高于其余5个公式,3个公式的AUC分别为0.978、0.953and 0.925。结论本研究表明公式F7、F8和F5对惠州地区人群的地中海贫血与缺铁性贫血有较好鉴别效能,其中以公式F7鉴别效能为最高(AUC=0.978),其灵敏度、特异度分别为93.36%、95.41%,可供本地区基层医疗机构鉴别TT与IDA时选用;公式F1鉴别效能最低,不宜采用。     

早发癫(痫)性脑病的研究进展

早发癫(痫)性脑病(early-onset epileptic encephalopathy,EEE)是指一组在新生儿期或婴儿期起病的严重癫(痫)综合征,为药物难治性全面或局灶发作性癫(痫),脑电图存在频繁而广泛的异常放电,常伴随严重发育迟缓和行为异常.发作间期脑电图改变具有年龄依赖性,并与智力运动发育落后密切相关.EEE主要包括早期肌阵挛脑病、大田原综合征、婴儿严重游走性局灶性癫(痫)、婴儿痉挛症及Dravet综合征.EEE的病因具有异质性,多数仍不明确,对多种抗癫(痫)药物及非药物疗法反应欠佳.EEE预后不良,多数患儿遗留有严重智力运动发育落后,部分甚至存在猝死的风险.     

肠道菌群失调与生物钟紊乱的相关性

<正>正常人体肠道内寄生着种类繁多、数量庞大的微生物,以细菌为主,统称为肠道菌群。据统计其种类大于1 000种,总数高达1014,是人体细胞总和的10倍[1]。正常情况下,肠道内的微生物与宿主相互依存彼此制约,共同维持动态的生物平衡。一旦外界环境或内在平衡受到破坏,肠道菌群种类、数量及比例等发生改变,造成肠道内菌群失调[2]。研究发     

大黄素对原代培养小鼠肝细胞非酒精性脂肪变的影响

[目的]观察大黄素对原代培养小鼠肝细胞非酒精性脂肪变的影响。[方法]采用改良的胶原酶原位灌流法分离小鼠肝细胞,以含50%胎牛血清的1640培养液造成肝细胞脂肪变,加入不同浓度大黄素,检测培养上清液肝酶活性并观察细胞形态学变化。[结果]以50%胎牛血清的1640培养液培养的肝细胞明显脂肪变性,大黄素干预组培养上清液丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性较模型组显著降低,苏木精-伊红染色显示肝细胞脂肪变性减轻。[结论]大黄素可明显减轻原代培养小鼠肝细胞的脂肪变性。