Nutlin-3a-PLGA微球促大鼠脊髓损伤后的运动功能恢复

目的 探讨Nutlin-3a-PLGA微球对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的影响.方法 采用单乳化法制备Nutlin-3a-PLGA微球.健康成年SD大鼠采用随机数字表法分为单纯损伤组、生理盐水微球治疗组和Nutlin-3a-PLGA微球治疗组,每组12只;另取3只大鼠进行正常脊髓铬化青染色.对T1o脊髓进行右半横断损伤.单纯损伤组仅行脊髓右半横断损伤而不给予干预,生理盐水微球治疗组术后予以生理盐水微球治疗,Nutlin-3a-PLGA微球治疗组术后予以Nutlin-3 a-PLGA微球治疗.术后2、4周行铬化青染色观察脊髓脱髓鞘情况,术前1d,伤后2、3、4周行Catwalk步态分析正常步序比、站立时间、足印平均强度、两后爪脚间距离以及相对足印距离5个时间-空间参数评价大鼠运动功能变化.结果 伤后4周与单纯损伤组(1 461.44±123.46)和生理盐水微球治疗组(1 347.33±114.42)比较,Nutlin-3a-PLGA微球治疗组(1 879.46±115.41)铬花青染色显示脱髓鞘病变较轻(P＜0.05),髓鞘排列较为紧密.与术前比较,术后2周单纯损伤组和生理盐水微球治疗组Catwalk步态分析各项行为学参数差异有统计学意义(P＜0.05);Nutlin-3 a-PLGA微球治疗组正常步序比、两后爪脚间距离以及相对足印距离差异有统计学意义(P＜0.05),左后肢站立时间和前肢足印平均强度差异无统计学意义(P＞0.05).与单纯损伤组和生理盐水微球治疗组比较,Nutlin-3 a-PLGA微球治疗组伤后2周左后肢站立时间、左右前肢足印平均强度降低,正常步序比增加;伤后4周单纯损伤组、生理盐水微球治疗组和Nutlin-3a-PLGA微球治疗组两后爪脚间距离分别为3.20±0.89 cm,3.23±0.90 cm,2.29±0.36 cm,Nutlin-3a-PLGA微球治疗组与其余两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);单纯损伤组、生理盐水微球治疗组和Nutlin-3a-PLGA微球治疗组左侧相对足印距离分别为10.17±6.40 cm、9.75±6.92 cm和2.85±1.72cm,右侧分别为7.63±4.78 cm、8.21±4.82 cm和3.00±2.07 cm;Nutlin-3a-PLGA微球治疗组与其余两组比较左右两侧相对足印距离差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 Nutlin-3a-PLGA微球局部作用能促进脊髓后半损伤大鼠传导功能及运动功能的恢复,对损伤节段轴突的再生可能有促进作用.     

中国肾综合征出血热疫源地和疫区分型研究(Ⅰ)高安、广州等地HFRS病人血清分型实验

为了解不同地区肾综合征出血热 (HFRS)疫源地和疫区性质 ,应用微量细胞病变中和试验 (MCPENT)方法对收集自山东、江西、河北、北京昌平等地的 131份临床诊断的HFRS病人血清进行了特异性抗体检测 ,其中对荧光抗体滴度较高的 62例病人血清进行了分型研究。结果表明 ,北京昌平、江西高安等为家鼠型疫区 ,广州为家鼠型为主的混合型疫区。     

乙型脑炎病毒活疫苗生产株SA14-14-2的感染性克隆构建

目的　构建乙型脑炎病毒 (乙脑病毒 )活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆。方法　在对SA1 4 14 2株全长基因组测序基础上 ,引入适当酶切位点和T7RNA聚合酶启动子 ,采用分部连接策略 ,获得全长基因组cDNA ,体外转录RNA后 ,转染细胞获得感染性克隆 ,病毒传代培养、抗体中和试验和乳鼠脑腔攻击试验鉴定病毒。结果　由疫苗株cDNA构建了病毒感染性克隆 ,经鉴定为乙脑病毒 ,且病毒毒力比野毒株弱。结论　获得了乙脑病毒活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆 ,为进一步研究疫苗的减毒机理及开发新一代疫苗奠定了基础     

汉坦病毒四川分离株S85-46 的遗传学特征

目的：了解汉坦病毒四川分离株S85－46株分子流行病学特征。方法：将特异性引物从S85－46病毒感染细胞PCR扩增的产物克隆于T载体,正确的克隆纯化后测序,应用DNASTAR软件比较分析。结果：S85－46株M片段与HTN型毒株同源性为84．1％－99．7％,而与SEO型毒株同源率仅为70．4％－70．9％,表明S85－46毒株属HTN型。核苷酸同源性比较显示,S85－46与韩国分离的76－118株高度同源,而与国内一些HTN型病毒差异较大。而且同一地区的毒株也以差异很大。S片段全基因序列同源性比较也支持以上的观点。结论：不同地区汉坦病毒的流行株基因序列可以高度同源。     

运用改良的捕获ELISA法检测流行性出血热特异IgM抗体

本文建立了用于流行性出血热早期诊断的 IgM 捕获 ELISA 法,并通过用葡萄糖氧化酶和葡萄糖代替 H_2O_2,改良了底物反应,提高了反应的敏感性和特异性。用该方法检测临床出血热病人血清,其双份血清 IgM 检出率可达100％,发病3日内和4～10病日的单份血清检测也具有高敏感性。同时对大量正常人血清及其他病人血清的检测未发现交叉反应,说明该方法的高特异性。由于底物系统的改良,使其具有显色明显的特点,适应干无酶标仪地区用目测法诊断。     

流行性出血热灭活疫苗1009人接种的反应观察

流行性出血热(EHF)野鼠型灭活疫苗,在10人和75人接种的基础上,1991年又接种了1009人,以进一步观察其安全性和免疫反应,同时也希望能获得预防效果的资料。 一、疫苗:     

西双版纳地区登革热病原学和血清学的研究

我省西双版纳地区,与缅甸、老挝接壤,国境线长达900多公里,边民来往频繁,大部分地区同属热带和亚热带气候,具有本病的流行条件。为了搞好监测,于1981年7-9月和1982年8-9月,在西双版纳地区采集蚊虫和健康人群血清分别进行病毒分离和血清学研究,结果报告如下。材料和方法一、标本采集 1.蚊虫标本:野外蚊虫,采用人工诱蚊法在西双版纳的景洪、勐腊和勐海三县居     

垂直注射法对皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子患者疼痛的影响

目的：观察垂直注射法减轻皮下注射重组粒细胞集落刺激因子疼痛的效果。方法：选取2017年8月至2018年2月初次进行皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子的住院患者,共180例,采取自身对照法,在同一个研究对象上采用两种不同注射方法行皮下注射。注射后采用数字评分法(Numeric Rating Scale,NRS)评价患者的疼痛程度。结果：斜刺注射法的疼痛得分为（3.37±1.82）分,垂直注射法的疼痛得分为（2.51±1.25）分,两种注射方法疼痛分值比较有统计学意义（P<0.05）。结论：垂直注射法能减轻患者皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子的疼痛。     

登革4型病毒Ban18-30减毒株的生物学特性研究

目的将登革4型病毒(DEN_4)Ban18原株及其减毒株Ban18_30株在vero细胞传代后进行生物学特性比较研究,以了解Ban18_30株的毒力和免疫原性及其是否为一株有希望的DEN_4减毒活疫苗候选株。方法Ban18原株及在原代地鼠肾细胞传代减毒的Ban18_30株在vero细胞中增殖,将两毒株进行中和实验,确证两株的型别,研究传代毒株的病毒滴度、毒力和免疫原性。结果两株病毒与抗DEN_4特异性抗体进行中和实验,中和指数≥316,证明两株病毒确为DEN_4;空斑滴定两株病毒,滴度约为2×106~2.5×106PFU/ml;Ban18_30株对乳鼠的脑内毒力较Ban18原株低,≥1.7logLD50;Ban18_30株对幼鼠脑内接种不致病,而原株的logLD50值为4.3;腹腔免疫小鼠后用原株进行脑内攻击,能够抵抗大于1 000 LD50致死剂量的病毒攻击。结论两株病毒在vero细胞内增殖良好,滴度较高,Ban18_30对乳鼠和幼鼠的致病力明显减弱,在减毒的过程中仍保留了较高的免疫原性,有望成为一株DEN_4的减毒活疫苗候选株。     

SARS-CoV蚀斑形成技术的建立

自2002年11月我国出现第一例传染性非典型肺炎(SARS)病例以来，至2003年8月已造成5000多例临床病例，其中死亡300多例，对我国国民经济和社会稳定造成了巨大影响。现在已确定了SARS-冠状病毒(SARS-CoV)为其病原体，也成功分离到多株SARS-CoV，并能在Veto细胞和2BS等细胞系中培养增殖，这为我们研发疫苗和研究病原学等方面提供了基础和基本条件。由于蚀斑试验和蚀斑减少中和试验用于测定病毒滴度和中和抗体效价的检测较其他方法准确，且特异性高，因此，用蚀斑方法可以准确测定病毒滴度、SARS患者恢复期抗体水平、疫苗免疫后的抗体产生水平以及评价疫苗的质量和有效性、抗病毒药物的筛选等。