Oxidative modification of high density lipoprotein induced by cultured human arterial smooth muscle cells

Objective: To observe the oxidative modification of high density lipoprotein (HDL) induced by culturedhuman arterial smooth muscle cells (SMCs). Methods: HDL cocultured with SMCs at 37℃ in 48 h was subjected,and native HDL (N-HDL) served as control. Oxidative modification of HDL was identified by using agarose gel electro-phoresis. Absorbances of conjugated diene (CD) and lipid hydroperoxide (LOOH) were measured with ultravioletspectrophotometry at 234 and 560 nm respectively, and fluorescence intensity of thiobarbuturic acid reaction substance     

一种简单、高效的小分子量DNA沉淀法

沉淀是浓缩核酸最常用的方法。通过核酸沉淀可以改变核酸的溶解缓冲液 ,重新调节核酸在溶液中的浓度 ,还可以去除溶液中某些盐离子与杂质 ,达到纯化核酸的目的[1] 。　　大分子量核酸样品的沉淀方法很多 ,操作简单、效果比较好。而小分子量ＤＮＡ(特别 <5 0ｂｐ的寡聚核苷酸 )的沉淀方法往往依赖于高速或超速冷冻离心机 ,且操作步骤繁锁 ,一般实验室难以满足实验条件[2 ] 。本文介绍一种简单、有效的小分子量ＤＮＡ沉淀方法 ＺｎＣｌ2 沉淀法 ,具体操作步骤如下 :①准确测量ＤＮＡ样品的体积 ;②加入 0 .0 5倍ＤＮＡ样品体积的 1ｍｏｌ/Ｌ…     

固化瘤苗类PHA与类IL-2作用的发现

关于肿瘤是否存在特异性抗原(TSA)的探索近100年。究其主要原因与人类癌细胞的特异性弱抗原和多克隆性相关抗原混合粗制瘤苗产生的“免疫二重性”使临床应用陷入疑惑而被废用。固化瘤苗的基础研究，得到国内外有关学术界承认后，由研究所 提供首创性研究实现了固化瘤苗(STV)的精制。该肿瘤固化免疫因子     

白细胞介素-3的分子生物学研究进展

白细胞介素-3(interleukin-3,IL-3),又称多系集落刺激因子(multi-colony stimulation factor,multi-CSF),它主要由激活的T淋巴细胞所产生。虽然鼠IL-3基因在所有造血因子中最先被克隆出来,但由于人IL-3与鼠IL-3的cDNA同源性极低,直到1986年才分离到人IL-3的基因。在此以前,人们一直认为随着物种的进化,人IL-3的基因被丢失,IL-3的功能被其它细胞因子所代替。近年来,随着分子克隆等技术的厂泛应用,人们对IL-3基因的结构与定位以及IL-3的生物学效应功能作了比较深入的研究,本文就这些方面的有关进展作一综述。     

新形势下预防医学专业研究生培养模式研究

频发的公共突发事件对疾病预防与控制部门的公共卫生事件应对能力提出了新的要求。新形势下,应对能力的提高和当前预防医学研究生教育质量密不可分,这不仅是我国当前国情的现实需求,更是预防医学发展的战略要求。结合当前疾病预防工作中的现状,通过对预防医学研究生培养状况的分析,提出了对提高预防医学研究生培养模式优化的几点思考。     

缺锌幼鼠血清过氧化脂质浓度的改变

锌是必需微量元素之一,缺锌可引起多方面的生化紊乱和病理改变。为探讨缺锌与脂质过氧化之间的关系和血清水溶性过氧化脂质(即水溶性荧光物质,WSFS)作为脂质过氧化参数的意义,本文以大鼠为对象观察缺锌后血清WSFS和LPO(脂溶性过氧化脂质)水平的变化。 1 材料与方法     

放烧复合伤后白细胞介素-3基因的表达

为了进一步探讨放射损伤和放烧复合伤引起造血功能障碍的机理，研究了作为造血调控的重要细胞因子——白细胞介素－３（ＩＬ－３）基因在放射损伤、烧伤、放烧复合伤后不同时相点基因表达的变化。方法ｍＲＮＡ抽提、分子杂交、细胞培养、ＩＬ－３生物活性测定、３Ｈ－ＴｄＲ参与实验等生物技术方法。结果放射损伤后ＩＬ－３基因的表达受到明显抑制，照射后第３，１４天表达的ＩＬ－３ｍＲＮＡ减少了７７％，２１％；ＩＬ－３蛋白减少了８３％，３６％。烧伤对ＩＬ－３基因表达的影响呈双相性，烧伤后第３天ＩＬ－３表达受到抑制；烧伤后第１４天ＩＬ－３的表达增强；放烧复合伤后ＩＬ－３的表达受到抑制，其抑制程度介于放射损伤与烧伤之间，各观察组ＩＬ－３基因表达的变化与骨髓有核细胞数的变化呈平行关系。结论放射损伤、放烧复合伤后ＩＬ－３基因表达被抑制可能是急性放射病引起造血功能障碍的原因之一。     

胆固醇转运相关基因NPC1、NPC2调节造血前体细胞的增殖和分化

目的 采用NPC1、NPC2基因敲低的造血前体细胞(erythroid myeloid lymphoid,EML)作为模型,探讨NPC1、NPC2对EML细胞增殖、分化的影响.方法 通过NPC1 shRNA、NPC2 shRNA重组慢病毒感染EML细胞获得NPC1、NPC2基因有效沉默的EML细胞模型.利用该模型以Filipin染色检测NPC1、NPC2基因敲低后对EML细胞内胆固醇分布的影响,采用CCK-8和台盼蓝染色检测细胞增殖,采用流式细胞仪检测NPC1、NPC2基因沉默后EML细胞干性标志物CD34、sca-1、c-kit及TER-119、CD11b、B220的变化,采用Western blot检测造血干细胞因子(stem cell factor,SCF)刺激细胞后c-kit磷酸化的改变.结果 成功构建NPC1、NPC2基因沉默的EML细胞模型,NPC1、NPC2基因在mRNA和蛋白表达均显著降低(P＜0.01).NPC1、NPC2敲低的EML细胞中出现胆固醇蓄积,且在NPC1敲低的EML细胞模型中胆固醇蓄积更显著.沉默NPC1、NPC2基因后使得EML细胞增殖减慢(P＜0.01),并且能够降低EML细胞CD34、sca-1和TER-119、B220的阳性率(P＜0.01).经SCF刺激后NPC1基因沉默的EML细胞中c-kit的磷酸化降低显著(P＜0.01),但在NPC2基因沉默的EML细胞中c-kit磷酸化的改变差异无统计学意义.结论 胆固醇转运相关基因NPC1通过调节细胞胆固醇流动参与了EML细胞的增殖和分化调控.     

038 骨骼肌疾病患者心肌肌钙蛋白T异构体的RNA表达

血液中心肌肌钙蛋白Ｔ(ｃＴＮＴ)和肌钙蛋白Ｉ(ｃＴＮＩ)的检测是急性心肌损伤的特异性指标。进一步研究表明不稳定性心绞痛血清ｃＴＮＴ和ｃＴＮＩ也增高 ,无冠心病史的慢性血透病人ｃＴＮＴ和ｃＴＮＩ也超过正常范围。在作者以前的研究中 ,无心梗事件的终末期肾病 (ＥＳＲＤ)和杜氏肌营养不良 (ＤＭＤ)病人中血清ｃＴＮＴ和ｃＴＮＩ也增高。ｃＴＮＴ和ｃＴＮＩ的氨基酸序列与骨骼肌的肌钙蛋白不同。ｃＴ ＮＴ在机体发育的不同时期可出现四种异构体 ,而ｃＴＮＩ只存在一种形式 ,且不在骨骼肌中表达 ,免疫化学和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实…