抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的 制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法 利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs, Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果 获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1～5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×104以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。     

硝黄煎剂熏洗对混合痔术后并发症的干预作用

目的:观察硝黄煎剂熏洗对混合痔术后并发症的干预作用,为临床治疗混合痔术后并发症提供参考。方法:将240例混合痔术后并发症患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组各120例,治疗组从术后第2天开始采用硝黄煎剂熏洗,对照组同时间开始采用痔疾洗液熏洗,两组均每天熏洗2次,共熏洗12 d。比较两组患者术后第1、3、7、12天及创面愈合时肛缘水肿评分、肛门坠胀疼痛程度、便血评分、创面渗出评分,治疗前及治疗后1个月生活质量评分,以及住院时间、住院费用,并于治疗结束时评价两组临床疗效。结果:两组肛缘水肿评分、肛门坠胀疼痛程度、便血症状评分、创面渗出评分均随手术时间的延长有显著改善(P<0.001)。术后第3、7、12天及创面愈合时,治疗组肛缘水肿评分、肛门坠胀疼痛程度改善优于对照组(P<0.05);术后第3、7、12天,治疗组便血评分、创面渗出评分优于对照组(P<0.05);术后1个月,两组患者生活质量评分较治疗前均明显提高(P<0.001),且治疗组患者生活质量评分高于对照组(P<0.001);治疗组住院时间短于对照组(P<0.001),住院费用低于对照组(P<0.001);治疗结束时,治疗组疗效高于对照组(P<0.001)。结论:硝黄煎剂熏洗治疗混合痔术后并发症在缓解肛缘水肿、肛门坠胀疼痛、便血、创面渗出及改善患者生活质量方面优于痔疾洗液,且硝黄煎剂熏洗治疗可缩短住院时间,费用低廉。     

外泌体介导的细胞间通讯在炎症性肠病中作用的研究进展

炎症性肠病(IBD)是一种慢性非特异性免疫的肠道疾病,具有家族聚集性,可发生在任何年龄。外泌体(Exosomes)是细胞分泌/衍生的囊泡状纳米颗粒,其介导了一种新型的细胞间通讯方式,在IBD的发生和过程中发挥着重要作用。细胞分泌型mRNA和microRNAs(miRNAs)可随着外泌体在细胞间进行功能转移,并被送入受体细胞作为内源性miRNAs发挥作用,同时调节多个目标基因或信号。越来越多的证据表明,外泌体等外囊泡介导的细胞间通讯以及肠道微生物群—宿主细胞通讯参与了IBD发生、发展相关的病理状况。在这篇文章中,我们将回顾外泌体在细胞间通讯的方式作用,并详细讨论外泌体在IBD的发病机制、病情进展、治疗诊断中的作用以及其临床应用前景。     

加替沙星和司帕沙星的光动力抗菌研究

目的 喹诺酮作为抗菌药物在临床上具有一定的光敏毒副作用,那么喹诺酮化合物是否可以作为光敏抗菌药物应用呢？ 基于上述目的我们研究了加替沙星 (GFLX)、司帕沙星 (SPFX) 的光动力抗菌活性。方法 本文报道了 GFLX、SPFX 在 650、450 和 365nm 及白光不同光照波长及激光能量密度与暗反应条件下对耐药菌株金黄色葡萄球菌 (MRSA)、铜绿假单胞菌 (P. aeruginosa)、大 肠埃希菌 (E. coli) 的抗菌活性。结果 GFLX、SPFX 对 MRSA、P. aeruginosa、E. coli 暗毒性最低抑菌浓度 (MIC) ≤ 2.5μg/mL; 最低杀菌浓度 (MBC) ≤ 20μg/mL。GFLX 在 450nm 光照条件下对 MRSA、P. aeruginosa、E. coli 的 MIC 分别为 0.15、0.31 和 0.07μg/ mL;MBC 分别为 0.62、1.25 和 0.15μg/mL。相应的 SPFX 在 650nm 光照条件下抗菌活性分别为 0.31、0.31 和 0.07μg/mL;MBC 分 别为 20、5 和 0.15μg/mL。进一步研究表明 GFLX、SPFX 光动力灭菌活性及细胞毒性具有光波长及能量依赖性。结论 光照可以 一定程度上增加 GFLX 和 SPFX 的抗菌活性,但提升能力有限,在此区间其光敏毒副作用有限,这类药物不会伤及细胞,因而喹 诺酮类药物在临床上不足以作为光敏抗菌药物使用,相对安全。     

胃二方加减治疗胃癌前病变30例临床研究

本研究旨在探索胃二方加减治疗胃癌前病变(GPL)的临床疗效。选用90例GPL病例,治疗组30例,以胃二方加减治疗;对照组Ⅰ30例,用胃复春治疗;对照组Ⅱ30例,用胶体次枸橼酸铋治疗。结果:治疗组临床症状总有效率为96.67％,较对照组Ⅰ的60.00％有显著性差异(P<0.05)。胃镜病理疗效3组无统计学差异(P>0.05),但其中对异型增生(DYS)的疗效治疗组明显优于两对照组。     

陆金根教授诊治肛肠外科疾病的学术思想初探

陆金根教授在肛肠外科疾病的诊疗中,提倡局部整体观,既强调把局部作为一个整体来认识,又强调局部的问题要从整体的观念来分析;同时他对"瘿痈"、"肛疽"等疾病的命名,以及便秘的论治均有自己独特的见解;对肛肠病内外之治,主张择机而施,临证施治务要摆正"手术"与"药"的位置,"谨守病机,各司其属"。     

植物外泌体样纳米囊泡的研究进展

植物外泌体样纳米囊泡(plantexocrine-likenano-vesicles,PELNs)是一种新兴的纳米治疗剂及传递平台,不但具有疾病治疗潜力,而且可以作为药物的载体靶向疾病位点,起到治疗递送双重作用,更重要的是PELNs具有绿色天然和低免疫原性等特点。本综述系统介绍了PELNs的外囊阳性细胞器、多囊泡体、液泡和自噬小体几种分泌机制;脂质、蛋白质和核酸3种组成成分;离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、流场-流分馏法、免疫磁珠法、聚合物沉淀法等分离方法及其抗炎、抗肿瘤、保护再生、抗病毒、保肝等生物学功能,整理了PELNs作为治疗剂及分子传递平台目前已发现的潜在机制,提出了PELNs研究过程中存在的产量化、机制研究及临床试验少等问题,并展望了其未来的发展潜力。     

通督化瘀灸促进混合痔术后愈合30例临床研究

目的:观察通督化瘀灸促进混合痔术后愈合的临床疗效.方法:将混合痔外剥内扎术术后60例患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组采用通督化瘀灸治疗,对照组采用微波照射治疗,比较2组术后恢复情况.结果:治疗组与对照组术后第3天疼痛、水肿、出血、肛门坠胀积分,术后1周疼痛、水肿、肛门坠胀积分,术后3月随访皮赘残留比较,差异均...     

溃疡性结肠炎的中西医治疗进展

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因尚不十分清楚的直肠和结肠慢性非特异性炎症性肠病.病变主要限于大肠黏膜与黏膜下层;范围多累及远段结肠,病变可逆行向近段发展,甚至累及全结肠及末端回肠.临床表现为:腹泻、黏液脓血便、腹痛.病情轻重不等,多呈反复发作的慢性病程[1].由于UC的病因病机相对复杂,一直是临床治疗上的难题.近年来,中医、西医及中西医结合的方法,在治疗UC方面取得了较大进展,尤其中医药治疗UC已得到广泛认同,现结合有关文献,将其综述如下.     

人参Cu/Zn SOD原核可溶性表达条件的优化

目的在大肠杆菌中高效表达可溶性人参SOD,纯化后检测其活性。方法人参SOD cDNA插入到原核表达载体pET30α中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达。分别对诱导时间、诱导温度、IPTG浓度以及离子浓度进行条件优化。对表达产物进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和考马斯亮蓝染色检测。检测上清中蛋白的抗氧化活性。结果双酶切结果显示质粒构建成功,经过条件优化,表达的SOD蛋白主要存在于破碎菌体的上清中,表达量约占菌体上清总蛋白的50%,上清酶活达到363.9 U/mg。结论成功在大肠杆菌中高效表达了可溶性人参SOD蛋白,且具有较高的酶活性,为其工业化生产和应用奠定了基础。