黄芪多糖对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究

目的 研究黄芪多糖对体外培养大鼠原代成骨细胞增殖、分化及矿化的影响及其作用机制。方法 体外培养的新生SD大鼠颅骨原代成骨细胞体系中分别加入不同质量浓度（0.1、0.3、1、3、10、30、100 μg/mL）的黄芪多糖,24、48 h后MTT法检测细胞增殖,碱性磷酸酶（AKP）活性检测法检测细胞分化,茜素红染色法观察黄芪多糖10 μg/mL对细胞矿化的影响,Western blotting法检测黄芪多糖1、10 μg/mL作用于细胞24 h后,对细胞中骨形成蛋白（BMP-2）的表达、MAPK信号通路中关键蛋白ERK、P38、p-ERK、p-P38等表达的影响。结果 黄芪多糖能剂量相关地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调BMP-2、p-ERK、p-P38蛋白的表达,提高p-ERK/ERK、p-P38/P38值。结论 黄芪多糖可通过促进BMP-2的表达、上调其下游的ERK MAPK和P38 MAPK的磷酸化水平来促进成骨细胞增殖、分化。     

无创尾吊大鼠心血管功能监测新方法

目的：运用植入式遥测系统建立一种在体的实时监测无创尾部悬吊大鼠心血管生理参数模型.方法：将SD雄性大鼠随机分为对照组,尾吊组,每组5只.手术植入遥测子后记录尾吊前后各组大鼠血压（BP）、心率（HR）、心电图（ECG）变化.结果：所有大鼠在手术14d后完全恢复,体质量显著增加;尾吊组大鼠在尾吊0～5min时BP,HR值逐渐上升,随后逐渐下降,5.5h后维持稳定.其中BP值高于尾吊前及对照组,HR未出现类似状况.RR间期在尾吊0～5min下降,之后逐渐升高至尾吊前水平,对照组大鼠各项参数值无显著变化.结论：植入式遥测系统适用于监测尾吊大鼠心血管生理参数变化,为进一步研究失重引起的心血管功能变化提供了可靠的技术方法和实验依据.     

尾吊对大鼠海马组织学习记忆及凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究尾吊模拟失重效应对大鼠海马神经元形态数目和学习记忆相关分子NMDAR2A,BDNF及促凋亡相关分子Bax,Caspase-3表达的影响,探讨模拟失重所致大鼠学习记忆能力下降的机制。方法24只8周龄SD大鼠随机分为对照组及模拟失重组,每组12只,采用30°尾吊方法模拟失重效应。采用HE及尼氏染色观察模拟失重效应对海马神经元数目形态的影响;采用Western blot检测模拟微重力效应对NMDAR2A,BDNF,Bax,Caspase-3蛋白表达的影响。结果 HE染色及尼氏染色结果发现,尾吊大鼠海马组织神经元数目显著低于对照组,同时其形态也发生了一定的改变。Western blot实验结果显示,与对照组相比,尾吊大鼠海马组织NMDAR2A、BDNF蛋白表达水平显著降低,Bax,Caspase-3蛋白表达水平显著提高。结论尾吊模拟失重效应可影响大鼠海马神经元形态与数目,下调学习记忆相关分子表达,上调促凋亡相关分子表达。     

Hailey-Hailey病四个家系的ATP2C1基因突变分析

目的检测Hailey-Hailey病(HHD)4个家系的致病基因ATP2C1,鉴定其突变位点和突变类型。方法采集4个HHD家系成员共9例患者和6名正常人,与100名无关健康对照者外周静脉血各2 ml,提取全基因组DNA。运用聚合酶链反应(PCR)扩增ATP2C1基因的全部28个外显子及其侧翼内含子序列,扩增产物纯化后进行DNA直接测序,BLAST比对分析其突变位点和突变方式。结果在9例HHD患者中共检出了3个ATP2C1基因致病突变:c.888_889ins T(p.296Tfs X2)、c.1330del C(p.443Qfs X33)和c.2416CT(p.Arg806X)。在4个HHD家系的6名正常者和100名健康对照者中均未发现上述突变。结论在9个HHD家系患者中存在2个移码突变(c.888_889ins T和c.1330del C)及1个无义突变(c.2416CT),其中2个移码突变为首次报道。这些突变的发现有助于HHD的诊断,并丰富了HHD相关ATP2C1突变数据库。     

氯化锂对尾吊大鼠骨丢失的防护作用

目的 研究GSK3特异性抑制剂氯化锂(lithium chloride,LiCl)对尾吊大鼠骨密度的影响.方法 SD雄性大鼠18只,分为3组:正常对照组(Control)、尾吊对照组、尾吊LiCl组,每组6只.尾吊LiCl组大鼠每日灌胃给予LiCl 20 mg/(kg·d).分别于第1天和第15天使用双能X线骨密度测量仪测定大鼠左股骨骨密度(bone mineral density,BMD);第15天处死大鼠取左胫骨近心端进行组织包埋切片,HE染色,进行骨组织计量学测量,包括骨小梁面积百分率 (Tb.Ar%)、骨小梁数量 (Tb.N)、骨小梁平均厚度(Tb.Th);对大鼠右股骨进行三点弯曲实验,测量骨力学指标.采用Western blot观察骨组织中β-catenin蛋白的表达.结果 实验结束后,尾吊对照组和尾吊LiCl组大鼠BMD均低于正常对照组(P<0.05),而尾吊对照组大鼠BMD明显低于尾吊LiCl组(P<0.01);骨组织计量学结果,尾吊对照组大鼠骨小梁平均厚度低于正常对照组(P<0.05),骨小梁面积百分率、骨小梁数量明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠三项参数均高于尾吊对照组(P<0.05);骨力学测试结果,尾吊对照组大鼠股骨弹性模量低于正常对照组(P<0.05),刚性系数明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠股骨弹性模量高于尾吊对照组(P<0.05),刚性系数明显高于尾吊对照组(P<0.01).Western blot结果显示,尾吊对照组β-catenin蛋白表达量明显低于正常对照组,而尾吊LiCl组β-catenin 蛋白表达量明显高于尾吊对照组.结论 尾部悬吊能够造成大鼠废用性骨丢失,而LiCl能有效地预防尾吊所导致的骨质疏松.     

氯化锂对去卵巢大鼠骨密度的影响研究

目的观察GSK3特异性抑制剂氯化锂(LiCl)对去卵巢(OVX)大鼠骨密度的影响并探讨其作用机制。方法24只雌性SD大鼠,随机均分为3组:假手术(Sham)组、OVX组和LiCl组。Sham组仅切除一段肠系膜,OVX组和LiCl组行双侧卵巢摘除,LiCl组给予LiCl溶液140mg/(kg.d)灌胃,Sham组与OVX组均用生理盐水(1ml/d)灌胃,持续10周。每周称量大鼠体重,10周后观测各组大鼠骨密度、子宫重量及子宫内膜的改变;采用免疫组化和Westernblotting观察骨组织形态学改变和β-catenin蛋白的表达。结果10周后,与OVX组比较,LiCl组大鼠体重增幅小而骨密度有所增加,子宫内膜未出现萎缩性改变,骨小梁形态结构基本完整,骨小梁形态结构破坏少。与Sham组比较,OVX组成骨细胞β-catenin蛋白表达降低,而LiCl组表达明显升高。结论LiCl可使OVX大鼠的骨密度增加,可抑制由雌激素缺乏引起的子宫萎缩,从而有效预防雌激素缺乏导致的骨质疏松。     

染料木素促成骨样细胞增殖作用及其机制研究

目的观察染料木素(genistein)对成骨样细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨形成蛋白-2(BMP-2)、β-连环素(β-catenin)表达的影响。方法培养成骨样细胞MC3T3-E1,加入不同浓度的染料木素(1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6和1×10-5mol·L-1),以1×10-9mol·L-1雌激素(β-estradiol,E2)作为阳性对照组,采用MTT比色试验法和碱性磷酸酶(ALP)活性检测法,观察染料木素作用后MC3T3-E1的增殖及分化情况,以Westernblot方法检测成骨样细胞中BMP-2和β-catenin蛋白的表达。结果染料木素可促进MC3T3-E1细胞增殖,染料木素作用后细胞的ALP值也明显升高,呈浓度依赖性;染料木素可增加BMP-2和β-catenin表达,且呈浓度依赖性。结论染料木素促进MC3T3-E1细胞增殖与分化,可通过调节BMP-2和Wnt/β-catenin信号通路而影响成骨样细胞的活性。     

398例白癜风首诊患者心理状态的现况分析

目的了解首次确诊的白癜风患者心理状态,正确理解精神因素在白癜风发病中的可能作用。方法采用自制白癜风信息调查问卷收集研究对象的相关信息,根据患者年龄差异而分别选用不同的最适心理测评问卷进行调查。结果参与调查患者496例,实际完成调查者398例,其中存在不同程度的行为-心理障碍者共210例,阳性率为52.8%;其中≤6岁组26例患儿中有24例存在不同程度的异常,阳性率为92.3%;6~14岁组99例患者中存在不同程度的异常者42例,占42.4%;在14~18岁组52例患者中不同程度的心理障碍者33例,占63.5%;在18岁组221例患者中存在不同程度的心理障碍者111例,占50.2%;不同分型白癜风患者间存在心理障碍的分布差异有统计学意义(P0.05);节段型白癜风患者与其他分型患者间出现心理障碍的分布差异有统计学意义(P0.05)。结论不同年龄段的白癜风患者存在不同程度的心理障碍;节段型白癜风患者较其他分型患者更易出现心理障碍,且本研究≤6岁白癜风患儿中常见行为-心理障碍,二者强烈佐证了神经精神因素在白癜风发病中具有重要作用,提示在临床工作中应根据其不同特点而予以适当的心理辅导,将有利于疾病的康复。     

黄芪多糖对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究

目的研究黄芪多糖对体外培养大鼠原代成骨细胞增殖、分化及矿化的影响及其作用机制。方法体外培养的新生SD大鼠颅骨原代成骨细胞体系中分别加入不同质量浓度(0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/mL)的黄芪多糖,24、48 h后MTT法检测细胞增殖,碱性磷酸酶(AKP)活性检测法检测细胞分化,茜素红染色法观察黄芪多糖10μg/mL对细胞矿化的影响,Western blotting法检测黄芪多糖1、10μg/mL作用于细胞24 h后,对细胞中骨形成蛋白(BMP-2)的表达、MAPK信号通路中关键蛋白ERK、P38、p-ERK、p-P38等表达的影响。结果黄芪多糖能剂量相关地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调BMP-2、p-ERK、p-P38蛋白的表达,提高p-ERK/ERK、p-P38/P38值。结论黄芪多糖可通过促进BMP-2的表达、上调其下游的ERK MAPK和P38 MAPK的磷酸化水平来促进成骨细胞增殖、分化。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗增殖性红斑一例

<正>临床资料患者,男,45岁。主因龟头红斑、肿块、溃疡、结痂伴轻微疼痛感4年余,于2014年5月就诊。患者4年前龟头出现直径约1 cm的红斑,渐出现糜烂、结痂,伴轻微疼痛。曾于外院诊治,具体诊疗经过不详,病情未见好转。皮损渐扩大,且局部隆起形成肿块,2个月前皮损中央出现溃疡、结痂。患者既往体健,否认有特殊疾病史及冶游史,家族成员无类似疾病史,无包皮过长史。体格检查:系统体检未见明显