环氧合酶-2反义核酸对膀胱癌细胞恶性表型的抑制作用

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)反义核酸对膀胱癌细胞恶性表型的抑制作用。方法采用脂质体介导方法,分别构建转染COX-2反义真核表达载体和空载体的膀胱癌细胞系5637-AS细胞和5637-P细胞,RT-PCR及W estern b lot分析转染细胞COX-2 mRNA及蛋白表达水平。MTT比色实验、Boyden侵袭小室法和裸鼠成瘤实验分别检测转染细胞体外增殖速度、体外侵袭力和体内成瘤性。结果RT-PCR结果显示,5637-AS细胞COX-2/磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA比值(0.65)明显低于5637(0.92)和5637-P细胞(0.90);W estern b lot提示5637-AS细胞COX-2/β-actin比值(0.29)明显低于5637细胞(0.46)和5637-P细胞(0.44)。MTT比色实验显示5637-AS细胞较5637-P、5637细胞生长速度减慢,三者倍增时间分别为3.6 d、2.9 d和2.9 d。体外侵袭实验结果表明,5637-AS侵袭细胞数显著低于5637细胞及5637-P细胞(18.20±5.97比45.40±8.12,18.20±5.97比44.10±6.47,P<0.01)。裸鼠成瘤实验中,5637-P、5637细胞接种裸鼠后第5天肿瘤长出,而5637-AS细胞第7天肿瘤长出;30 d后5637-AS细胞接种组瘤体重量(392.15 mg±33.58 mg)明显小于5637细胞(738.26 mg±66.32 mg),和5637-P细胞接种组(698.53 mg±88.76 mg),P<0.01。结论膀胱癌细胞中COX-2过表达与细胞的恶性表型相关,反义技术抑制COX-2表达可以逆转膀胱癌细胞的恶性表型。     

膀胱癌组织中凋亡相关基因fas及fas-L的表达及相互关系

目的 研究凋亡相关基因ｆａｓ及ｆａｓ－Ｌ在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）组织的中表达,探讨其与ＴＣＣ生物学行为的关系及在ＴＣＣ发生,发展中相互作用。方法 采用Ｓ－Ｐ免疫组化法检测５６例ＴＣＣ及１０例正常膀胱组织Ｆａｓ及Ｆａｓ－Ｌ的表达,并与ＴＣＣ病理分级、临床分期及随访结果相比较,结果 Ｆａｓ及Ｆａｓ－Ｌ在ＴＣＣ中阳性表达率分别 为．１％及５７．１％,与在正常膀胱组织表达率８０．０％及０％相比,有显性     

儿童嗜铬细胞瘤

目的 :探讨儿童嗜铬细胞瘤的临床表现及诊断和治疗特点。方法 :对 11例 4～ 14岁嗜铬细胞瘤患儿的临床表现、治疗方案及病理特征等进行回顾性分析。结果 :11例患儿中 ,单发肿瘤 9例 ,其中异位 2例 ,多发 2例。 10例有明确的高血压病史 ,其中 7例伴有高血压心脏改变 ,2例伴有高血压眼底改变。 3例病史中出现过 1次或数次的休克表现 ,1例因血压骤升出现脑血管意外。全部病例均手术摘除瘤体 ,术后均病理证实为嗜铬细胞瘤。结论 :儿童嗜铬细胞瘤高血压症状较重 ,常伴有心脏及眼底改变 ,并且血压波动幅度大 ,发作较频繁。治疗的关键在于术前降低血压并充分扩容 ,治疗心脏损害 ,改善心脏功能。同时 ,术中维持血压平稳和减少术中出血是手术成功的关键     

新西兰兔骨髓基质细胞构建组织工程膀胱的实验研究

目的：研究骨髓基质细胞(MSCs)在兔组织工程膀胱中的应用．方法：按献改进方法制作膀胱无细胞基质(BAMG)，从兔胫骨中分离出MSCs，体外扩增后接种于BAMG外表面，在低糖DMEM(LG—DMEM)培养12h，与BAMG复合成组织工程膀胱，对同一兔实施膀胱次全切术，用组织工程膀胱替代．20只兔实施了保留三角区的膀胱次全切术．实验随机分为3组．A组6只直接缝闭三角区；B组7只用膀胱形状的BAMG进行重建；C组7只用复合自体MSCs的组织工程膀胱进行替代手术．术前术后分别记录膀胱测压和放射线造影资料．12wk时无痛处死动物，进行大体解剖和组织染色分析．结果：体外扩增时间平均为21d．A，B和C组膀胱容积分别为术前的22％，85％和95％，顺应性分别为术前的11％，104％和107％．大体解剖显示A组仅有很小的储水能力，而B，C组具有正常膀胱形态，组织染色分析A，B组显示上皮层正常，粘膜下纤维组织增生而肌层较薄；C组则显示了与自体膀胱相似的正常的3层组织结构．结论：膀胱次全切除后原位缝合膀胱容积和顺应性均不能恢复，单纯应用BAMG膀胱容积和顺应性能够恢复正常，但逼尿肌层较薄，应用BAMG复合自体ASCs或MSCs的组织工程膀胱替代，术后12wk膀胱容积和顺应性能够恢复正常，膀胱壁组织结构与正常膀胱相似．提示膀胱次全切除后应用BAMG复合自体MSCs的组织工程膀胱替代可以获得良好功能和组织结构．     

基因p21, p53在前列腺癌中的表达及相互关系

０　引言　ＣＤＫ抑制剂（ｃｙｃｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＣＤＫＩ）,是细胞周期负调节因子,被认为具有抑癌基因活性．ｐ２１基因是１９９３年发现的第一个ＣＤＫＩ基因［１］,其主要作用为：抑制ＣＤＫ２,４,６等活性,推测其在细胞周期的多个环节上普遍起作用;是含增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）在内的ｃｙｃｌｉｎＤ－ＣＤＫ四聚体中的一员［２］,能够直接结合和抑制ＰＣＮＡ,而抑制ＤＮＡ的复制．ｐ５３基因通过结合ｐ２１基…     

Caspase—6诱导肾癌细胞株GRC—1细胞凋亡的研究

目的 探讨Caspase-6在肾癌细胞株GRC－1中的表达及其对肾癌细胞的凋亡诱导作用。方法 应用RT－PCR方法检测了肾癌细胞株GRC－1中Caspase-6基因的表达水平；以腺病毒adv5作载体，构建了含Caspase-6基因的转基因载体，用脂质体包裹法转染GRC－1细胞株，用RT－PCR方法检测转染后GRC－1细胞中Caspase-6基因的表达。MTT法检测转染Caspase-6对GRC－1细胞株生长的影响。结果 肾癌细胞株GRC－1中未检出Caspase-6表达。RT－PCR法证实转染Caspase-6后GRC－1中Caspase-6表达明显，MTT检测显示对GRC－1细胞的生长有抑制作用，通过形态学观察及DNA电泳证实这种作用主要是通过促进细胞凋亡而实现的。结论 Caspase-6对肾癌细胞的生长有抑制作用，并可诱导肾癌细胞凋亡。     

羟基喜树碱诱导大鼠肾脏移植免疫耐受机制的探讨

目的 :以羟基喜树碱 (HCPT)和环孢素A(CsA)诱导异基因大鼠肾脏移植免疫耐受 ,并探讨免疫耐受的形成机制 .方法 :以近交系DA大鼠为供者 ,近交系Lewis大鼠为受者行同种异体原位肾脏移植 .移植后受者大鼠接受不同剂量HCPT ,CsA治疗或二者联合应用 .应用RT PCR方法检测移植物内及受者脾内细胞因子mRNA表达情况 .结果 :各组移植后存活时间显著长于对照组 .C组 (HCPT 2mg-1·kg·d-1)中 4 /10和E组 (HCPT 1 0mg·kg-1·d-1+CsA 10mg·kg-1·d-1)中 5 /10受者大鼠形成特异性免疫耐受 .耐受组IL4 ,IL10mRNA表达明显高于排斥组 ,而IL2 ,IFNγ明显低于排斥组 .受者脾内细胞因子表达量近似于移植物内 .结论 :大剂量HCPT或小剂量HCPT与CsA合用可诱导异基因大鼠肾脏移植免疫耐受 .细胞因子偏向Th2亚类是免疫耐受形成机制之一 .受者脾内细胞因子mR NA表达与移植物内表达近似     

经尿道激光治疗女性膀胱颈梗阻24例

我院自1991年3月～1996年3月应用Nd：YAG激光治疗女性膀眈颈梗阻24例，现报告如下。1临床资料1．1一般情况本组年龄22～63岁，平均42岁；均有2～18年排尿困难史，排尿时间1．5～30min。4例存在充溢性尿失禁，16例存在排尿时耻骨上区痉挛性疼痛。膀胱剩余尿量30～710ml，平均58ml。尿素氮升高6例；B超及肾盂静脉造影示双肾积水4例。均于术前行膀航镜检查，主要改变为插入膀航镜时后尿道有阻力感，膀优颈后唇明显隆起，呈门坎状，膀航内小梁小室形成。1．2手术方法黄石位，硬脊膜外胜阻滞麻醉，置入尿道膀优激光治疗镜，先用矿光导纤维分别…     

生长曲线拟合及细胞群体倍增时间的简化计算

0　引言　目前细胞群体倍增时间的计算方法有两种 ,而我们基于计数法绘制细胞生长曲线所获数据 ,利用 SPSS软件进行理论推导而得的理论倍增时间计算方法计算相对简单实用 ,现介绍如下 .1　材料和方法　指数函数拟合模型 (Exponential)中 ,Y=b0 × 2 b1 ×t要比 Y=b0 × eb1 × t更符合细胞的生物学特性 ,因为细胞增殖为二分裂生长 .Y=b0 × 2 b1 ×t在 SPSS的曲线模拟功能选项中并没有此函数拟合模型 ,故将原始数据的自变量时间变量作一转换 ,即将原自变量乘以 ln2即可 ,理论依据为Y=b0 × 2 b1 × t=b0 × eb1 × tln2 =b0 × eb1 ×…     

羟基喜树碱对异基因大鼠心脏移植物中细胞因子mRNA的影响

为探讨异基因大鼠心脏移植物内细胞因子的动态变化，并了解羟基喜树碱（HCPT）对细胞因子表达的影响。建立大鼠腹部心脏移植模型，分为同基因移植组（SD-SD）、异基因移植组（Wistar-SD)、异基因移植Wistar-SD加HCPT治疗组，移植后1、3、5、7、14天处死受者，切取脾脏及移植的心脏，应用RT-PCR法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10mRNA表达。结果显示，同基因移植组术后1天可测到细胞因子表达，表达量低，术后5天不能测到上述细胞因子表达；IL-2、IFN-γ在异基因移植组术后7天达高峰，HCPT治疗组术后3天达高峰，峰值显著低于单纯异基因移植组，IL-4、IL-10在异基因移植组术后5天达高峰，HCPT治疗组术后7天达高峰，峰值显著高于单纯异基因移植组，提示HCPT治疗可使移植物存活时间延长，IL-2、IFN-γ表达量降低、IL-4、IL-10表达量升高。