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结核分支杆菌Ag85B蛋白在大肠杆菌中的高效表达 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:通过结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的表达,获得大量纯化的重组Ag85B(rAg85B)蛋白。方法:应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37RvAg85B DNA序列;以质粒pET24b为表达载体,构建Ag85B重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3);以IPTG诱导转化子,通过SDS—PAGE电泳鉴定rAg85B的表达水平,采用Novagen公司生产的His.Bind蛋白纯化试剂盒纯化rAg85B蛋白。结果:重组质粒PET24b—Ag85B测序表明与报道的序列相同;它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%左右。纯化后的rAg85B样品经SDS—PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为95%左右,每100ml培养菌可获得10mg左右纯化的重组蛋白。结论:pET24b—Ag85B大肠杆菌工程菌株能高效表达rAg85B蛋白,大量纯化的rAg85B为其进一步的研究与应用奠定了基础。 相似文献
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四氯化碳致肝损伤对小鼠血清TNF-α IL-6的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨四氯化碳(CCl4)致肝损伤模型小鼠血清TNF-α、IL-6水平的变化与肝损伤的相关性.方法紫外分光光度法分别测定血清ALT和肝匀浆MDA含量,放免法测定血清TNF-α、IL-6水平.结果单次或多次ip四氯化碳均可复制肝损伤模型,小鼠肝指数增加,血清ALT、肝匀浆MDA水平升高(P<0.01).病理组织学检查可见显著改变,IL-6水平未见显著变化,而血清TNF-α水平差异明显.单次四氯化碳给药模型组TNF-α水平降低,多次四氯化碳给药模型组TNF-α水平升高(P<0.01).结论四氯化碳致小鼠肝损伤模型,血清TNF-α的降低和升高可能与TNF-α作用的双重性,四氯化碳的作用机制,血清生化指标与病理组织变化的时间差异性及肝损伤的严重程度有关. 相似文献
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目的: 对抗结核中药牛贝消核提取物进行血清药物化学初步研究,通过分析入血成分,探讨牛贝消核发挥药效的物质基础。方法: 2018年4月至2019年6月在中国人民解放军总医院第八医学中心全军结核病研究所制备桔梗、白及、鱼腥草和牛蒡子标准品溶液及牛贝消核供试品;55只小鼠随机分为11组,每组5只:1~5组为牛贝消核提取物组,每只小鼠每天给予 1.25mg/g牛贝消核提取物灌胃;6~10组为牛蒡苷组,每只小鼠每天给予 0.3mg/g牛蒡苷灌胃;11组为空白对照组,给予蒸馏水灌胃;连续灌胃7d。于末次给药后0.5、1、2、4、6h小鼠眼眶后静脉丛取血,制备血清供试品溶液。采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)分析各中药标准品、牛贝消核提取物供试品及各组小鼠给药后血清供试品溶液,分析色谱图中各物质保留时间;然后参照对照品初步鉴定牛贝消核提取物的入血成分。结果: 通过牛贝消核提取物和各药材标准品重叠色谱图中可以看出,牛贝消核提取物保留时间为7.1min处的色谱峰所对应的物质来源于桔梗,保留时间为13.5min、15.5min、21.2min处的色谱峰所对应的物质来源于白及,保留时间为16.3min的色谱峰所对应的物质来源于牛蒡子,并进一步鉴定为牛蒡苷化合物。牛贝消核提取物和牛蒡苷给药后血清样本与空白血清比较,均在17.5~22.5min发现有吸收峰。结论: HPLC分析可作为牛贝消核中桔梗、白及、鱼腥草和牛蒡子提取的质量控制方法,检出的牛贝消核提取物血中移行成分可能是牛蒡苷代谢产物,其余药效成分入血微量未检出。 相似文献
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混合糖电解质对全肠外营养液稳定性的考察 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:考察混合糖电解质注射液对全肠外营养液稳定性的影响。方法:将10%葡萄糖注射液和混合糖电解质注射液分别加入到配方相同的全肠外营养液中构成对照组和实验组,在不同时间取样观察两组注射液的外观变化,pH、不溶性微粒、渗透压、脂肪乳颗粒变化和电解质含量。结果:与对照组相比,实验组48 h内的外观、pH没有发生显著变化,渗透压大约增高100 mOsmoL-1。不溶性微粒数均随着时间的延长而增加,脂肪颗粒经时变化较大。结论:混合糖电解质注射液对肠外营养液的稳定性有一定程度的影响,临床使用时应严格控制其含量,且配制后尽快输注。 相似文献
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目的:调研我院不同年龄段患者的处方,探讨解决不合理用药的途径和促进合理用药的方法。方法:依据合理用药国际指标,利用自行编制的处方评价系统对我院2008年全年不同年龄患者的处方进行评价。结果:我院以18~45岁年龄段的患者为主。小于6岁、6~18岁和18~45岁患者应用抗菌药物的比例为41.24%、47.65%及42.23%;18~45岁患者注射剂使用率为21.07%;大于60岁患者的平均每张处方用药品种数为2.85种、平均每张处方金额为331.00元,都分别明显高于全年的平均值32.50%、17.78%、2.51种及244.02元;45~60岁患者的基本药物使用率最高,为58.05%;小于6岁的患者中成药使用率最高,为55.32%;通用名使用率为100%。结论:采用国际指标评价用药合理性具有可操作性和有效性。加强小于45岁和大于60岁患者用药教育及管理,有利于降低抗菌药物及注射剂的使用和平均每张处方用药品种数及金额;需加大各年龄段患者基本药物的使用。 相似文献
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