食管鳞癌中miR-122-5P的表达及其临床病理学意义

目的 探究食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达、临床病理学意义及生物学行为。方法 选取食管鳞癌患者74例,收集手术切除的食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常食管组织。采用原位杂交技术检测miR-122-5P的表达,比较食管鳞癌组织与癌旁正常食管组织miR-122-5P表达差异,分析其表达及与肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果 miR-122-5P在食管鳞癌中的阳性表达率35.1%(26/74)明显低于癌旁正常食管组织77.0%(57/74)(X²=26.363,P=0.000)。miR-122-5P与食管鳞癌的肿瘤部位、浸润深度表达差异有统计学意义(X²=16.662,P=0.000;X²=10.723,P=0.005)。食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达水平与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤直径、病理分级、脉管转移、神经转移及淋巴结转移差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-122-5P在食管鳞癌组织和癌旁组织表达不同,食管鳞癌组织中表达下调,推测其可能具有抑癌基因的功能。     

ERK1/2MAPK通路在Eca109细胞体外增殖和迁移中的作用及其机制

目的观察ERK1/2 MAPK通路在食管鳞状细胞癌(ESCC)Eca109细胞系增殖和迁移中的作用并探讨其作用机制。方法使用MAPK(ERK1/2)抑制剂U0126处理Eca109细胞;细胞计数检测细胞增殖;倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ERK1/2 mRNA;Western blot检测总ERK1/2(t-ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2);MTT和细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;qRT-PCR检测MicroRNA-21(miR-21)。结果20μmol/L浓度的U0126可抑制Eca109细胞生长(P<0.05),破坏细胞正常形态,ERK1/2 MAPK通路的活化在蛋白质水平被抑制(P<0.05),Eca109细胞增殖和迁移明显减弱(P<0.05),显著下调miR-21的表达(P<0.05)。结论ERK1/2 MAPK信号通路抑制可减弱Eca109细胞增殖和迁移,其可能的作用机制之一与其抑制miR-21表达有关。     

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性关系的研究

目的 为探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性的关系. 方法 运用病例-对照研究的方法,PCR-RFLP技术检测新疆哈萨克族食管癌51例及非癌对照109例的MGMT 84C>T和MGMT 135G>T单核苷酸多态(SNPs)的基因型. 结果 MGMT 84C>T位点的三种基因型CC,CT,TT,在哈萨克族食管癌中所占比例分别为76.5%(39/51) 、17.6%(9/51) 、5.9%(3/51),对照组分别为77.0%(84/109)、18.3%(20/109)、4.6%(5/109),两组间分布差异不显著(P=0.938,P>0.05);MGMT 135G>T位点的三种基因型GG,GT,TT,在哈萨克族食管癌中所占比例分别为90.2%(46/51)、7.8%(4/51)、2.0%(1/51),对照组分别为82.6%(90/109)、16.5%(18/109)、0.9%(1/109),两组间分布差异不显著(P=0.295,P>0.05);MGMT 84C>T位点和MGMT 135G>T位点联合分析,在食管癌组0突变等位基因与1-4突变等位基因所占比例分别为68.6%(35/51)、31.4%(16/51);对照组分别为:63.3%(69/109)、36.7%(40/109),两组间分布差异也不显著(P=0.511,P>0.05). 结论 MGMT 84C>T和MGMT 135G>T SNPs与哈萨克族食管癌易感性可能无关联.     

细胞分裂周期蛋白42mRNA和蛋白在食管鳞癌中的表达及其病理生物学意义

目的 探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理参数间的关系.方法 应用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹和免疫组织化学方法,从mRNA和蛋白两个水平检测ESCC中Cdc42的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 22对新鲜ESCC与癌旁正常组织中,Cdc42 mRNA在ESCC中的表达量(0.21±0.14)显著高于其在癌旁正常组织中(0.16±0.12)的表达(P＜0.05);Cdc42蛋白在ESCC中的表达量(0.83±0.35)高于其在癌旁正常组织中(0.75±0.24)的表达;在175对ESCC中,Cdc42蛋白的阳性表达率为73.7%(129/175),高于其在配对的癌旁正常组织中的表达62.9%(110/175,P＜0.05).此外,Cdc42的表达与ESCC患者的年龄、淋巴结转移及分化程度明显相关(P＜0.05).结论 Cdc42可能参与ESCC发生及转移的过程.

Abstract：

Objective To explore the expression of cell division cycle 42 (Cdc42) in human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and investigate the association between Cdc42 and clinicopathological parameters. Methods The expression levels of Cdc42 mRNA and protein in ESCC and corresponding adjacent normal tissues were detected by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction ( qRT-PCR), Western blotting and immunohistochemistry, respectively. The correlations between Cdc42 expression and clinicopathological parameters were analyzed. Results The expression of Cdc42 mRNA was significantly higher in ESCC tissues (0. 21 ± 0. 14 ) than that in corresponding controls (0. 16 ±0. 12) (t test,P ＜0. 05). The protein expression of Cdc42 was significantly higher in ESCC tissues (0. 83 ± 0. 35 ) than that in corresponding controls ( 0. 75 ± 0. 24). Immunohistochemistry revealed that 73.7% (129/175) of the ESCC samples had higher expression of Cdc42 protein than the corresponding controls[62. 9% (110/175) (χ2 test, P ＜ 0. 05 )]. Cdc42 expression level was correlated with age,lymphoid node metastasis and differentiation ( P all ＜ 0. 05 ), but not with the clinicopathological features,such as gender, ethnicity and macroscopical types (P ＞ 0. 05 ). Conclusion The higher expression of Cdc42 played a certain role in the carcinogenesis and metastasis of ESCC.     

新疆伊犁地区食管鳞癌与儿茶酚-O-甲基转移酶基因Val158Met多态性的关联分析

目的 探讨儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因缬氨酸(Val)158甲硫氨酸(Met)(G→A转换)多态性在新疆伊犁地区人群中的分布及与食管鳞癌(ESCC)的关系.方法 采用以医院为基础的病例对照研究方法,研究对象共622名,包括214例ESCC患者,408名年龄、性别、民族相匹配的正常对照.以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析COMT基因G/A多态性.结果 622名受试者COMT基因型频率分布依次为GG型占47.3%,GA型占42.3%,AA型占10.4%;等位基因G为68.4%,A为31.6%.食管癌组与正常对照组COMT基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义(P＞0.05).分层分析显示,年龄≤60岁的食管癌组与正常对照组之间COMT基因型(x2=6.101)和等位基因频率(x2=4.493)差异有统计学意义(P值均＜0.05);哈萨克族、维吾尔族、汉族ESCC组间等位基因频率比较差异有统计学意义(x2=6.671,P＜0.05);三个民族正常对照组间COMT基因型(x2=13.567)及等位基因频率(x2=11.321)分布比较差异均有统计学意义(P值均＜0.05).将年龄及性别校正后,新疆伊犁地区食管癌组与正常对照组COMTVal158Met多态性在哈萨克族、维吾尔族、汉族之间差异均无统计学意义.结论 COMT基因Val158Met单核苷酸多态可能不是新疆伊犁地区食管鳞癌危险性的遗传标志.

Abstract：

Objective To explore the relationship between polymorphism of catechol-O-methyltransferase (COMT) gene valine (Val) 158 methionine (Met) (G to A transition)and the distribution in population and esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) in Yili prefecture of Xinjiang.Methods A hospital based case-control study was adopted, a total of 622 subjects, which including 214 ESCC patients and 408 age, gender and ethnicity-matched normal control individuals.The polymorphism of COMT gene G to A transition was analyzed with PCR-restriction fragment length polymorphism approaches.Results The COMT genotype frequencies in 622 subjects in Yili prefecture were GG genotype accounted for 47.3%, GA type for 42.3% and AA type for 10.4%, G allele was 68.4% and A allele was 31.6%.There was no statistical difference in the COMT genotype and frequencies of allele distribution between ESCC group and control group.Furthermore, stratified analysis indicated that there was statistical difference between ESCC group and control group in subjects less than 60 years old.There was statistical difference in the allele distribution among Kazak,Uygur and Han ESCC groups.The COMT genotype and frequency of allele distribution among normal control groups of the three ethnic groups were statistically different.After corrected age and gender,there was no statistical difference in COMT Val158Met polymorphisms among Kazakh, Uygur and Han ethnic groups in both ESCC and control groups in Yili Prefecture of Xinjiang.Conclusion COMT gene Val158Met single nucleotide polymorphism may not be the genetic markers of ESCC risk in Yili Prefecture of Xinjiang.     

新疆奎屯地区高砷环境中抗砷菌的初步筛选

目的初步筛选新疆奎屯地区高砷环境中（123团4连）自流井水和污水中存在的高抗砷菌,检测其抗砷能力。方法选择高砷自流井水和污水标本,在NaAsO2选择性培养基上,分离和纯化,筛选出抗砷菌,初步进行细胞形态学的鉴定;用不同NaAsO2浓度的LB培养基对菌株抗砷性进行检测,测定其抗砷水平。结果初步筛选出5株抗砷能力较强的抗砷菌。A1、A2、A3均为革兰氏阴性杆菌。B1、B2均为革兰氏阳性球菌;5株菌均可在含有NaAsO2（50．400mg／L）培养基中生长。最高耐受到400mg／L,是新疆奎屯高砷水含量实际最高值的517倍,最低值的1156倍。结论①经初步筛选,确认新疆奎屯地区高砷环境中的自流井水和污水中存在高抗砷菌,首次成功筛选出5株强抗砷菌。②A1菌株的抗砷能力最强,可在400mg／LNaAsO2的LBA培养基上生长。本研究为新疆地区抗砷菌的深入研究提供了基础资料。     

沙漠干热环境创伤失血性休克大鼠继发性肺损伤时一氧化氮合酶等变化研究

目的 研究沙漠干热环境中创伤失血性休克大鼠肺脏发生继发性损伤时,肺组织病理改变与肺组织一氧化氮(NO)浓度、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达量的变化.方法 在兰州军区乌鲁木齐总医院动物实验科“西北特殊环境人工实验舱”中,140只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为常规环境创伤失血性休克组(常温组)和干热环境创伤失血性休克组(干热组),每组又分别设对照组、休克后0、0.5、1、1.5、2、3h组7个亚组,每组10只.对照组不做处理,干热组预热60 min,麻醉、固定,使用静脉留置针行右颈动、静脉和右股动脉插管,稳定10 min后,利用2500 g铁轮于30 cm高度击中SD大鼠左下肢股骨中上段造成粉碎性骨折,致伤后简易包扎伤口,经右股动脉放血使MAP维持在(35 ±5) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa),继续监测60 min后进行复苏.成功建立创伤失血性休克模型后,依据分组相应时间点,打开胸腔,留取肺灌洗液、肺组织,常温组除预热外其余操作相同.HE染色观察肺组织病理学改变和一步法检测肺组织NO质量摩尔浓度,荧光定量PCR检测iNOS mRNA表达量的变化.对计量资料进行t检验与单因素方差分析,各指标间进行Pearson相关分析.结果 病理观察可见干热组各时间点肺病理损伤较常温组病理损伤、蛋白渗出严重且肺组织病理学评分较高.两组肺组织匀浆NO质量摩尔浓度总体比较差异具有统计学意义(t=2.472,P＜0.05),干热组内各时间点比较差异具有统计学意义(F =6.77,P＜0.01),同一时间点干热组数值均大于常温组数值,干热组在2h达到最大值(3.35±0.23)μmol/g较常温组峰值出现早.两组iNOS mRNA表达量总体比较t检验差异具有统计学意义(t=3.619,P＜0.01),干热组组内各时间点比较差异具有统计学意义(F=12.34,P＜0.01),同一时间点干热组数值均大于常温组,干热组1.Sh时峰值出现,常温组则在2h时开始增加.两组肺组织匀浆NO质量摩尔浓度与iNOS mRNA表达量呈正相关(r=0.680、r=0.376),iNOS mRNA表达量与肺损伤病理学评分呈正相关(r=0.846、r=0.899).结论 在沙漠干热环境中创伤失血性休克继发性肺损伤时,肺脏损伤较常温环境下严重、较早,NO、iNOS在沙漠干热环境创伤失血性休克继发性肺损伤过程中起重要作用.     

RNA干扰PKM2对食管癌细胞株Eca109生物学特性的影响

目的将靶向PKM2的siRNA转染食管癌细胞株Eca109,观察转染后细胞内PKM2基因的表达变化及其对Eca109细胞增殖和周期的影响。方法将人工合成的针对PKM2基因的siRNA片段通过Lipofectamine 2000转染食管癌细胞株Eca109;实验分为实验组、空白对照组和阴性对照组,分别用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantita-tive PCR,qRT-PCR)和Western blot法检测各组细胞中PKM2的mRNA和蛋白质的表达量,并用MTT法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果与空白对照、阴性对照比较,实验组细胞中PKM2 mRNA及蛋白表达减少(P<0.05),Eca109细胞转染PKM2 siRNA后,增殖能力减弱,细胞周期被阻滞在G0/G1期。结论 PKM2对Eca109细胞的生长起促进作用。     

PD-L1/PD-L2对食管鳞癌细胞恶性表型的影响及耐药研究

目的 探讨程序性死亡配体1/2(PD-L1/PD-L2)对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及对化疗药物的敏感性。方法 在体外食管鳞癌KYSE150细胞系水平上,分别构建PD-L1杂合子敲除细胞系,慢病毒转染PD-L2过表达,将细胞分为WT组(PD-L1野生型)和PD-L1^+/-组(PD-L1杂合子敲除)、Ctrl组(对照)和OE-PD-L2组(PD-L2过表达),用RT-qPCR和Western blot验证PD-L1杂合子敲除和慢病毒转染PD-L2过表达效果以用于后续实验。采用EdU、细胞克隆形成实验、Transwell实验检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过CCK8法检测细胞增殖能力并计算抑制率来评估细胞对化疗药物的敏感性。结果 与野生型WT组相比,PD-L1^+/-组细胞增殖(P<0.001)、迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05)明显降低,差异有统计学意义。与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖和迁移能力增加(P<0.05),而侵袭能力无明显差异(P>0.05)。在顺铂药物梯度浓度干预下,...     

AXIN2基因的3个SNP位点与新疆维吾尔族先天缺牙的相关性

目的：探讨维吾尔族单纯型先天缺牙患者标本中AXIN2基因的突变位点。方法：收集维吾尔族非单纯型先天缺牙家系3个,采集家系患者颊黏膜拭子提取DNA,采用聚合酶链反应技术,对分段纯化的PCR产物进行DNA双向测序检测患者的DNA。结果：3个家系的单纯型先天缺牙临床表型符合常染色体显性遗传规律,患者出现不同数量的缺失牙或伴发锥形牙。测序后检测出AXIN2的3个可能的SNP位点。结论：AXIN2基因片段中某些编码基因的改变可能与维吾尔族单纯型先天缺牙有关。