食管鳞癌中miR-122-5P的表达及其临床病理学意义

目的 探究食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达、临床病理学意义及生物学行为。方法 选取食管鳞癌患者74例,收集手术切除的食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常食管组织。采用原位杂交技术检测miR-122-5P的表达,比较食管鳞癌组织与癌旁正常食管组织miR-122-5P表达差异,分析其表达及与肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果 miR-122-5P在食管鳞癌中的阳性表达率35.1%(26/74)明显低于癌旁正常食管组织77.0%(57/74)(X²=26.363,P=0.000)。miR-122-5P与食管鳞癌的肿瘤部位、浸润深度表达差异有统计学意义(X²=16.662,P=0.000;X²=10.723,P=0.005)。食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达水平与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤直径、病理分级、脉管转移、神经转移及淋巴结转移差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-122-5P在食管鳞癌组织和癌旁组织表达不同,食管鳞癌组织中表达下调,推测其可能具有抑癌基因的功能。     

金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP—1）的克隆与序列分析

目的：用基因工程技术构建金属蛋白酶组织抑制剂的克隆质粒。方法：从人乳腺癌细胞中分离提取总RNA,经逆转录PCR（RT－PCR）扩增出金属蛋白酶抑制因子1（TIMP－1）的c DNA,插入经NdeI和XhoI双酶切的PET19b载体中,构建了克隆质粒PET19bTIMP－1。结果：对此克隆质粒进行了限制性酶切鉴定和DNA序列分析,结果在扩增出的cDNA中624个碱基中与发表的TIMP－1cDNA序列相比,除361位碱基由A变为G外,其余均完全相同。结论：该突变导致编码的氨基酸由苏氨酸变为丙氨酸,不影响本课题后期用该克隆化基因表达蛋白作为抗原制备单克隆抗体的目的。该DNA全长624bp,编码207个氨基酸。     

胆囊不同病变中S-100蛋白阳性树突状细胞浸润及其与肿瘤相关标记表达的关系

70例不同胆囊病变标本包括胆囊腺癌30例］、胆结石20例、慢性胆囊炎20例，应用免疫组化观察P53蛋白、癌胚抗原（CEA）、增殖细胞核抗原（PCNA）表达状态及病变组织内S－100蛋白阳性树突状细胞（S-100 DC）浸润情况。p53蛋白、CEA及PCNA表达的阳性检出率，胆囊癌组分别为46．7％（14／30）、30％（9／30）及86．7％（26／30）；胆囊结石组分别为0、15％（3／20）及35％（7／20）；胆囊炎组分别为0、0及25％（5／20）。癌与非癌病变之间有明显差异（P＜0．05）。S-100 DC浸润阳性检出率，癌组织为40％（12／30）、胆囊结石组织为50％（10／20）、胆囊炎为85％（17／20）。S－100 DC的阳性检出率与组织内浸润细胞的密度，胆囊炎组与癌、胆囊结石组之间均存在明显统计学差异（P＜0．05）。研究结果提示：1）胆囊炎组织无肿瘤相关分子表达，但存在较高的免疫活性；2）胆结石标本内存在某些上皮细胞恶性转化，且其免疫活性有所降低。这种病变可能有较高肿瘤发生的危险；3）胆囊癌组织不仅有突变型P53基因、CEA及PCNA的过度表达，同时伴有免疫能力的损害，丧失了对肿瘤细胞的免疫监视作用，从而有利于癌的发展。     

胆囊不同病变中S—100蛋白阳性树突状细胞浸润及其与肿瘤相关…

７０例不同胆囊病变标本包括胆囊腺癌３０例，胆结石２０例，慢性胆囊炎２０例，应用免疫组化观察ｐ３蛋白，癌胚抗原，增殖细胞核抗原表达状态及病变组织内Ｓ－１００蛋白阳性树突状细胞浸润情况。Ｐ５３蛋白，ＣＥＡ及ＰＣＮＡ表达的阳性检出率，胆囊癌组分别为４６．７，３０％及８６．７％；胆囊结石组分别为０．１５％及３５％，胆囊炎组分别为０，０及２５。     

第333例--腹痛、呕吐、消瘦

病历摘要患者男,48岁,因上腹痛7个月,于2005年5月27日入院。患者7个月前开始无明显诱因出现上腹痛,位于脐上偏右,为持续隐痛或钝痛,饥饿时明显,伴有反酸、烧心,疼痛不向肩背部放散,无恶心、呕吐。行全消化道钡餐造影见十二指肠球部变形,食管、胃和各组小肠未见异常,行胶囊内镜检查亦未见小肠病变,结肠镜检查未见异常,诊断为十二指肠球部溃疡。此后多次门诊复诊,一直服用奥美拉唑,症状可暂时减轻,但无根本好转,并逐渐出现腹胀、进食后呕吐、消瘦。此次入院前行胃镜检查见幽门、十二指肠球部变形,水平部见1个病变的局部,未能窥视全貌,呈形态不…     

肿瘤相关巨噬细胞浸润与胃癌Borrmann分型及VEGF表达的关系

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)浸润与胃癌Borrmann分型及胃癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法应用免疫组织化学方法检测30例胃癌组织中CD68、VEGF的表达。结果 CD68阳性细胞在不同Borrmann分型组织中的浸润程度不同,Ⅲ～Ⅳ型多于Ⅰ～Ⅱ型(P=0.008)。胃腺癌细胞、癌旁正常腺细胞表达VEGF,不同Borrmann分型与正常组织中的表达无统计学差异(P>0.05)。结论 TAM浸润与胃癌大体分型相关,TAM通过上调VEGF表达促进血管生成,促进胃癌细胞的恶性行为。     

神经型一氧化氮合酶在小鼠心肌缺血预处理中的作用

目的 应用神经型一氧化氮合酶(nNOS)基因敲除小鼠和nNOS抑制剂,探讨nNOS对心肌缺血预处理后心肌细胞凋亡的影响.方法 实验分为野生型缺血再灌注组(WT IR)、野生型缺血预处理组(WT IP)、野生型缺血预处理L-VNIO处理组(WT IP+ L-VNIO)、基因敲除鼠缺血再灌注组(KO IR)和基因敲除鼠缺血预处理组(KO IP).采用冠状动脉左前降支结扎法建立小鼠缺血再灌注损伤模型,缺血再灌注组缺血30 min再灌注3h,缺血预处理组分别经缺血5 min再灌注5 min连续三个循环后,再缺血30 min再灌注3h,观察TUNEL染色和Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3的活性变化,并用Western Blot法观察Bax、Bcl-2和Fas蛋白的表达情况.结果 与WT IR组相比,WT IP组小鼠TUNEL阳性细胞数目减少,Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3活性降低,Bax和Fas蛋白表达显著降低,Bcl-2表达显著增加(P＜0.05).而在KO IP组,与KO IR组相比,TUNEL阳性细胞数目和Caspase活性显著增加,Bax和Fas表达显著增高,Bcl-2表达显著降低(P＜0.05).结论 nNOS在心肌缺血预处理时发挥抑制心肌细胞凋亡的作用.     

肾康注射液治疗慢性肾脏疾病（CKD3-4期）的疗效观察

目的：观察肾康注射液治疗慢性肾脏疾病（CKD 3-4期）的临床疗效。方法：96例患者分为两组,试验组给予肾康注射液100 ml＋10%葡萄糖（或者0.9%氯化钠注射液）300 ml静脉滴注每日1次,对照组给予前列地尔注射液5μg＋生理盐水10 ml静脉注射每日1次,疗程为14 d,监测治疗前后患者的血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肌酐清除率（Ccr）、中医症候积分等指标变化情况。结果：与自身基线水平相比,治疗后两组患者Scr、BUN、Ccr、中医症候积分均有明显变化,比较差异有统计学意义（P〈0.05）,试验组总有效率为54.17%,对照组总有效率为56.25%,两组比较差异无统计学意义。结论：肾康注射液能有效延缓中医辨证分型为湿浊证和（或）血瘀证CKD3-4期患者病程的进展。     

ERK1/2MAPK通路在Eca109细胞体外增殖和迁移中的作用及其机制

目的观察ERK1/2 MAPK通路在食管鳞状细胞癌(ESCC)Eca109细胞系增殖和迁移中的作用并探讨其作用机制。方法使用MAPK(ERK1/2)抑制剂U0126处理Eca109细胞;细胞计数检测细胞增殖;倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ERK1/2 mRNA;Western blot检测总ERK1/2(t-ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2);MTT和细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;qRT-PCR检测MicroRNA-21(miR-21)。结果20μmol/L浓度的U0126可抑制Eca109细胞生长(P<0.05),破坏细胞正常形态,ERK1/2 MAPK通路的活化在蛋白质水平被抑制(P<0.05),Eca109细胞增殖和迁移明显减弱(P<0.05),显著下调miR-21的表达(P<0.05)。结论ERK1/2 MAPK信号通路抑制可减弱Eca109细胞增殖和迁移,其可能的作用机制之一与其抑制miR-21表达有关。     

奥美沙坦酯对慢性心力衰竭小鼠肾脏氧化应激的作用

目的 探讨奥美沙坦酯对慢性心力衰竭小鼠肾脏氧化应激的作用。 方法 健康C57小鼠分为假手术组（SHAM组）、慢性心力衰竭组（CHF组）和奥美沙坦酯治疗组（OLM组）。以冠状动脉左前降支结扎法建立慢性心力衰竭小鼠模型，其中奥美沙坦酯治疗组以10 mg/kg剂量每日胃饲，12周时观察各组小鼠心率、血压、心功能状况、Scr、BUN、血浆和肾脏血管紧张素（Ang）Ⅱ水平。实时PCR法检测肾脏gp91phox、p22phox和NOX4的表达。AZAN染色和二氢乙啶（DHE）染色观察肾组织病理变化。 结果 与SHAM组比较，CHF组和OLM组左室舒张末期内径（LVDd）和左室收缩末期内径（LVDs）显著增加（P ＜ 0.05）；短轴缩短率（FS）和射血分数（EF）显著降低（P ＜ 0.05）；CHF组收缩压、Scr和BUN显著增高，而OLM组以上指标较CHF组均显著降低（P ＜ 0.05）。与SHAM组比较，CHF组血浆和肾脏AngⅡ水平增高，gp91phox、p22phox和NOX4表达增高（P ＜ 0.05）；OLM组肾脏AngⅡ水平、gp91phox、p22phox和NOX4表达较CHF组均显著降低（P ＜ 0.05）。与SHAM组比较，CHF组肾脏AZAN染色和DHE染色阳性增强（P ＜ 0.05），而OLM组较CHF组显著降低（P ＜ 0.05）。 结论 慢性心力衰竭可使肾内NADPH氧化酶激活并导致肾小球间质纤维化，奥美沙坦酯通过抑制AngⅡ引起的氧化应激反应起到肾脏保护作用。