O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性关系的研究

目的 为探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性的关系. 方法 运用病例-对照研究的方法,PCR-RFLP技术检测新疆哈萨克族食管癌51例及非癌对照109例的MGMT 84C>T和MGMT 135G>T单核苷酸多态(SNPs)的基因型. 结果 MGMT 84C>T位点的三种基因型CC,CT,TT,在哈萨克族食管癌中所占比例分别为76.5%(39/51) 、17.6%(9/51) 、5.9%(3/51),对照组分别为77.0%(84/109)、18.3%(20/109)、4.6%(5/109),两组间分布差异不显著(P=0.938,P>0.05);MGMT 135G>T位点的三种基因型GG,GT,TT,在哈萨克族食管癌中所占比例分别为90.2%(46/51)、7.8%(4/51)、2.0%(1/51),对照组分别为82.6%(90/109)、16.5%(18/109)、0.9%(1/109),两组间分布差异不显著(P=0.295,P>0.05);MGMT 84C>T位点和MGMT 135G>T位点联合分析,在食管癌组0突变等位基因与1-4突变等位基因所占比例分别为68.6%(35/51)、31.4%(16/51);对照组分别为:63.3%(69/109)、36.7%(40/109),两组间分布差异也不显著(P=0.511,P>0.05). 结论 MGMT 84C>T和MGMT 135G>T SNPs与哈萨克族食管癌易感性可能无关联.     

新疆伊犁地区食管鳞癌与儿茶酚-O-甲基转移酶基因Val158Met多态性的关联分析

目的 探讨儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因缬氨酸(Val)158甲硫氨酸(Met)(G→A转换)多态性在新疆伊犁地区人群中的分布及与食管鳞癌(ESCC)的关系.方法 采用以医院为基础的病例对照研究方法,研究对象共622名,包括214例ESCC患者,408名年龄、性别、民族相匹配的正常对照.以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析COMT基因G/A多态性.结果 622名受试者COMT基因型频率分布依次为GG型占47.3%,GA型占42.3%,AA型占10.4%;等位基因G为68.4%,A为31.6%.食管癌组与正常对照组COMT基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义(P＞0.05).分层分析显示,年龄≤60岁的食管癌组与正常对照组之间COMT基因型(x2=6.101)和等位基因频率(x2=4.493)差异有统计学意义(P值均＜0.05);哈萨克族、维吾尔族、汉族ESCC组间等位基因频率比较差异有统计学意义(x2=6.671,P＜0.05);三个民族正常对照组间COMT基因型(x2=13.567)及等位基因频率(x2=11.321)分布比较差异均有统计学意义(P值均＜0.05).将年龄及性别校正后,新疆伊犁地区食管癌组与正常对照组COMTVal158Met多态性在哈萨克族、维吾尔族、汉族之间差异均无统计学意义.结论 COMT基因Val158Met单核苷酸多态可能不是新疆伊犁地区食管鳞癌危险性的遗传标志.

Abstract：

Objective To explore the relationship between polymorphism of catechol-O-methyltransferase (COMT) gene valine (Val) 158 methionine (Met) (G to A transition)and the distribution in population and esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) in Yili prefecture of Xinjiang.Methods A hospital based case-control study was adopted, a total of 622 subjects, which including 214 ESCC patients and 408 age, gender and ethnicity-matched normal control individuals.The polymorphism of COMT gene G to A transition was analyzed with PCR-restriction fragment length polymorphism approaches.Results The COMT genotype frequencies in 622 subjects in Yili prefecture were GG genotype accounted for 47.3%, GA type for 42.3% and AA type for 10.4%, G allele was 68.4% and A allele was 31.6%.There was no statistical difference in the COMT genotype and frequencies of allele distribution between ESCC group and control group.Furthermore, stratified analysis indicated that there was statistical difference between ESCC group and control group in subjects less than 60 years old.There was statistical difference in the allele distribution among Kazak,Uygur and Han ESCC groups.The COMT genotype and frequency of allele distribution among normal control groups of the three ethnic groups were statistically different.After corrected age and gender,there was no statistical difference in COMT Val158Met polymorphisms among Kazakh, Uygur and Han ethnic groups in both ESCC and control groups in Yili Prefecture of Xinjiang.Conclusion COMT gene Val158Met single nucleotide polymorphism may not be the genetic markers of ESCC risk in Yili Prefecture of Xinjiang.     

泡球蚴感染小鼠IL-17基因实时荧光定量RT-PCR方法的建立与检测

目的建立检测泡球蚴感染小鼠IL-17的实时荧光定量RT-PCR方法,并用于泡球蚴病小鼠IL-17基因检测。方法通过腹腔注射100μl泡球蚴组织匀浆液建立泡球蚴感染小鼠模型,感染1个月后处死,提取肝脏总RNA,反转录得到cDNA;登陆GenBank,得到IL-17基因(U43088.1)全序列,选取保守序列,应用pri mer 5设计引物,β-actin作为内参,以10倍梯度稀释IL-17 PCR产物为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR以确定方法的特异性和灵敏度;绘制标准曲线,确定IL-17基因检测的最佳条件。结果用建立的实时定量RT-PCR检测IL-17基因无非特异性扩增,各样品熔解温度均在81.0℃,熔解峰单一;mRNA检出限为1×102pg,106~102pg总RNA均有扩增;泡球蚴感染1个月后,IL-17基因表达显著增加,感染组和对照组分别为(0.008728±0.000984)和(0.003823±0.00082),差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立了小鼠源IL-17基因实时定量RT-PCR检测体系。经检测,小鼠感染泡球蚴1个月后IL-17基因表达增加,表明IL-17在泡球蚴感染免疫调节...     

细粒棘球蚴MKKl和MKK2基因原核表达载体的构建及其诱导表达

目的分别构建细粒棘球蚴（Eg）丝裂原活化蛋白激酶激酶MKK1和MKK2基因原核表达载体,诱导表达并纯化EgMKK1和EgMKK2蛋白。方法采集绵羊肝脏感染的Eg原头蚴,Trizol法提取原头蚴总RNA,反转录PCR分别扩增EgMKK1和EgMKK2基因片段,克隆至原核表达载体pET28a（＋）,经限制性内切酶双酶切和测序鉴定正确后转化大肠埃希菌感受态细胞BL21,异丙基-G-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化蛋白,并进行SDS-PAGE分析。结果测序证明pET28a-EgMKK1和pET28a-EgMKK2原核表达载体构建正确,在37℃经IPTG（终浓度1mmol／L）诱导可表达EgMKK1和EgMKK2蛋白,分子质量单位分别为44．96ku和64．0lku,与理论值相符,且以包涵体形式存在。表达产物纯化后的可溶性蛋白EgMKK1和EgMKK2含量分别为0．64mg／ml和1．2mg／ml。结论成功构建了MKK1和MKK2基因原核表达载体,表达蛋白可用于动物免疫,为研究EgMKK1和EgMKK2在Eg体内的生物学作用奠定了基础。     

细粒棘球蚴囊液对HepG2细胞增殖的影响

目的 探讨细粒棘球蚴囊液(HCF)对宿主肝细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路及细胞周期的影响.方法 四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度HCF对HepG2细胞的增殖作用.流式细胞仪检测细胞周期.Western blot法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(cyclin) D1、cyclin A、cyclin B1、cyclin E的表达水平.对数据采用重复测量方差分析.结果 在48、72h和96h,15％、30％和60％ HCF组与无胎牛血清比较,能明显促进HepG2细胞的增殖(P值均＜ 0.05).Western blot检测结果显示:15％HCF组p-ERK在48h高表达(F=1.916,P＜ 0.01),cyclin D1在24h高表达(F=3.901,P＜0.01),15％、30％HCF组PCNA分别在48h、72h高表达(F=91.140,P＜0.01),cyclin A分别在48h、72h高表达(F=18.587,P＜0.01),cyclin B1分别在48h、72h高表达(F=2.064,P＜0.01),30％ HCF组cyclin E在96h高表达(F=1.068,P＜0.01).结论 HCF对体外培养的HepG2细胞无毒害作用,对其增殖有一定促进作用.     

新疆哈萨克族和维吾尔族及塔吉克族人群中谷胱甘肽转硫酶M1基因多态性分布

目的探讨谷胱甘肽转硫酶M1（Glutathione-S-Transferase M1，GSTM1）基因在新疆哈萨克、维吾尔、塔吉克族人群中基因多态性的分布。方法用PCR与电泳技术分析1121名健康人群（男442名，女679名；其中哈萨克族654名、维吾尔族412名和塔吉克族55名）中GSTM1基因的多态性分布状况。结果GSTM1基因在维吾尔、塔吉克和哈萨克族中的缺失率分别为62．6％、50．9％和47．4％，其中，维吾尔族中GSTM1基因缺失型（GSTM1 null）明显高于哈萨克族（OR：1．859，CI为1．445—2．391，X^2=23．71，P=0．000），而维吾尔族与塔吉克族之间、哈萨克族与塔吉克族之间GSTM1 null基因型的分布差异无统计学意义。结论GSTM1 null基因型在维吾尔族和哈萨克族人群中分布频率明显不同，提示GSTM1基因在新疆哈萨克族、维吾尔族人群中的分布存在多态性。     

泡型包虫病患者肝脏中蛋白基因产物9.5阳性神经纤维的检测及其分析

目的 探索蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5, PGP9.5)在泡型包虫病（alveolar echinococcosis, AE）患者肝组织中病灶近端、远端的分布特征，明确泡型包虫病患者肝组织中病灶近端PGP9.5的阳性神经纤维密度与临床病理特征、生化指标之间的关系。方法 选取2019年7月—2022年7月在新疆医科大学第一附属医院肝胆外科住院的59例泡型包虫病患者，收集患者病灶近端和远端的肝组织，并同期收集临床病理资料和生化指标信息。采用免疫组化方法检测59例泡型包虫病患者肝组织中病灶近端、远端的PGP9.5阳性神经纤维密度，分析泡型包虫病患者肝组织中病灶近端与远端PGP9.5阳性神经纤维密度的差异，进一步分析泡型包虫病患者病灶近端PGP9.5阳性神经纤维密度与临床病理特征、生化指标之间的关系。结果 泡型包虫病患者肝组织内病灶近端的神经增多，且主要分布在病灶包裹的纤维膜外层，在病灶远端神经未见明显异常。泡型包虫病患者肝组织中病灶近端PGP9.5的阳性神经纤维密度显著高于病灶远端的PGP9.5阳性神经纤维密度，差异有统计学意义（Z=-4.237,P&...     

1895例北京市社区居民中医体质状况调查分析

目的 通过对1895例北京朝阳区垂杨柳社区人员中医体质的筛查,了解社区居民的体质状况,为社区疾病的预防和慢性病管理提供依据.方法 通过入户、门诊就诊相结合的方法,把社区人群的体质分为正常体质和病理体质两大类,病理体质又分为肝郁、痰湿、瘀血、阳虚、气血两虚、气阴两虚和阴虚型,由临床医师实施现场调查.结果 1895例被调查者中,正常体质者485例(25.59%),病理体质者1410例(74.41%),肝郁型282例(14.88%),痰湿型243例(12.82%),瘀血型184例(9.71%),阳虚型98例(5.17%),气血两虚型54例(2.85%),气阴两虚型285例(15.04%),阴虚型264例(13.93%).病理体质人群占主体.结论 居民体质主要表现为病理体质,说明社区防病、治病的重点是这部分人群,同时提高中青年的身体素质,也是社区卫生工作的一项重要内容.     

带血供尺神经深筋膜瓣下前置术解剖学研究

目的为带血供尺神经深筋膜瓣下前置术提供解剖学依据。方法在12侧福尔马林固定的成人尸体上肢标本、8侧新鲜尸体上肢标本上观测尺神经在肘部的血供。结果肘部尺神经血供来源有3个:尺侧上副动脉(SUCA)、尺侧下副动脉(IUCA)和尺侧返动脉后支(PURA),与尺神经伴行长度分别约为15.0cm、5.0cm和5.5cm。尺神经于肘部发出关节支和肌支分别为1～3支。结论行尺神经深筋膜瓣下前置术时至少应保留SUCA或IUCA,深筋膜瓣的制作应依据任意皮瓣原则。