基础医学课程整合教学改革6年总结

六年来，浙江大学医学院对基础医学课程进行了整合改革，按照“从宏观到微观，从形态到功能，从正常到异常，从疾病到治疗药物”的原则，注重知识的系统性，将人体解剖学、组织胚胎学、生理学、病理学、病理生理学和药理学等六门基础医学课程进行了系统整合，取得了显著成效。     

真核生物水稻的苯丙氨酸氨解酶基因在原核生物大肠杆菌BL21DE3中的表达

目的：研究真核生物水稻的苯丙氨氨氨解酶基因在原核生物大肠杆菌中表达及其规律，为酶替代疗法治疗苯丙酮尿症及某些肿瘤治疗奠定基础。方法：根据水稻苯丙氨酸氨解酶基因序列，在ＡＴＧ下游１３１－１１２碱基处设计引物：５’ＴＧＧＡＴＣＴＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＴ３’，对质粒ｐＵＣ１９－ｒＰＡＬ－１－ｃＤＮＡ（日本国立农业生物研究所Ｅｉ－ｉｃｈｉＭｉｎａｍｉ惠赠）中的ｒＰＡＬ－１－ｃＤＮＡ进行反向测序，根据ｃＤＮＡ测序结果及质粒ｐＥＴ－２８系列中阅读框架结构选定ｐＥＴ－２８ｃ作为载体，用ＥｃｏＲＩ酶将其从多克…     

叶青双对哺乳类细胞的DNA损伤作用

叶青双为一种新农药,属噻二唑类化合物,其化学名为N,N’—甲撑—双(2—氨丛—5巯基—1,3,4,—噻唑),[N,N’—Methylenc—bis(2—amino—5 sulfhydryl—1,3,4—thiadizolc)],又名二巯基敌枯双。结构武为:     

细胞周期对细胞ADPRT基础活性及DNA损伤剂诱发活性的影响

真核细胞染色质中的腺苷二磷酸核糖基转移酶(ADPRT)是维持有效DNA切除修复所必需的。本研究证明在通透化了的FL细胞中ADPRT活性呈细胞周期依存性波动。它的活性峰值见于DNA合成峰值后的4～6小时;同步培养于G_1期的细胞在按触DNA-损伤剂,甲基硝基亚硝基胍(MNNG)、甲磺酸甲酯(MMS)及4-硝基喹啉氧化物(4NQO)后ADPRT活性明显升高。在细胞周期的不同阶段,MNNG/4NQO对ADPRT的刺激作用与细胞周期对它的影响呈叠加作用。但MMS对ADPRT活性的刺激作用却完全依存于基础酶活性。在基础酶活性最高时,MMS几乎不显示其ADPRT刺激作用。因而认为DNA-损伤剂引起的ADPRT刺激作用有不止一个机制存在。同步于G_1期的细胞最适合于显示DNA损伤后的ADPRT活性升高。上述细胞周期性影响可能同细胞周期中DNA修复的顺序性变化以及细胞对致癌物敏感性的周期性变化有关。     

氰戊菊酯的UDS试验结果

UDS试验是检测DNA损伤的短期试验之一.用UDS试验检测三种不同来源的氰戊菊酯,氰戊菊酯№1和№2浓度在5×10~(-8)～10~(-5)mol/L,有或无代谢活化系统时,都无诱发UDS作用.氰戊莉酯№3在不和体外活化系统,浓度为5×10~(-5)mol/L时结果为阳性,并能获得剂量效应关系.加有大鼠肝微粒体制剂时,氰戊菊酯№3浓度在5×10~(-8)～10~(-5)mol/L,无诱发UDS作用.比较三种氰戊菊酯制品的纯度后认为,№3的DNA损伤作用可能是样本中之杂质所引起.     

COX-2和HO-1参与缓激肽诱发的晚期心肌保护作用

目的:观察环氧化酶2(COX-2)和血色素氧化酶-1(HO-1)是否参与缓激肽诱发的晚期心肌保护作用。方法:在整体给药后24 h,采用大鼠离体心脏Langendorff灌流方法,以结扎冠脉前降支30 m in复灌2 h作为缺血/复灌,期间观测心脏收缩功能、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌梗死面积等指标。结果:①SD大鼠静脉注射缓激肽(40μg/kg)24 h后,可促进缺血/复灌心脏收缩功能的恢复,减少LDH释放,缩小心肌梗死面积。②缓激肽注射之前预先给予COX-2抑制剂塞来昔布(3m g/kg)组,与单纯给予缓激肽组相比,左室舒张末压增高,左室发展压、最大左室收缩/舒张速率降低,而LDH释放量和心肌梗死面积增加。③HO-1抑制剂ZnPP IX(20μg/kg)可部分取消缓激肽引起心功能的改善、LDH释放量的减少和心肌梗死面积的缩小。④在缓激肽注射前或后给予线粒体ATP敏感性钾离子通道(m itoKATP)阻断剂5-HD,均可取消缓激肽诱发的心肌保护作用。结论:COX-2和HO-1参与了缓激肽诱发的晚期心肌保护作用,而m itoKATP通道在缓激肽诱导的晚期心肌保护作用中扮演了触发器和通路终末效应器双重角色。     

化学致癌物和抗致癌物检测技术的基础和应用研究

该课题已发表论文33篇,内容有6项: 一、非程序性DNA合成试验的改进。本改进法以~(14)C-胸苷预标记的同步化培养细胞为测试细胞,从而在测量非程序性DNA合成的~3H-胸苷掺入的比放射活性时可省略繁复的DNA定量测定,而以~3H/~(14)C放射活性比代替,大大缩短了测试周期和材料消耗。二、创建一个以ADP-核糖基转移酶介导的细胞NAD含量降低为DNA损伤检测终点的试验法。研究证明该酶活性和它的唯一底物(细胞NAD)含量由于在DNA复制过程中出现的小片段DNA的刺激而呈细胞周     

转染了细胞色素P450 1A1基因重组表达质粒的CHL细胞（CHL—1A1…

本研究应用我室建立的稳定表达ＣｙｔＰ４５０１Ａ１的转基因细胞株ＣＨＬ－１Ａ１对一组前致突变物／前致癌物进行双核细胞微核试验，同时以母细胞系ＣＨＬ为对照，结果表明，在不加Ｓ９的情况下，五种前致突变物，苯并芘，３－甲基胆蒽，苯并蒽，二甲基苯蒽和蒽均能诱导ＣＨＬ－１Ａ１细胞的微核率显著增高，并具有剂量反应关系，证明ＣＨＬ－１Ａ１细胞具备代谢活化多环芳烃类化合物的能力。     

突变形成的原核与原核-真核检测系统现状

原核细胞检测系统在检测突变形成的过程中，以其简便，快捷，灵敏，价格相对低廉等特点，起着不可替代的作用，目前较为常用的方法有：回复突变试验，修复试验，SOS相关试验等；supF tRNA转运系统是穿梭于原核与真核细胞之间，当属原核－真核检测系统；现就其中回复突变试验和supF tRNA转运系统及其进展作一综述。