中国人血管抑素基因的克隆及其序列分析

目的：克隆中国人血管抑素(angiostatin，ANG)基因全长并进行序列分析。方法：应用RT-PCR，将5例健康人肝脏组织ANG基因克隆到pSP71载体上，用Sanger法进行基因测序分析。结果：通过RT-PCR获得一个1141bp的扩增产物，测序发现与已报道的ANG比较，国人ANG上有3个碱基突变位点：分别为第825位C→T；第927位T→G和第1078位G→A。前两个碱基突变氨基酸未发生变化，第3个碱基突变结果使缬氨酸(Val342)改变成为蛋氨酸(Met342)。结论：克隆得到中国人ANG基因片段，其碱基和氨基酸的变化可能是人群中该基因的遗传多态现象。     

氢化可的松琥珀酸钠治疗重症哮喘患儿16例分析

哮喘是严重危害儿童健康的常见病 ,其发病率呈上升趋势 ,重症哮喘是危重症 ,必须立刻治疗 ,我们通过应用氢化可的松琥珀酸钠冲击治疗 ,取得良好效果。1　对象与方法1 1　对象　我院呼吸科 1999年 11月～ 2 0 0 1年 3月住院的重症哮喘患儿 ,均符合全国儿科哮喘协作组制定的诊断标准。随机分为 ,观察Ⅰ组、观察Ⅱ组和对照组。年龄 3～ 12岁。三组患儿在男女比例、平均年龄、病情轻重及院外治疗过程等无显著差异。1 2　方法　观察Ⅰ组给予氢化可的松琥珀酸钠针剂 (天津生化制药厂生产 ) 10ｍｇ/ｋｇ ,加入 10 %葡萄糖液 10 0ｍｇ静脉滴注 ,每 8…     

一起甲型H1N1流感大型暴发的流行特征及影响因素调查

甲型H1N1流感是由一种新甲型H1N1流感病毒株引起的新发传染病,2009年春首现于墨西哥等北美国家,迅速蔓延并波及全球绝大多数国家和地区,引起世界流感大流行[1].中国于2009年5月初出现甲型H1N1流感输入性病例.2009年8月下旬河南省某县一所高中发生了一起大型甲型H1N1流感暴发,至结案时病例数达202例.此暴发是河南省第一起非境外输入病例引起的甲型H1N1流感暴发,也是河南省发病人数最多的一起.为深入了解该起暴发疫情的流行特征及影响因素,作者对该起暴发进行了深入调查,现报道分析如下.     

肉桂酸对人肺腺癌A549细胞相关基因表达的影响

目的探讨肉桂酸（CINN）诱导肺癌A549细胞分化的能力及其分子机制。方法采用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹等技术，研究CINN对人肺腺癌A549细胞分化相关蛋白质分子CD15，相关基因c-myc、EGFR、wtp53、wtp16等表达的影响。结果CINN可上调wtp53、wtp16基因，抑制CD15、c-myc、EGFR基因表达。结论CINN的上述作用可能是其诱导肺癌A549细胞分化的机制之一。     

光敏剂PpIX亚细胞分布方式对食管癌细胞光动力学效应的影响

目的: 探讨不同来源的光敏剂PpIX在食管癌细胞中的亚细胞分布与光动力学效应的关系.方法: KYSE-450、KYSE-70和Het-1A细胞分别用ALA和外源性PpIX以及MitoTrackerGreen处理, 相差荧光显微镜观察不同来源的PpIX在细胞内的定位. 利用JC-1-流式细胞方法检测ALA-PDT和PpIX-PDT后细胞线粒体膜电位(ΔΨm)的改变. 利用电镜观察ALAPDT和PpIX-PDT后细胞线粒体的超微结构,观察PpIX的不同细胞分布形式对线粒体损伤的形态学改变. MTS法测定PDT处理后的细胞存活率.结果: 由ALA产生的内源性光敏剂PpIX荧光主要分布在线粒体, 与MitoTracker Green显示的线粒体荧光分布在相同的区域, 而外源性PpIX荧光信号则弥漫性分布于整个细胞质.KYSE-450、KYSE-70和Het-1A细胞经ALAPDT12 h后, 膜电位受损细胞分别达到22%、52%和33%, 而外源性PpIX-PDT别12 h后线粒体受损细胞率仅分别为15%、14%和18%. 电镜观察结果显示, ALA-PDT后仅1 h一些线粒体即已出现受损状态, 可见线粒体内嵴不明显, 出现空泡和膨胀. 但外源性PpIX-PDT后1h细胞内大部分线粒体仍保持完整结构. ALAPDT的细胞杀伤效果明显好于外源性PpIXPDT.结论: 光敏剂的不同亚细胞定位影响了食管癌细胞PDT的功效, PDT造成的线粒体的损伤在肿瘤细胞杀伤过程中起非常重要的作用, 提示以线粒体为靶点的光敏剂是未来光敏剂研制的重点.     

阿奇霉素联合痰热清治疗儿童肺炎的临床疗效观察

目的:观察阿奇霉素联合痰热清治疗儿童肺炎的临床疗效.方法:随机选择我院收治的肺炎患儿,共100例,收治时间在2015年9月～2016年9月,以此作为研究对象,并分为两组,研究组予以阿奇霉素联合痰热清治疗,对照组实施静滴阿奇霉素联合利巴韦林治疗,比较两组临床治疗效果和生活质量评分.结果:与对照组相比,研究组临床治疗总有效率和生活质量评分均明显更高,差异有统计学意义,P<0.05.结论:阿奇霉素联合痰热清治疗儿童肺炎的临床价值显著,可以提高临床治疗效果,促进生活质量的改善.     

干扰mTOR表达增强食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性

目的：观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性小干扰RNA（mTOR-siRNA）干扰mTOR表达后,食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素(rapamycin)敏感性的变化。方法：mTOR-siRNA转染EC9706细胞, RT-PCR检测干扰效果。mTOR-siRNA转染前后的EC9706细胞用雷帕霉素处理,Western blotting检测EC9706细胞中mTOR及其下游p70S6K蛋白的表达;流式细胞术检测EC9706细胞的周期及凋亡,CCK-8试剂盒检测EC9706细胞的增殖。结果：mTOR-siRNA下调EC9706细胞中mTOR mRNA的表达（P<0.05或P<0.01);雷帕霉素抑制EC9706细胞中mTOR和p-p70S6K蛋白的表达（P<0.05),并促进p70S6K蛋白表达(P<0.01),且mTOR-siRNA转染后此作用更明显（P<0.05）。雷帕霉素可诱导EC9706细胞凋亡(P<0.01)、抑制EC9706细胞增殖(P<0.05或P<0.01)、使EC9706细胞阻滞于G1期(P<0.01),且mTOR-siRNA转染后这些作用更强（P<0.05）。结论：mTOR-siRNA能特异性下调食管鳞癌EC9706细胞中mTOR表达,提高EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性。     

锌指转录因子Snail及E-钙黏附素在食管鳞癌中的表达及意义

目的：检测锌指转录因子Snail及E-钙黏附素（E-cadherin）蛋白在食管鳞癌中的表达,分析其与食管鳞癌侵袭、转移的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测Snail及E-cadherin在62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果：食管鳞癌组织中Snail及E-cadherin蛋白表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Snail蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为79.0%（49/62）、48.4%（15/31）、17.7%（11/62）,组间比较差异有统计学意义（χ²=50.129,P<0.01）;而E-cadherin蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次升高,分别为40.3%（25/62）、71.0%（22/31）、95.2%（59/62）,组间比较差异有统计学意义（χ² =48.426,P<0.01）。进一步相关性分析表明：Snail和E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。结论：Snail及E-cadherin蛋白的异常表达可能与食管鳞癌的发生、发展密切相关,二者的联合检测有可能作为食管鳞癌侵袭、转移的重要生物学标志。