纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究

[目的]制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果.[方法]应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径.然后转染原代人脐带静脉内皮细胞,观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能.[结果]扫描电镜观察到Ang2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150～200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好.有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能.[结论]成功制备纳米Ang-2siRNA微粒,并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础.     

P53表达在胸腺瘤分型中的意义

目的探讨P53的表达在不同类型胸腺瘤中的意义。方法选取我科2000年5月至2005年12月29例经病理证实的胸腺瘤手术切除标本,采用SP免疫组化方法检测P53蛋白在胸腺瘤中的表达情况。结果P53阳性表达率分别为:良性胸腺瘤7.70%,恶性胸腺瘤I型50.00%,胸腺癌100%。P53的表达随着肿瘤恶性程度的增高而增加(P<0.05)。P53蛋白表达的阳性率与胸腺组织学类型及是否伴有重症肌无力(MG)无关(P>0.05)。结论P53的表达在不同类型胸腺瘤中差异显著,对于判断胸腺瘤良恶性有重要参考价值。     

停跳或不停跳心脏手术对血清 S-100B蛋白表达的影响

【目的】研究心脏手术围术期血清S-100B蛋白表达及其与停跳或不停跳心肺转流方式和时间的关系。【方法】体外循环心脏手术患者23例,测转流前、转流10min、转流末、转流后24h的血清S-100B蛋白表达水平。【结果】①血清S-100B蛋白质量浓度在体外循环前后动态变化:转流前(M)为0.27μg/L,转流10min后升至0.57μg/L(P<0.01),转流末达峰值1.80μg/L(P<0.01),转流后24h降为0.22μg/L(P>0.05)。转流末的血清S-100B蛋白质量浓度与转流时间呈正相关(r=0.488,P<0.05)。②停跳组(n=6)转流前、转流10min、转流末、转流后24h平均血清S-100B蛋白质量浓度分别为(0.17±0.09)μg/L、(0.48±0.13)μg/L、(1.65±0.52)μg/L和(0.19±0.04)μg/L,不停跳组(n=6)分别为(0.26±0.14)μg/L、(0.71±0.41)μg/L、(1.59±0.84)μg/L和(0.23±0.11)μg/L,两组差别无统计学意义(P>0.05)。【结论】体外循环可导致血清S-100B蛋白表达增高,其表达水平与心肺转流时间呈正相关,但与停跳或不停跳转流方式无关。     

自体骨髓单个核细胞心肌移植治疗猪慢性缺血性心脏病的实验研究

【目的】探讨自体骨髓单个核细胞心肌移植对猪慢性缺血心肌心功能的改善和促进血管新生的作用。【方法】小型猪左侧开胸在左冠状动脉回旋支起始部放置Ameroid环，4周后进行心脏超声波检测、冠状动脉造影和自体骨髓单个核细胞心肌移植，移植后4周进行心脏超声波检测，免疫组化计数血管密度。【结果】17只猪中有16只猪术后存活8周以上，活体冠状动脉造影显示左冠状动脉回旋支均闭塞。自体骨髓单个核细胞心肌移植组比对照组心功能有显著改善（P〈0．05），移植组的血管数密度显著高于对照组（P〈0．05），差异有统计学意义。【结论】自体骨髓单个核细胞心肌移植可改善慢性缺血心肌的心功能，其机理之一是通过改善缺血心肌的血供来实现。     

当归四逆汤加味预防mFOLFOX6方案化疗后疲乏临床研究

目的:观察当归四逆汤加味对预防m FOLFOX6方案化疗后疲乏的作用。方法:将70例准备行m FOLFOX6方案化疗的消化系统恶性肿瘤患者按照随机数字表分为治疗组和对照组,每组35例。对照组及治疗组均采用m FOLFOX62周方案进行化疗,治疗组在每程化疗前2天开始服当归四逆汤加味,每日1剂,连服5d。化疗前以及完成4、8、12周期化疗后1周采用Piper疲乏量表对2组患者的疲乏状况进行评价,并进行组间比较。结果:与对照组同期比较,治疗组在完成4、8、12周期化疗后的疲乏程度均较轻,差异均有统计学意义。结论:当归四逆汤加味能有效减少和减轻m FOLFOX6方案化疗后的疲乏。     

每周奥沙利铂同期放化疗与单纯放疗比较治疗Ⅱ期鼻咽癌的近期疗效观察

目的：探讨每周奥沙利铂同期化放疗与单纯放疗治疗Ⅱ期鼻咽癌的近期疗效。方法选取60例Ⅱ期鼻咽癌患者为研究对象。将所有患者随机均分为同期放化疗组（试验组,n=30）和单纯放疗组（对照组,n=30）。2组均采用根治性常规分割放疗。试验组放疗期间给予奥沙利铂70 mg/m 2(Ⅳ srip),每周1次,连续6周。结果采用意向性分析,分析2组疗效、治疗毒性及顺应性。结果2组病例的主要预后因素包括性别、年龄、活动状态、分期方法及临床分期等,均具有可比性。试验组和对照组鼻咽部肿物的完全缓解率分别为90.6%及82.1%,差异无统计学意义;颈部淋巴结的完全缓解率分别为88.9%及65.4%,差异有统计学意义（P<0.05）;不良反应方面,同期每周奥沙利铂化疗,并未明显增加放疗的急性局部毒性反应。所有不良反应经对症治疗,患者均能良好耐受。结论每周奥沙利铂单药同期放化疗的方式治疗I期鼻咽癌,可进一步提高患者局部控制,改善生存,患者耐受性好,值得进一步研究。     

增液解毒颗粒联合TP方案治疗转移性鼻咽癌的临床研究

目的:观察增液解毒颗粒联合TP方案化疗治疗转移性鼻咽癌的有效性和安全性。方法:将66例转移性鼻咽癌患者随机分为治疗组及对照组各33例,2组患者均予TP(紫杉醇+顺铂)方案化疗,治疗组在化疗基础上,给予增液解毒颗粒口服。治疗3周为1个疗程,2个疗程后评价疗效。结果:近期有效率:治疗组84.8%,对照组69.7%;治疗后生存质量评分:治疗组为87.3±8.1,对照组为76.3±6.5;治疗后2组免疫功能比较:NK、CD3+、CD4+及CD4+/CD8+,2组差异有统计学意义(P0.05);毒副反应在消化道反应、白细胞下降、疲倦乏力、外周神经毒性方面,治疗组低于对照组(P0.05)。结论:TP方案化疗联合增液解毒颗粒治疗转移性鼻咽癌疗效优于单纯化疗,且能改善晚期鼻咽癌患者的生存质量,提高免疫功能,减轻化疗毒性反应,起到增效减毒的功效。     

腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞

 【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of infection,MOI)具有量效关系。MOI为150倍时,转染效率>95%,转染VEGF后,MSCs可有效表达VEGF,9d时达到表达高峰(1125pg/mL),13d后仍可检测到VEGF的表达。转染VEGF对MSCs的增殖分化没有明显影响。【结论】腺病毒介导的VEGF基因可以有效的转染MSCs,MSCs是一种理想的基因载体细胞,其携带的VEGF基因可获得较高的表达水平。