重组人神经营养因子-4/5蛋白抗三氧化二砷神经毒作用

目的 :初步观察重组人神经营养因子 - 4/ 5 ( h NT- 4/ 5 )蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。 方法 :利用 h NT- 4/ 5蛋白具有抗神经毒性的特点 ,采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然 h NT- 4/ 5蛋白生物学活性的重组 h NT- 4/ 5蛋白 ,以不同水平的重组 h NT- 4/ 5蛋白 ( 0～ 10 0μl)与不同浓度的 As2 O3 ( 0～ 16 0μmol/ L )同时加入各组鸡胚前脑神经细胞和 PC12细胞培养液中共同孵育 2 4～ 48小时 ,观察其对染毒鸡胚前脑神经细胞存活和 PC12细胞突起生长的影响作用。 结果 :在鸡胚前脑神经细胞和 PC12细胞中与 As2 O3 共同培养 48小时后 ,对照组与实验组的细胞存活率差异有显著性 ,而且细胞存活率和突起数目随 h NT- 4/ 5浓度增高而提高和增加。 结论 :初步观察到重组 h NT- 4/ 5蛋白具有抑制 As2 O3 的毒性作用 ,为从基因工程途径寻找抗环境毒物因子提供了依据。     

痘苗病毒真核表达载体pMJ601的转化与鉴定

目的 对痘苗病毒表达载体ｐＭＪ６０１进行转化与鉴定,为进一步实施痘苗病毒为载体的基因治疗作必要的准备。方法 利用感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶酶切等多种基因工程技术对质粒ｐＭＪ６０１进行转化及鉴定。结果 琼脂糖凝胶电泳清楚地显示了ｐＭＪ６０１质粒３条带和Ｂａｍ ＨＩ或Ｈｉｎｄ Ⅲ酶切后的线性条带。结论 痘苗病毒表达ｐＭＪ６０１的转化与鉴定,为痘苗病毒载体系统的基因治     

超声定位下急诊经皮扩张气管切开术在插管困难失败患者中的应用

【摘要】 目的：探讨超声定位下急诊经皮扩张气管切开术在插管困难失败患者中的应用价值。方法：选取2015年10月---2020年10月宁波市中医院ICU收治的33例因插管困难失败转行急诊经皮扩张气管切开术（PDT）的患者,其中13例为解剖定位下行急诊PDT为常规组,20例为超声定位下行急诊PDT为超声组,观察两组患者急诊PDT成功率、一次穿刺成功率、穿刺次数、操作时间、氧合改善时间及术中术后并发症情况。结果：两组患者急诊PDT成功率均达到100%,超声组较常规组一次穿刺成功率更高、穿刺次数少、操作时间缩短、氧合改善时间降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组患者术后并发症情况,包括切口出血、气管食管瘘、皮下气肿、切口感染发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：对插管困难失败患者在超声定位下急诊经皮扩张气管切开术能提高穿刺准确性,缩短操作时间,更快纠正缺氧,但并未减少术后并发症发生率,临床中仍需精细化操作。     

五倍子粉敷脐治疗重症患者肠内营养相关性腹泻疗效观察

正肠内营养(enteral nutrition,EN)支持理念已得到国内外学者广泛认可,对重症患者进行EN支持可减少住院时间、降低相关感染率及病死率~([1])。腹泻是重症患者EN支持过程中最常见并发症,研究显示其发生率高达50%以上,严重干扰EN有效实施~([2])。EN相关性腹泻病因尚不明确,可能与重症患者急性生理与慢性健康(APACHE)Ⅱ评分增加、血清白蛋白水平降低、肠道菌群失调、EN制剂用量过大等有关。针对性的治疗主要包括纠正低蛋白血症、添加肠道益生菌、减少EN用量及使用蒙脱石散等药物,但起效慢,疗效欠佳,严重影响患者预后。     

重组IL-2痘苗病毒表达载体pMJ601的构建与鉴定

ＩＬ 2的全身大剂量用药虽能产生有效的抗肿瘤作用但毒性反应严重而限制了它的临床应用[1,2 ] 。随着基因治疗技术的发展 ,肿瘤的基因治疗尤其是免疫基因治疗已成为引人注目的领域 ,被认为是肿瘤生物治疗较有潜力的策略之一。基因治疗的方法使肿瘤局部释放ＩＬ 2 [1～ 3] 可避免上述危及生命的并发症。近年来 ,众多研究已用ｅｘｖｉｖｏ和 /或ｉｎｖｉｖｏ法ＩＬ 2基因治疗消化道肿瘤如结肠癌[1,4 ] 、肝细胞癌[2 ] 和胰腺癌[3] 。要使肿瘤细胞局部分泌高浓度的ＩＬ 2 ,需构建高效表达ＩＬ 2基因的载体系统。为此 ,我们构建重组ｈＩＬ 2基因…     

重组人神经营养因子-4/5蛋白抗砷、汞神经毒作用的初步研究

为观察重组ｈＮＴ－４／５蛋白对三氧化二砷、溴化汞毒性的抑制作用。将具有天然蛋白活性的重组ｈＮＴ－Ｔ／５蛋白,加入到被不同浓度的Ａｓ２Ｏ３、ＨｇＢｒ２染毒的各组鸡胚前脑神经细胞培养液中共同孵育,结果表明对照组与实验组的细菌存活数差异有显著性,说明重组ｈＮＴ－４／５蛋白具有抑制Ａｓ２Ｏ３、ＨｇＢｒ２的毒性作用。     

人神经营养因子—4／5基因的克隆及序列测定

目的：从人胎盘组织基因组ＤＮＡ中,克隆人神经营养因子－４／５（ｈＮＴ－４／５）基因。方法：经ＰＣＲ扩增出的ＤＮＡ片段用ＰｓｔⅠ单酶切后,酶切图谱与文献报道一致。再将大量扩增后的目的ＤＮＡ片段连接于测序载体Ｍ１３ｍｐ１８,用手工测序和ＡＢＩ３７３Ａ ＤＮＡ自动序列分析仪自动测序。结果：两项分析结果都确证所得到的目的基因与天然ｈＮＴ－４／５编码序列一致。结论：首次成功地从人胎盘组织克隆出人神经营养因子     

小承气汤加减对重型颅脑损伤术后肺部感染影响的临床观察

目的观察小承气汤加减联合西医常规治疗重型颅脑损伤术后肺部感染的临床疗效。方法将67例重型颅脑损伤术后肺部感染患者随机分为治疗组(34例)和对照组(33例)。两组均给予西医常规治疗,治疗组加服小承气汤加减。两组疗程均为7天,观察临床疗效,比较相关生化指标,包括白细胞计数(WBC)、超敏C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)以及临床肺部感染评分(CPIS评分)的变化情况。结果①治疗组、对照组临床总有效率分别为93.33%和70.00%;组间临床疗效比较,差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P0.05)。②组间治疗3天后比较,PCT水平差异有统计学意义(P0.05);组间治疗7天后比较,WBC、CRP、PCT及CPIS评分水平差异有统计学意义(P0.05)。结论小承气汤加减联合西医常规治疗重型颅脑损伤术后肺部感染,疗效满意,可显著减轻肺部感染及炎症反应。     

电针足三里对脓毒症大鼠肠上皮细胞间紧密连接结构的影响

目的：研究电针足三里对脓毒症大鼠肠上皮细胞间紧密连接结构的影响及可能机制。方法：将60 只SD 大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、电针组各20 只,假手术组仅进行开关腹手术,模型组及电针组用盲肠结扎穿孔法（CLP） 造模,电针组造模后电针双侧足三里,连续3 d。观察大鼠一般情况及造模后3 d生存率, 于造模后3 d 各组取8 只存活大鼠, 留取肠组织电镜观察紧密连接超微结构, 免疫蛋白印迹（Western-blot）、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测闭合蛋白-3（Claudin-3）、闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、咬合蛋白（Occludin） 的蛋白表达及mRNA 表达,酶联免疫吸附法（ELISA） 检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 （IL-6） 浓度,并抽血测定FITC 标记葡聚糖40 （FD-40） 浓度和D-乳酸水平。结果：造模后3 d 模型组存活率60%,电针组存活率90%,较模型组明显升高（P＜0.05）。与假手术组比较,模型组血清FD-40 浓度、D-乳酸水平及肠组织TNF-α、IL-6 浓度升高（P＜0.05）,肠组织Claudin-3、ZO-1、Occludin 蛋白及mRNA 表达均降低（P＜0.05）;与模型组比较,电针组FD-40 浓度、D-乳酸水平及肠组织TNF-α、IL-6浓度均降低（P＜0.05）,肠组织Claudin-3、ZO-1、Occludin 蛋白及mRNA 表达均升高（P＜0.05）。结论：电针足三里能明显改善脓毒症导致的紧密连接结构病理损伤,上调紧密连接蛋白及mRNA 的表达,从而降低肠道通透性,其机制可能与抑制肠道炎性因子有关。     

电针“足三里”对脓毒症大鼠肠黏膜免疫屏障的影响及机制研究

目的:探讨电针“足三里”对脓毒症大鼠肠黏膜免疫屏障的影响及其可能机制。方法:SD大鼠按随机数字表法分为假手术组6只,模型组、非经非穴组、电针组各15只。以盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型。电针组大鼠于造模后给予电针双侧“足三里”,非经非穴组造模后给予电针非经非穴处,每次30 min每日1次,连续3 d。观察各组大鼠一般情况及造模后3 d的病死率;检测各组大鼠肠内细菌移位率;HE染色法观察肠黏膜病理形态学变化,TUNEL法检测肠黏膜淋巴细胞凋亡情况,流式细胞术检测CD4~+和CD8~+T细胞,酶联免疫吸附法检测肠黏膜IL-4和肠黏液sIgA含量,Western blot法检测小肠组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:电针组大鼠病死率为13.33%(2/15),模型组、非经非穴组均为46.67%(7/15),电针组较模型组、非经非穴组明显降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组肠内细菌移位升高(P<0.05),光镜下肠黏膜病理损伤严重,肠黏膜Chiu评分、淋巴细胞凋亡指数、小肠组织Bax表达均升高(P<0.05),小肠组织CD4~+、CD8~+T细胞百分比及肠黏膜...