骨宝丸对维甲酸诱导小鼠骨质疏松的防治作用及机制探讨

目的研究骨宝丸对维甲酸诱导小鼠骨质疏松的防治作用,并探讨相关作用机制。方法将雌性BALB/c小鼠分为正常组(Control)、模型组(Model)以及骨宝丸高剂量组(GBW-H)、中剂量组(GBW-M)和低剂量组(GBW-L)。实验第1～30天,模型组和骨宝丸各剂量组小鼠灌服维甲酸(100 mg/kg)建立骨质疏松模型,同时骨宝丸各剂量组小鼠灌服药物溶液进行防治。实验结束后,取小鼠股骨,称取质量、测量股骨直径和股骨长度;利用HE染色法在光学显微镜下观察股骨组织变化;利用Micro-CT检测骨密度;采用ELISA试剂盒检测血清中BMP-2、OC、BALP、P1NP分泌水平。结果骨宝丸对维甲酸导致的小鼠股骨的质量、直径、骨密度和骨髓组织减少有防治作用,而且骨宝丸对维甲酸诱导小鼠血清OC和P1NP分泌增加、BALP和BMP-2分泌减少均有拮抗作用。结论骨宝丸可防治维甲酸诱导的小鼠骨质疏松,其作用机制可能与保护BMP-2分泌进而促进骨形成有关。     

参环毛蚓对重金属镉离子耐受能力的考察

目的 考察参环毛蚓对重金属镉离子的耐受能力,为进一步探索参环毛蚓富集重金属机制提供实验依据。方法 在菜园土壤基础上设置7个组别的不同浓度的重金属镉污染环境,观察人工饲养条件下参环毛蚓在不同浓度镉离子环境中的生存状态,并利用原子吸收分光光度法分别测定参环毛蚓不同部位的镉离子量。结果 参环毛蚓在土壤镉离子量为 40 倍、50 倍两组养殖 7 d 后死亡;30 倍组在 10 d 以后也有两条死亡,其余各组生长情况良好;参环毛蚓体内镉离子浓度随土壤镉离子浓度递增而增加。参环毛蚓能够在土壤中镉离子浓度 12 mg/kg 以下生存良好,其体内脏器中镉浓度可高达 70～90 mg/kg。该浓度是中国对外贸易经济合作部发布的《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》中镉限量指标的 233～300 倍。结论 参环毛蚓对重金属镉离子的耐受能力极强,这可能是其药材重金属超标的重要原因之一。     

参环毛蚓对重金属镉离子耐受能力的考察

目的考察参环毛蚓对重金属镉离子的耐受能力,为进一步探索参环毛蚓富集重金属机制提供实验依据。方法在菜园土壤基础上设置7个组别的不同浓度的重金属镉污染环境,观察人工饲养条件下参环毛蚓在不同浓度镉离子环境中的生存状态,并利用原子吸收分光光度法分别测定参环毛蚓不同部位的镉离子量。结果参环毛蚓在土壤镉离子量为40倍、50倍两组养殖7 d后死亡;30倍组在10 d以后也有两条死亡,其余各组生长情况良好;参环毛蚓体内镉离子浓度随土壤镉离子浓度递增而增加。参环毛蚓能够在土壤中镉离子浓度12 mg/kg以下生存良好,其体内脏器中镉浓度可高达70~90 mg/kg。该浓度是中国对外贸易经济合作部发布的《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》中镉限量指标的233~300倍。结论参环毛蚓对重金属镉离子的耐受能力极强,这可能是其药材重金属超标的重要原因之一。     

一种大鼠腹腔肥大细胞分离方法

目的介绍一种密度梯度离心分离大鼠腹腔肥大细胞(RPMC)的技术。方法比较改良方法和原方法2种分离的细胞量、活性及纯度。台盼蓝染色检测细胞存活率;甲苯胺蓝染色检测肥大细胞纯度。将弃去密度梯度离心上液2 m(lA方法)与2.5 m(lB方法)比较,以分析弃去的细胞液的量与肥大细胞纯度的关系。用C48/80刺激分离的RPMC,检测细胞释放的β-氨基己糖苷酶和组胺以确定分离的RPMC脱颗粒活性;透视电镜扫描观察细胞。结果改良方法分离的细胞显著多于原方法分离的细胞数;两种方法分离的细胞存活率都在99%以上;肥大细胞纯度都在90%以上。C48/80刺激RPMC,分离的细胞释放大量的β-氨基己糖苷酶和组胺,高于空白对照组。电镜观察细胞具有明显的肥大细胞形态。结论改良的Percoll密度梯度离心分离大鼠腹腔肥大细胞的方法可行。     

四君子汤总多糖对化疗荷瘤小鼠脾脏和派氏结及肠系膜淋巴细胞的影响

目的研究四君子汤总多糖(SJZPS)对化疗荷瘤小鼠脾脏、派氏结(PPs)、肠系膜淋巴结(MLNs)淋巴细胞的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为对照组、肿瘤模型组,环磷酰胺(CY)化疗组和四君子汤总多糖治疗(CY+SJZPS)组。CY组和CY+SJZPS组每天腹腔注射CY20 mg.kg-1,CY+SJZPS组同时灌胃SJZPS 1g.kg-1,连续给药9 d。应用流式细胞术检测脾脏、小肠PPs和MLNs中T、B淋巴细胞比例、活化水平以及T细胞亚群的变化。结果 SJZPS能提高肠道PPs中B淋巴细胞的比例和活化水平,降低MLNs中CD4+/CD8+的比值,改善化疗所致的肠道黏膜免疫损伤;SJZPS能提高化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞中B淋巴细胞的比例,及T、B淋巴细胞的活化水平,同时降低CD4+/CD8+的比值以改善化疗荷瘤小鼠系统免疫功能,其中SJZPS对B细胞的作用更加明显。结论 SJZPS能有效拮抗化疗药物所致的小鼠肠黏膜免疫功能损伤,同时对整体免疫功能具有改善作用。     

大黄牡丹汤提取液对结肠炎小鼠的治疗及作用机制研究

目的 研究大黄牡丹汤提取液对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎小鼠的治疗作用。方法 TNBS/乙醇溶液一次性灌肠建立结肠炎小鼠模型,大黄牡丹汤提取液低剂量(0.5 g·L-1)、中剂量(1 g·L-1)、高剂量(2 g·L-1)3个不同剂量灌胃治疗6 d,通过观察小鼠一般情况及结肠病理学变化,检测大黄牡丹汤提取液对结肠炎小鼠的治疗作用。用流式细胞术检测外周血、派氏结、肠系膜淋巴结中Treg细胞的变化,ELISA检测小鼠外周血白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子(TGF-β)的变化。结果 与模型组比较,大黄牡丹汤提取液各组小鼠疾病活动指数(DAI)评分、大体评分、病理学评分都有降低趋势。中剂量组小鼠大体评分、病理学评分都明显降低(2.29±0.76,2.86±0.69 VS 5.86±0.90,5.86±1.07,P ＜ 0.05),外周血、肠系膜淋巴结、派氏结Treg细胞,外周血IL-10、TGF-β升高,差异有统计学意义(P ＜ 0.05)。结论 大黄牡丹汤提取液各剂量组对结肠炎小鼠均有一定的治疗作用,治疗的机制可能与提高Treg细胞水平有关。     

羧甲基茯苓多糖对巨噬细胞极化的影响

目的:探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CMP)对巨噬细胞活化、吞噬、分泌、一氧化氮(nitric oxide,NO)和炎症因子的影响。方法:体内实验,将Balb/c小鼠分为生理盐水组和CMP组,生理盐水组腹腔注射生理盐水,CMP组腹腔注射CMP溶液100 mg·kg~(-1),5 d后收集小鼠腹腔巨噬细胞,采用流式细胞术检测细胞吞噬功能。体外实验,将巨噬细胞RAW264.7分为空白组、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组和CMP低、中、高剂量组,并分别加入培养基,LPS(0.1 mg·L-1)和CMP(400,800,1 600 mg·L-1)共孵育48 h。流式细胞术检测巨噬细胞的活化标志分子CD86表达水平和吞噬功能,荧光显微镜观察巨噬细胞吞噬荧光微球情况。收集细胞上清液,Griess法检测NO分泌水平,流式细胞微珠阵列法(cytometric bead array,CBA)检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)的分泌水平。结果:体内实验结果显示,与生理盐水组比较,CMP组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均显著升高(P0.05)。体外实验结果显示,与空白组比较,CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞表达CD86分子水平显著升高(P0.05);荧光显微镜下观察到CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞吞噬2个以上荧光微球的数量明显增加,流式检测结果也表明CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数显著升高(P0.05);LPS诱导巨噬细胞分泌NO,IL-6,IL-10,MCP-1和TNF,然而CMP未见此效应,且NO,MCP-1和TNF分泌水平均低于空白组。结论:CMP可以刺激巨噬细胞活化,增强其吞噬功能,但不能促进巨噬细胞释放NO和炎症因子,因此推测其促进巨噬细胞向M2型极化。     

枸杞多糖通过调节免疫在肿瘤免疫治疗中的应用前景分析

以PD-1/PD-L1单抗为代表的肿瘤免疫治疗是目前为止最具前景的肿瘤治疗方法,但是还需要寻找新的策略以提高临床疗效。枸杞多糖是中药枸杞的主要活性成分,具有调节淋巴细胞、树突状细胞、巨噬细胞、红细胞和NK细胞等免疫细胞功能的作用。文献报道该多糖可以通过TLR受体激活树突状细胞和巨噬细胞,进而影响淋巴细胞的功能。基于此,人们发现将该多糖应用于多种动物肿瘤模型治疗有良好效果,并发现其在人体肿瘤放化疗中具有减毒增效的作用。最新的研究发现枸杞多糖对小鼠肾细胞癌和肝癌的免疫治疗具有增效作用。这些研究结果表明枸杞多糖通过调节免疫在肿瘤免疫治疗中具有良好的应用前景。