hTGF-β1基因增强组织工程化髓核修复退变腰椎间盘的实验研究

目的：探讨人转化生长因子-β1（hTGF-β1）基因修饰山羊骨髓基质干细胞（BMSCs）为种子细胞构建的组织工程化髓核对山羊退变腰椎间盘的修复作用。方法：用粗针穿刺山羊L1/2～L5/6纤维环抽取髓核制作椎间盘退变模型,同时体外培养山羊自体BMSCs并分为3组：实验组以携hTGF-β1基因重组腺病毒（Ad/hTGF-β1）转染;阴性对照组以携lacZ基因腺病毒（Ad/LacZ）转染,空白对照组为未转染细胞。抽取髓核后15d,收集3组细胞与透明质酸（HA）复合为组织工程化髓核,以细针从椎间盘原穿刺孔回植入髓核中央。L1/2至L3/4依次植入实验组、阴性对照组及空白对照组细胞;L4/5注入不含细胞的HA;L5/6不注入任何物质。术后观察24周,定期行放射学、组织学和生化检测。结果：X线片椎间隙测量显示,24周时L1/2～L4/5的椎间隙狭窄均较L5/6明显延迟（P〈0.05）;4周以内L2/3间隙的X-gal染色保持阳性;组织学评估示L1/2～L4/5退变均较L5/6为轻;免疫组化示L1/2在4周内高表达hTGF-β1、CollagenⅡ和Aggrecan,但8周后L1/2至L4/5未见显著性差异;GAG定量显示整个观察期内L1/2～L4/5均高于L5/6,其含量依次为L1/2〉L2/3=L3/4〉L4/5;对4周时L1/2至L3/4髓核组织的RT-PCR显示,L1/2的hTGF-β1、CollagenⅡ及Aggrecan的mRNA表达显著增强（P〈0.05）。结论：体外构建的组织工程化髓核回植可延缓椎间盘早期退变的进程,经hTGF-β1基因增强的组织工程化髓核对退变延缓作用尤为显著,但均无法完全逆转整个椎间盘退变进程。     

5-氮-2'-脱氧胞苷联合应用顺铂对食管癌细胞株Eca109 bax和bcl-2基因mRNA表达的影响

目的检测5-氮-2'-脱氧胞苷(5Aza-d C)联合应用顺铂(CDDP)对食管癌细胞株Eca109中bax和bcl-2基因m RNA表达的影响。方法培养食管癌细胞株Eca109,通过加入不同浓度的5Aza-d C联合应用CDDP后,提取细胞总RNA,通过RT-PCR检测细胞中bax和bcl-2基因m RNA表达变化。结果低浓度5Aza-d C+高浓度CDDP联合用药组的bcl-2表达量与空白对照组、中浓度5Aza-d C用药组和低浓度CDDP用药组比较,差异均有统计学意义(均P0.05);低浓度CDDP用药组与高浓度CDDP用药组,中浓度5Aza-d C+高浓度CDDP联合用药组,bcl-2表达量差异有统计学意义(P0.05)。而bax的表达量各组间差异无统计学意义(P0.05)。结论在食管癌细胞株Eca109中,bax和bcl-2的表达量均较高。低浓度5Aza-d C+高浓度CDDP联合用药组,使bcl-2 m RNA表达明显低于空白对照组及单一用药组。高浓度的CDDP及高浓度CDDP联合不同浓度5Aza-d C用药组,与低浓度CDDP用药组相比,可使bcl-2 m RNA表达降低。而药物对bax m RNA的表达无影响。提示食管癌细胞株中联合用药使bcl-2 m RNA表达降低,可能是癌基因bcl-2的高表达与食管癌的发生有关,但细胞株对不同药物及浓度反应有差异。不同用药组bax的表达量无明显差异,提示bax的表达可能与食管癌的发生无直接关系。     

新疆哈萨克族食管癌中Survivin的表达及其与Caspase-9和Caspase-3基因的相关性

目的 探讨新疆哈萨克族食管癌中Survivin基因表达及其与半胱氨酸蛋白Caspase-9、Caspase-3基因的关系.方法 首先从52例哈萨克族食管癌标本中筛选出34例Survivin mRNA差异表达的标本(癌组织中的表达量高于远端无癌组织),采用RT-PCR、Western blotting方法检测半胱氨酸蛋白Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达.结果 1.Survivin在新疆哈萨克族食管癌组织高表达,差异具有统计学意义(P＜0.05);2.在Survivin差异表达的34例标本中,61.8％的肿瘤组织半胱氨酸蛋白Caspase-9低表达,并且Survivin mRNA与Caspase-9 mRNA的表达呈负相关(r=-0.244,P＜0.05);3.哈萨克族食管癌组织中,Caspase-9的蛋白活化降低(P＜0.05).结论 Survivin表达上调在新疆哈萨克族食管癌的发生、发展过程中发挥重要作用,Survivin可能通过直接抑制Caspase-9的转录以及抑制其活化水平发挥调控细胞凋亡的作用.     

我国西北地区首例HbUbe—Ⅱ的报告

1986年5月我们在我国“丝绸之路”地区进行血红蛋白(简称Hb)病群体普查时,在甘肃张掖发现1例相当于J组的快速异常Hb,化学结构分析证实为HbUb—Ⅱ。鉴于这种异常Hb变异体仅在日本和我国广东省发现3个家系,而本例首见于我国西北地区,特报告如下。 先证者曾某,男,15岁,汉族,甘肃张掖市人。无特殊主诉,发育营养尚佳,无容貌异常及贫血表现,除曾患急性菌痢外以往身体健康,体检无异常发现。血液学检查:血红蛋白量、红、白细胞计数和网织红细胞均在正常范围,血涂片红细胞形态和大小均正常。 血红蛋白的分析     

辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎大鼠血清一氧化氮和鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润的影响

目的探讨辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎(AR)大鼠血清一氧化氮(NO)及鼻黏膜嗜酸性粒细胞(EOS)的影响.方法40只大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、实验组,用卵清蛋白建立AR大鼠模型,通过对造模的大鼠灌服辛芷鼻敏胶囊及与同类药物对照,用酶法检测各组大鼠血清NO水平,HE染色,高倍镜下观察EOS的变化.结果实验组血清NO水平为(29.11±2.63) μmol/L,明显低于模型组[(57.28±3.10) μmol/L]及阳性对照组[(45.79±6.47) μmol/L] (P＜0.05).实验组大鼠的鼻黏膜组织病理学改变明显减轻,鼻黏膜上皮下偶见EOS.结论辛芷鼻敏胶囊可能通过减少血清NO水平,改善鼻黏膜EOS浸润,从而改善症状,发挥治疗作用.     

凋亡蛋白因子c-IAP2在新疆哈萨克族食管癌中的表达及临床意义

目的探讨新疆哈萨克族食管癌组织中凋亡蛋白因子c-IAP2 mRNA的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测30例哈萨克族食管癌患者中c-IAP2 mRNA的表达。结果 30例哈萨克族食管癌患者癌组织与正常组织（手术切缘无癌组织）中c-IAP2 mRNA表达阳性率分别为93.33%（28/30）与70.0%（21/30）。半定量光密度扫描后c-IAP2 mRNA表达量在哈萨克族食管鳞癌患者癌组织及正常组织中差异有统计学意义（P〈0.05）,但c-IAP2的表达与分化程度、病理分期及有无淋巴结转移均无相关性。结论 c-IAP2 mRNA在哈萨克族食管癌患者癌组织中的表达高于正常组织,表明c-IAP2通过抑制细胞凋亡,可能促进了哈萨克族食管癌的发生。     

新疆哈萨克族食管癌双向凝胶电泳研究

目的建立分辨率高和重复性好的哈萨克族食管癌癌组织及正常组织的电泳图谱,分析其差异表达的蛋白质,为进一步寻找癌标志物奠定基础。方法收集3对新疆哈萨克族食管癌癌组织/正常组织,提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳分离,获得蛋白质差异表达谱。结果共找到63种差异表达的蛋白,其中在癌组织中上调的有20种,下调的35种,6种蛋白质在正常组织中存在而癌组织中不存在,2种蛋白质只在癌组织中出现。结论对差异蛋白进一步进行质谱分析,将获得和新疆哈萨克族食管癌发病相关的蛋白质,这些数据将有助于深入研究哈萨克族食管癌的发病机制。     

新疆哈萨克族食管癌中survivin基因真核表达载体的构建

目的：探讨survivin基因真核表达载体的构建,研究它在新疆哈萨克族食管癌中的作用。方法：采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,经双酶切后、与真核表达载体pEGFP-N1相连后转入DH5a。结果：DNA测序证明获得了包含ORF全长的survivin基因,并成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。结论：构建真核表达载体成功,为进一步探讨survivin基因在哈萨克族食管癌中的作用奠定了基础。     

基质金属蛋白酶-7在哈萨克族食管癌中的表达及其意义

目的 观察哈萨克族食管癌及癌旁组织中基质金属蛋白酶-7的表达,探讨其在哈萨克族食管癌发生、发展,浸润转移中的作用.方法 采用RT-PCR方法检测MMP-7 基因mRNA在20例哈萨克族食管癌组织及其癌旁组织标本中的表达,选取mRNA水平差异组织标本采用Western-bolt方法检测其在蛋白水平的表达情况.结果 20例癌组织中有11例表达阳性,占55%,20例癌旁组织中有8例表达,占40%,其中癌组织表达量明显高于癌旁组织的有8例,占40%;MMP-7蛋白在癌组织中表达高于其相应癌旁组织.结论 MMP-7在哈萨克族食管癌的发生发展中起到一定的作用.     

Survivin基因在哈萨克族食管癌中表达的研究

目的 通过观察凋亡相关基因Survivin在哈萨克族食管癌癌组织及其癌旁组织中的表达来探讨Survivin哈萨克族食管癌发生中的作用.方法采用RT-PCR方法检测Survivin 基因mRNA在20例哈萨克族食管癌组织及其癌旁组织标本中的表达,选取mRNA水平差异组织标本采用Western-bolt方法检测其在蛋白水平的表达情况.结果 Survivin基因mRNA在20例癌组织中有10例表达,阳性率为50%,癌旁组织中仅有4例表达,癌组织与其对应的癌旁组织相比,Survivin基因的表达量均明显高于癌旁组织.Survivin蛋白的表达在癌组织与癌旁组织中无明显差异.结论提示Survivin基因的异常表达主要在转录水平,其对哈萨克族食管癌发生发展过程中的作用有待于进一步研究.