p21WAF1与p27KIP1真核双表达载体的构建鉴定及在胃癌细胞中的表达

目的 构建p21WAF1与p27KIP1真核双表达载体,体外转染胃癌7901细胞,观察其在胃癌细胞中的表达及相关特性.方法 提取人全血总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增p21WAF1和p27WAF1基因并将其分别克隆到真核双表达载体pIRES中构建重组质粒pIPES-p27KIP1-p21WAF1,经酶切和测序鉴定重组质粒.脂质体介导重组质粒plRES-p27KIP1.p21WAF1"转染胃癌7901细胞,收集并提取转染后12、24、48、72 h和5 d各细胞的总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各细胞中p21WAF1和p27KIP1在RNA水平的表达.带有绿色荧光蛋白的pIRES-EGFP作为对照.结果 RT-PCR扩增分别获得约500和600 bp大小的产物,重组质粒pIRES-p27KIP1.p21WAF1经酶切和测序鉴定证实为p21WAF1和p27KIP1基因.转染胃癌7901细胞48 h时转染率为68%.与空质粒对照组比较,重组质粒转染胃癌7901细胞12、24、48、72 h和5 d后FQ-PCR证实p27KIP1的Ct值(cycle threshold,Ct)分别减少8.2、10、10、7.4和6.7,p21WAF1的Ct值分别减少7.4、8.2、8.2、6.3和5.70其中24 h和48 h的Ct值减少最大.结论 真核双表达载体pIRES-p27KIP1.p21WAF1构建成功并能在胃癌7901细胞内高效表达.     

TNF-β+252单核苷酸多态性与胃癌恶液质的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-β（TNF-β）＋252基因单核苷酸多态性与胃癌病人癌性恶液质的关系.方法 105例营养不良胃癌病人,按照近6个月体质量的减轻率分成3组：A组,0～5%;B组,6%～10%;C组,〉10%.用PCR结合限制性内切酶检测胃癌病人及110例正常志愿者TNF-β＋252单核苷酸多态性.结果 TNF-β＋252A（TNFB2）出现的频率在胃癌组和对照组差异无显著性（P〉0.05）.在胃癌病人中,TNFB2出现的频率在A、B、C各组差异亦无显著性（P〉0.05）;恶液质病人TNFB2出现的频率与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）.结论 TNF-β＋252基因单核苷酸多态性与胃癌恶液质的发生无相关性.     

腹腔镜下大网膜囊肿切除一例

患者女,34岁。因右腹疼痛1 d入院。查体:右上腹压痛,未触及包块。CT示右侧腹腔内类圆形低密度影,大小约6 cm×6 cm×7 cm(图1)。患者曾于9个月前行“经腹腔镜右侧卵巢囊肿、阔韧带囊肿切除术”。病理示:(右侧阔韧带、卵巢)单纯性囊肿。全麻下行腹腔镜探查术。术中见右上腹有一约6 cm×6 cm×7 cm大小囊性肿物,表面光滑,部分被大网膜包裹。     

髂骨取骨术致盆、侧腹壁疝四例

髂骨取骨致盆、侧腹壁疝临床罕见。我们自1990～2 0 0 2年收治4例,现报告如下。临床资料1.一般资料:本组4例,疝位于左侧1例,右侧3例。患者均为女性,其中3例为多产妇。年龄5 8～75岁,平均6 6 5岁。1例有吸烟嗜好及便秘史,1例有慢性支气管炎病史,1例为外院修补术后复发患者。全部手术治疗,3例分别在发病后4、6、6个月手术,1例发病后1年在外院行疝囊颈结扎、局部肌肉腱膜缝合修补术后复发,3个月后再次手术。2 .临床表现:髂骨取骨、植骨术后2～4个月下床活动时,感取骨切口及下腹侧腹壁隐痛或胀痛不适,局部逐渐凸出,站立时明显,卧位消失。无嵌顿…     

大鼠肝硬化形成过程中胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA的表达及其意义

目的观察大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中内皮素A受体mRNA在胃黏膜微循环血管上的表达 ,探讨内皮素及其受体对肝硬化门静脉高压大鼠胃黏膜微循环的调节机制。方法应用mRNA原位杂交确定内皮素A受体的部位 ,并进行半定量分析。结果大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中门静脉及外周血浆内皮素水平随门静脉压力升高而降低。胃黏膜内皮素A受体mR NA主要在黏膜基底部的微循环前微动脉和后微静脉血管壁表达 ,其中动脉表达明显强于静脉。其表达与门静脉压力呈正相关 (r =0 86 9,P <0 0 5 ) ,与门静脉及外周血内皮素水平呈负相关 (r =-0 797、- 0 74 1,P <0 0 5 )。结论大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中外周及门静脉血浆内皮素水平进行性降低 ;胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA表达量增加 ,呈现上调趋势 ;内皮素及其受体mR NA表达变化可能与胃黏膜微循环功能障碍有关。     

贲门周围血管离断术后用多普勒显像观察门脉血液动力学改变45例报告

多普勒彩色血流显像合二维实时超声、复合多普勒、彩色多普勒为一体,能提供血流的多种空间信息,可准确地测定门脉系统的血流速度、血流量,判断血流方向,观察其交通支情况.自1987年9月至1991年12月,我们应用此技术随访观察45例肝硬化门脉高压症病人行贲门周围血管离断术后的门脉血液动力学变化.现总结报告如下.     

高血压心电图U波的临床意义

高血压为我国常见病与多发病，以体循环动脉压增高为主。临床观察所见高血压绝大多数属于原发性高血压。心电图分析表明后期左心室肥厚及劳损较多见，高血压早期心电图没有很多的变化。为此，我们对200例高血压患者的心电图资料进行分析、探讨。     

150例体位性T波改变的心电图分析

目的:探讨体位性T波改变在临床心电图中的意义.方法:取3组共150例,观察平卧位与直立位时的12导联心电图变化.结果:直立性T波改变在下壁T波改变组占76%,冠心病组占24%,正常组占18%.结论:体位性T波改变是一种正常的T波变异.