新型抗肿瘤药物组蛋白去乙酰化酶抑制剂

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)是一类新型的抗肿瘤药物,具有高效、低毒的特点, 其作用于肿瘤细胞后能够抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞周期阻滞,促进细胞分化或凋亡。目前该类药物已经在美国进入Ⅱ期临床研究。现综述HDACi的种类、生物学作用、抗肿瘤作用机制等的研究进展。     

新型抗肿瘤药物组蛋白去乙酰化酶抑制剂

组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）是一类新型的抗肿瘤药物，具有高效、低毒的特点，其作用于肿瘤细胞后能够抑制肿瘤细胞增殖，诱导细胞周期阻滞，促进细胞分化或凋亡。目前该类药物已经在美国进入Ⅱ期临床研究。现综述HDACi的种类、生物学作用、抗肿瘤作用机制等的研究进展。     

改良SD—PAGE法分析尿蛋白组成

目的：建立一种快速的尿蛋白组分分析方法。方法：将薄层垂直平板SDS－PAGE与高敏的银染色和微波技术相结合，建立改良SDS－PAGE法，快速分析蛋白尿组成，结果：此法缩短分析所需的时间，使整个分析过程在7h内就可以完成，并且提高蛋白条带的分辨带，使检测灵敏度达ng级水平。结论：改良SDS－PAGE法分析尿蛋白组成简便，快速，灵敏度高。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA阻断MAPK信号通路并诱导HL-60细胞凋亡

本研究旨在探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂-SAHA（suberoylanilide hydroxamicacid）诱导人急性髓性白血病细胞株HL-60凋亡的分子机制。采用MTT法,瑞氏-姬姆萨染色和Hoechst33342/PI荧光染色方法,检测SAHA对HL-60细胞生长的抑制作用及细胞的形态变化;通过流式细胞术、Western-blot方法测定HL-60细胞的周期变化以及多种信号蛋白的表达。结果表明：SAHA可以呈剂量时间依赖性抑制HL-60细胞的生长;经2μmol/L SAHA处理12-48小时,HL-60细胞显示细胞周期被阻滞于G0/G1期;经Hoechst33342荧光染色后细胞核出现明显的凋亡小体结构;Western blot检测证实,SAHA作用HL-60细胞后caspase3被激活,其底物蛋白聚ADP核糖聚合酶[po-ly（ADP-ribose）polymerase,PARP]发生剪切,细胞发生凋亡;对细胞凋亡相关信号转导通路P44/42 MAPK及PI3K/Akt检测结果表明,涉及MAPK信号通路的Raf及ERK激酶磷酸化受到明显抑制,而Akt及其下游mTOR激酶的活性没有明显改变。结论：SAHA对HL-60细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡实现,与细胞增殖相关的P44/42 MAPK信号通路被阻断是细胞凋亡发生的机制之一。     

半薄SDS-PAGE垂直式平板电泳法检测尿蛋白谱

蛋白尿是肾脏疾患的重要症状之一，其中蛋白的性质与构成（即尿蛋白谱）在诊断肾脏疾病及评估药物疗效等方面有着重要的参考价值。以往采用的蛋白电泳技术，如醋酸纤维薄膜、琼脂糖凝胶、免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）、等电聚集以及ＳＤＳＰＡＧＥ圆盘电泳等方法虽各具优点，但与临床诊断所需的大量尿标本检测，以及蛋白成分高分辨率要求相比还存在着差距。本文介绍的半薄ＳＤＳＰＡＧＥ垂直式平板电泳［２，３］，并结合高敏银染［４］和激光密度扫描的方法，能够快速有效地分析尿液中蛋白质成分。１　材料和方法１．１　…     

阻断PI3K信号通路显著抑制成骨前体细胞MC3T3-E1的分化

目的：研究PI3K信号通路对成骨前体细胞MC3T3-E1分化的调控作用。方法：首先通过Western印迹试验检测到PI3K信号通路参与成骨细胞分化的调控。应用PI3K激酶的特异性抑制剂LY294002药物阻断PI3K信号通路的活化，通过碱性磷酸酶(ALP)和von Kossa染色观察成骨前体细胞MC3T3-E1分化的改变。结果：Western印迹试验显示，成骨细胞分化过程中PI3K信号通路明显活化。阻断该信号通路的活化显著抑制成骨细胞碱性磷酸酶的活性，同时降低成骨细胞体外形成骨结节结构的能力。结论：PI3K信号通路参与了成骨细胞分化的调控，而这种调控作用是成骨细胞分化所必需的。     

胱抑素C测定在糖尿病肾病肾功能评价中的应用

目的探讨血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)检测在糖尿病肾病(DN)患者肾功能评价中的诊断价值.方法经临床及肾活检确诊的2型糖尿病、DN患者83例.免疫比浊法测定血清Cys-C浓度.同时测定血肌酐水平(SCr)、BMI数值、肾小管功能指标(NAG酶,RBP、尿渗量)、尿蛋白水平、血清白蛋白、尿酸水平、同位素99mTc-DTPA测定肾小球滤过率(GFR).分析不同肾功能状态下Cys-C,SCr、MDRD公式与ECT-GFR的相关性.进一步根据肾小管功能指标、蛋白尿程度、血清白蛋白水平、代谢指标(血清尿酸、BMI)分组,分析Cys-C、SCr与GFR的相关性差别.以ECT-GFR为标准,作Cys-C、SCr的受试者工作特性曲线(receiver operator characteristic curve,ROC),并求其曲线下面积(area underthe curve,AUC).结果(1)Cys-C、SCr与ECT-GFR的Pearson相关系数r分别为-0.740和-0.663(P＜0.01),Cys-C与GFR的相关性较SCr更好.GFR≤60 ml/min时,Cys-C、MDRD-GFR、SCr与GFR的相关系数r分别为-0.798,0.760,-0.716(P＜0.01),Cys-C与GFR的相关性优于SCr和MDRD公式;GFR＞90ml/min时,Cys-C、SCr与GFR的相关系数r分别为-0.561 vs-0.465(P＜0.05).Cys-C与GFR的相关性优于SCr.(2)患者肾小管功能受损状态下NAG酶＞20 u/g·cr时,Cys-C、SCr与GFR的相关系数r分别为-0.660 vs-0.595(P＜0.01);RBP＞2 mg/L时,r值分别为-0.672 vs-0.635(P＜0.01);尿渗量≤600 mOsm/kg·H2O时,r值分别为-0.696 vs-0.663(P＜0.01).Cys-C与GFR的相关性均较SCr更好.(3)尿蛋白＞1g/24h时,Cys-C、SCr与GFR的相关系数r分别为-0.704 vs-0.649(P＜0.01).血清白蛋白≤35g/L时,r值分别为-0.635 vs-0.581(P＜0.01).Cys-C与GFR的相关性均较SCr更好.(4)不同血清尿酸、BMI状态下,Cys-C与GFR的相关系数r值不受影响.ROC中曲线下面积(AUC),Cys-C、SCr分别为0.915 vs0.902(P＜0.01),仍以Cys-C更灵敏和特异.结论DN患者各期(包括早期高灌注期、肾功能损害期),Cys-C与GFR之间的相关性优于SCr、MDRD公式.DN患者出现肾小管功能损害时,Cys-C与GFR仍有较好的相关性.DN患者出现蛋白尿、血清白蛋白下降时,Cys-C仍可较好地反映肾功能.而代谢性指标不影响Cys-C与GFR的之间的相关性.Cys-C可作为一个更好的反映DN患者肾功能变化的内源性指标.     

尿视黄醇结合蛋白判断肾小管—间质损伤的临床意义

目的探讨尿视黄醇结合蛋白(RBP)测定在判断肾小管-间质损伤中的临床意义.万法144例经肾活检明确诊断的肾炎患者,根据病变肾小管-间质累及的程度半定量分为轻度、中度、重度三组.分别测定其尿RBP、溶菌酶、NAG酶,分析三者之间的相关性、敏感性以及与小管-间质损伤的病因及病变程度的关系.结果尿RBP水平与尿溶菌酶具显著相关性(r=0.462,P＜0.01),与尿NAG酶无明显相关性(r=0.013,P＞0.05).144例患者中RBP升高者104例(72.2%),溶菌酶升高者48例(33.3%),NAG酶升高者100例(69.4%).尿RBP升高者中80.8%患者的NAG酶,40.4%患者的溶菌酶同时升高;溶菌酶升高者中RBP同时升高者91.67%;NAG酶升高者中RBP同时升高者84%.尿RBP升高发生率明显高于溶菌酶(P＜0.01).尿RBP排泄与小管-间质病变严重程度相关,轻度、中度及重度病变三组分别为0.57(0.05～111.3)mg/L,4.84(0.06～200)mg/L,30.5(0.07～360)mg/L,具有显著性差异(P＜0.05).药物中毒性急性肾小管坏死患者尿RBP显著高于药物过敏性间质性肾炎,分别为59.5(1.85～360)mg/L、7.28(0.2～55)mg/L,P＜0.05.结论尿RBP较溶菌酶更能敏感地反映肾小管损伤及其程度,值得临床推广.     

髓内钉闭合置钉的临床应用进展

髓内钉广泛应用于治疗四肢骨干骨折,其临床应用将近80年,常用置钉方法有开放和闭合两种。目前主张采用闭合方法置钉。     

6 494例妇科门诊病人子宫颈人乳头瘤病毒基因型分析

目的分析南京地区妇科门诊病人感染宫颈人乳头瘤病毒（HPV）基因型的分布特征，为宫颈癌的防治提供支持。方法通过医院信息系统采集数据，分析妇科门诊经宫颈脱落细胞HPV基因型检测的病人6 494例相关数据。结果6 494例受试病人中HPV感染阳性1 882例，阳性率为28.98%。不同年龄组HPV感染阳性率间差异有统计学意义（P < 0.01），其中≤19岁组HPV感染阳性率为74.70%（62/83），均高于其他年龄组（P < 0.05）。受试病人以单一HPV感染（1 199/6 494，18.46%）为主，不同年龄段病人的单一HPV感染率间差异无统计学意义（P>0.05），而双重和多重HPV感染率间差异均有统计学意义（P < 0.01）。受试病人以高危型HPV感染率为主（21.96%，1 426/6 494）；24种基因型的HPV中，总体感染率排名前5位依次为HPV52、HPV16、HPV58、HPV51、HPV42，其中除HPV35感染率在各年龄组间差异无统计学意义外（P>0.05），其他各HPV基因型感染率在不同年龄组间差异均有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）。结论通过明确当地门诊病人的HPV感染基因型分布特征，可为宫颈癌的治疗和预防提供一定参考依据。