2型糖尿病中医(中西医结合)证治研究

1　概　述2型糖尿病的发病与胰岛素抵抗和胰岛B细胞分泌功能减退有关 ,是多种遗传和环境因素 (肥胖、高热量饮食、体力活动减少等 )共同作用的结果。其病理改变可引起全身代谢紊乱及大、中、小、微血管病变与神经病变 ,因此其并发症较多。常见的并发症有高血压、冠心病、缺血性脑血管病、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病足、糖尿病周围神经病变等。糖尿病因其典型的临床表现有“三多”(多食、多饮、多尿 )“一少”(消瘦 )的症状 ,因此可归属于中医消渴病的范畴。但临床也有不典型的表现 ,并非少见。 2型糖尿病不典型者相对较多见。根…     

抑郁症常见中医证候类型第一轮专家问卷分析

目的 :调查抑郁症常见中医证候类型。方法 :根据文献资料和预试结果 ,编制抑郁症常见中医证候类型专家问卷 ,向全国范围内遴选出的 10 2位专家发放问卷调查。结果 :在回收的 92份问卷中 ,5 0 %以上的专家认定五类常见证候。结论 :肝郁气滞证、肝郁脾虚证、肝郁痰阻证、心脾两虚证、肝郁血瘀证是抑郁症的备选常见中医证候。     

平肝潜阳方治疗前后高血压病肝阳上亢证大鼠肾上腺组织蛋白表达变化的蛋白质组学研究

目的：从蛋白质组学水平探讨大鼠高血压肝阳上亢证发生机制及平肝潜阳方治疗肝阳上亢证的分子机制，为治疗高血压肝阳上亢证寻找新的药物标志蛋白提供理论和实验依据。 方法：以自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）加灌服附子汤法制备高血压肝阳上亢证大鼠模型，二维凝胶电泳分离大鼠肾上腺蛋白质，获得差异表达蛋白质；利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）和数据库分析鉴定差异表达蛋白质。 结果：高血压肝阳上亢证大鼠模型复制成功，平肝潜阳法治疗后易激惹程度和结膜充血减轻，收缩压下降（P〈0．05，P〈0．01）。通过点检测后，发现12个具有明显表达差异的蛋白质斑点，经鉴定可以确认的蛋白质点有8个，其中2个蛋白点为同一蛋白。其中异柠檬酸脱氢酶、类固醇合成急性调节蛋白在模型组表达较正常组上调，在治疗组重新下调至前水平；铁轻链蛋白、Tu翻译延长因子、鸟苷酸解离抑制因子、黄素还原酶、Basic转录因子3在模型组表达较正常组下调。在治疗组重新上调至前水平。 结论：成功鉴定了高血压肝阳上亢证大鼠平肝潜阳方治疗前后肾上腺组织差异表达蛋白，为深入研究高血压病肝阳上亢证的病理机制及平肝潜阳方治疗的分子机制奠定了基础。     

偏头痛肝阳上亢型大鼠脾脏淋巴细胞的比较蛋白质组学分析

目的筛选与偏头痛肝阳上亢型相关的蛋白质，进一步揭示偏头痛肝阳上亢证的分子机制。方法用电刺激SD大鼠三叉神经节，并灌服附子汤的方法制造偏头痛肝阳上亢型模型。采用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离偏头痛肝阳上亢型大鼠脾脏淋巴细胞的总蛋白，PDQuest7．0图像分析软件识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图，搜索数据库鉴定蛋白质。结果鉴定到的10个差异蛋白分别为：氯通道蛋白-1、硫氧还蛋白过氧化物酶-I、硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ、专利蛋白W0979348序列、Rho GDP解离抑制因子α、肌动蛋白2／3复合物、神经微丝轻肽、蛋白酶体、热休克蛋白-27、膜联蛋白-A1。结论这些蛋白可能与偏头痛肝阳上亢证的形成有关，本实验为进一步揭示偏头痛肝阳上亢证的发病机制提供了新的线索。     

肝气郁结证证候量表的初步研究

目的初步编制中医肝气郁结证证候量表。方法通过对80例肝气郁结证受试者的测量(男性24例,女性56例),经相关系数法、Chronbach'sα系数法筛选出条目,男性肝气郁结证证候量表10项条目,女性肝气郁结证证候量表14项条目。结果各条目采用主成分因子分析法分析:男性肝气郁结证证候量表可提取2个因子,量表和因子的重测信度系数为0.749～0.814;Spearman-Brown分半信度为0.790～0.866;Chronbach'sα信度为0.806～0.848。女性量表可提取3个因子,量表和因子的重测信度系数为0.848～0.935;Spearman-Brown分半信度为0.683～0.934;Chronbach'sα信度为0.759～0.877。结论肝气郁结证证候量表具有良好的效度和信度,为肝气郁结证的研究提供了一个标准化的工具和方法。     

平肝潜阳法对偏头痛肝阳上亢型大鼠模型肾上腺组织蛋白质组的影响

目的探讨平肝潜阳法对偏头痛肝阳上亢型大鼠模型作用的分子机制。方法用电刺激SD大鼠三叉神经节的方法并灌服附子汤制造偏头痛肝阳上亢型模型。采用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离大鼠肾上腺组织的总蛋白，图像分析识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）获得相应的肽质量指纹图（PMF），搜索数据库鉴定蛋白质。结果得到分辨率及重复性较好的正常对照组、偏头痛肝阳上亢型大鼠、中药治疗组大鼠肾上腺组织的2-DE图谱，质谱分析鉴定得到其中的8个差异蛋白质点。结论平肝潜阳药物可能通过调节多种与能量代谢有关的蛋白和泛素的表达而起到治疗偏头痛肝阳上亢证的作用。     

甲状腺功能亢进肝阳上亢证大鼠下丘脑组织蛋白质差异表达的观察

目的利用蛋白质组学方法,观察甲状腺功能亢进(简称"甲亢")肝阳上亢证大鼠与正常大鼠下丘脑组织的双向凝胶蛋白图谱,寻找差异表达的蛋白质。方法左甲状腺素钠(L-T4)和附子汤灌胃造成甲亢肝阳上亢证模型,应用蛋白质组学技术比较模型组与正常组中下丘脑的差异蛋白质,结合生物信息学对其进行分析鉴定。结果两组蛋白斑点总体分布相似,主要分布在等电点pI 3～8,分子量Mr 14.4～75kD;分析发现,模型组与正常组相比有18个蛋白质上调和24个蛋白质下调,进一步质谱鉴定,其中7个蛋白质分别为NSFL1辅助因子、硫氧还蛋白、泛素羧基末端水解酶同工酶L1、血小板活化因子乙酰基水解酶IB—γ亚单位、谷氨酸脱氢酶前体、二氢嘧啶酶相关蛋白2和微管蛋白。结论模型组与正常组相比,有18个蛋白质点上调,有24个蛋白质点下调,经质谱鉴定了其中部分蛋白质.蛋白质的变化可能与甲亢肝阳上亢证的形成密切相关。     

肝火上炎证证候量表的初步编制

目的:初步编制中医肝火上炎证证候量表,并对自评量表所收集的数据进行统计分析。方法:①病种经流行病学调查,选取2005-07/2006-07湘雅医院、湘雅三医院的门诊和住院患者110例,其中肝火上炎证80例,肝阳上亢证30例。诊断标准:中医辨证按全国标准进行,西医诊断参考最新版眼科学和内科学。两类证候患者在性别、年龄、文化程度上经统计学检验差异无显著性意义(P>0.05),对本实验知情同意。②根据全国标准的中医病证治法术语,参照第五版中医诊断学,并在本研究所编制的中医肝脏证候临床辨证标准及症状程度分级量化的基础上确立条目的编制与评分。初步编出胸胁灼痛、急躁易怒、目赤、面红、头晕胀痛、耳鸣、耳内肿痛或流脓、突发耳聋、口苦、口干欲饮、衄血、失眠、多梦、大便秘结、尿黄、尿少这16项可操作性条目,各条目均分为无、轻度、中等、偏重、严重5级,依次计0～4分。并将量表分为肝火上攻维度和肝火内扰维度,各维度分数按累积得分法计算。③16项条目通过标准差法、逐步回归法、Cronbach’sα系数法和相关系数法进行筛选分析,符合以下2项或2项以上标准的条目予以删除:标准差<0.6;标准回归系数<0.95;Cronbach’sα系数>0.8;相关系数<0.3。量表编制完毕后进行信度和效度检验。结果:实验选取肝火上炎证患者80例及肝阳上亢证患者30例,均进入结果分析。①条目筛选结果:耳内肿痛或流脓、尿少这两项条目被删除,16项条目的量表削减为14项。②量表信度检验结果:两个维度重测信度的相关系数,肝火上炎证患者为0.706～0.897,肝阳上亢证患者为0.807～0.834,表明量表跨时间的一致性。条目和各维度分的分半信度系数为0.892～0.908,表明量表内部结构的一致性。两个维度的Cronbach’sα系数为0.897～0.933,证明量表跨指标的一致性。③量表效度检验结果:主成分因子分析结果表明,肝火上攻因子、肝火内扰因子、肝火上攻 内扰因子共解释总方差的71.713%,代表量表的总体结构。与肝火上炎证比较,肝阳上亢证在肝火上攻维度、肝火内扰维度方面差异均有显著性意义(t=13.456～19.360,P均<0.01)。结论:肝火上炎证证候量表具有良好的信度和效度,为肝火上炎证的研究提供了一个标准化的工具和方法。     

天麻钩藤饮对偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的影响

目的：利用双向凝胶电泳和质谱技术，分析天麻钩藤饮治疗前后偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑的蛋白质表达的差异。方法：实验于2005—03／2006-04在中南大学湘雅医院中西医结合研究所、湘雅医学院肿瘤免疫与蛋白质组学实验室和卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室进行。①取SD大鼠20只，用附子汤连续灌胃21d复制肝阳上亢证动物模型，复制成功后给大鼠皮下注射硝酸甘油注射剂10mg／kg制备大鼠实验性偏头痛模型。②造模成功后将大鼠随机分为模型组和治疗组2组，每组10只。模型组于造模第22天处死；治疗组自第22天起灌服天麻钩藤饮（由天麻、钩藤、石决明、黄芩、泽兰、白芥子组成，中南大学湘雅医院中药房提供）10mL／（kg&;#183;d），连续14d，然后处死，分离出下丘脑。③通过对下丘脑组织蛋白质的提取，经双向电泳，Pdquest软件分析，进行蛋白质点原位酶解及质谱分析。结果：20只大鼠进入结果分析。①天麻钩藤饮治疗前后大鼠的总蛋白质的分布模式非常相似，以p14～8，M，（20～75）&;#215;10^3范围的蛋白质斑点分布最多。经PDQuest 7．0软件分析后得出，在相同条件下识别的蛋白质斑点数分别为模型组（443&;#177;25）个，治疗组（530&;#177;27）个。②用肉眼可区分9个表达上调和下调的蛋白质斑点，将这9个蛋白质斑点进行酶解和质谱分析，所得结果在网上搜寻，其中有5个点的蛋白质与之匹配。结论：经天麻钩藤饮治疗后偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的表达上具有差异，而所鉴定的这5个蛋白质可能与天麻钩藤饮的治疗机制有关。