尿培养病原菌分布及耐药性分析

目的了解医院门诊和住院患者尿培养中病原菌分布及耐药性,为临床治疗提供参考依据。方法 651株病原菌分离自2011年1月-2012年12月医院门诊和住院患者的尿液标本,采用MicroScan WalkAway-plus全自动微生物鉴定和药敏分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,采用WHONET5.6软件进行统计分析。结果共分离病原菌651株,检出排前3位依次为大肠埃希菌、粪肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌,分别占46.2%、16.6%、8.5%;301株大肠埃希菌中有219株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),占72.8%;大肠埃希菌对阿莫西林/克拉维酸、阿米卡星、亚胺培南较为敏感,耐药率为12.0%、9.0%和1.3%;132株肠球菌属中发现2株耐万古霉素肠球菌(VRE),均为粪肠球菌,万古霉素对这两株VRE的MIC为32³26mg/L,粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素和利奈唑胺的耐药率均较低;分离的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中,最常见的是表皮葡萄球菌占50.9%;55株CNS中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率为65.5%,CNS对呋喃妥因、克林沙星、利奈唑胺、利福平、万古霉素较敏感。结论临床应根据尿培养药敏结果合理应用抗菌药物,控制耐药率的上升。     

金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlM的体外抗菌效应初步探讨

目的通过基因工程技术获取金黄色葡萄球菌（ ATCC25923）自溶素片段AtlM重组蛋白（ rAtlM）,初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank 中金黄色葡萄球菌atlM基因序列（ AC：D17366）设计合成特异引物,采用PCR技术扩增相应的序列并构建重组表达质粒pET-32а（＋）/atlM,经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的rAtlM;采用微量肉汤稀释法测定rAtlM对ATCC25923及其苯唑西林诱导耐药株的最低抑菌浓度（ minimal inhibitory concentration ,MIC）;体外试验测定rAtlM对ATCC25923菌株及其耐药株的抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET-32а（＋）/atlM,表达的重组蛋白AtlM对ATCC25923标准株和耐药株的MIC分别为8μg/ml和64μg/ml。体外抑菌试验显示rAtlM作用于ATCC25923标准株和耐药株1 h后即对细菌生长具有抑制作用（ P值分别为0．004和0．026）,对标准株作用持续到5 h测定点（P＝0．012）,对苯唑西林耐药株作用持续到3 h测定点（P＝0．001）,5 h后与未加药物的对照组相比差异无统计学意义（P＝0．102）。结论50μg/ml的rAtlM对金黄色葡萄球菌（ ATCC25923）及苯唑西林耐药株初步显示出一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性。     

尿内毒素检测在尿路感染中的诊断价值

目的通过尿液中内毒素水平和尿细菌培养结果作比较,研究其在尿路感染中的诊断价值,以寻找尿路感染时早期、准确的诊断方法,指导疗效。方法采用动态浊度法鲎试验定量检200份尿液中的内毒素水平,同时进行常规尿培养和鉴定,采用SPSS17.0软件分析检测结果,采用t检验比较不同培养结果之间内毒素检测情况。结果革兰阴性菌组的内毒素结果明显高于革兰阳性菌组、真菌组和空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论尿内毒素检测是一种快速,可靠的诊断革兰阴性杆菌引起尿路感染的诊断方法,并且对尿路感染用药患者有更好的指导意义。     

2011—2020年上海地区肠球菌属细菌耐药性变迁

目的 了解2011—2020年上海地区临床分离肠球菌属细菌对各类抗菌药物的耐药性变迁.方法 按照上海市细菌真菌耐药监测网统一方案进行肠球菌属细菌的抗菌药物敏感性试验.结果 2011—2020年共分离到非重复肠球菌属细菌113391株,主要为粪肠球菌与屎肠球菌,分别占54.5％和40.1％.菌株主要分离自尿液标本.10年...     

老年肺心病的多脏器功能衰竭的临床观察

慢性肺源性心脏病(CPHD)为我国北方多发病,尤其并 发多脏器功能衰竭(MSOF)时死亡率更高。且受累器官越 多,程度越重,其死亡率也越高,本文观察24例CPHD并发 两个脏器功能衰竭者死亡率为21%,3个脏器功能衰竭死亡 率52％,3个以上脏器功能衰竭死亡率83．33%,故在防治 MSOF中应十分注意。     

360例肺炎患者抗菌药物临床应用分析

抗菌药物是临床上使用最广泛的药物之一,可有效治疗感染性疾病。但近年来随着抗菌药物的大量使用,甚至是滥用,使得耐药菌株不断增多[1],尤其是多重耐药菌株的出现,给临床治疗带来了极大的困扰。为了保障患者用药的安全,防止细菌耐药过快增长,本研究对复旦大学附属中山医院青浦分院呼吸科360例肺炎患者抗菌药物使用情况进行分析,以了解病原体对临床常用抗菌药物的耐药现状,保证抗菌药物的合理使用。     

金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlG体外抗菌效应探讨

目的 通过基因原核表达技术获取金黄色葡萄球菌(ATCC25923)自溶素片段AtlG重组蛋白,初步探讨其体外抗菌效应.方法 根据GenBank中的atlG基因序列设计合成特异引物,采用PCR技术以金黄色葡萄球菌的基因组为模板扩增相应atlG基因序列;分别构建克隆载体PMD19-T-atlG和表达载体pET-32a(+)/atlG;构建的表达载体经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的重组蛋白AtlG;采用微量肉汤稀释法测定AtlG对金黄色葡萄球菌及其苯唑西林耐药株的最低抑菌浓度(MIC),动态测定金黄色葡萄球菌及其耐药株对AtlG的药物敏感性,初步探讨重组蛋白AtlG的体外抗菌活性.结果 成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/atlG,表达的重组蛋白AtlG对金黄色葡萄球菌标准株和苯唑西林耐药株的MIC分别为16 μg/ml和64 μg/ml;相比于未加药物的对照组,rAtlG对标准株作用1h后细菌数显著降低(P=0.045),抑菌效果持续到5h测定点(P=0.006);对苯唑西林耐药株作用3h后显示出抑菌效果(P=0.003),5h后与对照组相比差异无统计学意义.结论 50μg/ml的rAtlG对金黄色葡萄球菌标准株抑菌作用发生快、持续时间长,对苯唑西林耐药株也有一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性.     

肺炎链球菌菌体蛋白LytA和CbpA对感染小鼠的诊断价值

目的 通过基因工程技术获取肺炎链球菌自溶素(autolysin,LytA)和胆碱结合蛋白A(choline binding protein A,CbpA),探讨其对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断价值.方法 根据GenBank中lytA和cbpA基因保守序列设计合成特异性引物,采用PCR技术从肺炎链球菌基因组中扩增lytA和cbpA保守序列片段;经由IPTG诱导并通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA和CbpA;Western blot测定表达蛋白的抗体结合活性.以LytA和CbpA为抗原,建市ELISA反应模式测定感染小鼠血清中相应的IgG和IgM抗体,评价诊断价值.结果 成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/lytA和pET-32a(+)/cbpA,表达的重组蛋白LytA和CbpA具有较好的抗体结合活性.实验组小鼠(肺炎链球菌感染组)IgM和IgG类抗LytA抗体滴度高于对照组(止常对照组和乙型链球菌感染对照组),差异有统计学意义(P<0.05),CbpA抗体与正常对照组差异有统计学意义,与乙型链球菌感染组差异无统计学意义(P>0.05).CbpA蛋白对感染小鼠诊断的敏感性较高(IgG:83.3%;lgM:75.0%),而LytA特异性较高(IgG:100%;IgM:100%).结论 协同利用重组蛋白CbpA诊断敏感性及LytA的特异性,对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断具有一定价值,为进一步用于临床检验奠定基础.

Abstract：

Objective To obtain the pneumococcal autolysin(LytA)and choline binding protein A(CbpA)by prokaryotic expression system and investigate their diagnosis for infection caused by Streptococcus pneumoniae.Methods The specific primers were designed according to lytA and cbpA of Streptococcus pneumoniae gene sequence.lytA and cbpA were amplified by PCR form the pneumococcus genome.After IPTG inducing,the recombinant proteins were purified by electroeluting of bag filter,detected by SDS-PAGE and Western blot.Serum lgG and IgM antibodies accordingly of BALB/c mice infected with Streptococcus pneurnoniae were detected by ELISA.Results The recombinant plasmid pET-32a(+)/lytA and pET-32a (+)/cbpA were constructed successfully.Fusion proteins LytA and CbpA were expressed and displayed expected antigenicity.IgM and IgG antibodies level anti LytA were significantly higher than the control group (infections with B Streptococcus group and healthy mice),(P<0.05),but antibodies level anti CbpA did not increase as compared with group infected with B Streptococcus(P>0.05).Diagnostic sensitivity of CbpA was 83.3%(IgG)and 75.0%(IgM).Diagnostic specificity of LytA was 100%(IgG and IgM).Conclusion The synergistic use of specificity of LytA and sensitivity of CbpA may be worthy of serological diagnosis for Streptococcus pneumoniae infection,and may be used for further clinical test.     

分析宫腔内占位性病变超声及非接触性宫腔镜诊断价值及应用体会

目的:系统探究宫腔内占位性病变超声及非接触性宫腔镜诊断价值。方法:选取2019年3月-2020年2月于我院的宫腔内占位性病变患者共80例,通过随机抽样方式将80例患者随机分为治疗组和对照组。其中,对照组40例患者行常规宫腔镜检查,治疗组40例患者行超声定位阴道内镜检查,比较两组检查时间、患者术后感染情况、疼痛评分等参数,并将超声定位阴道内镜诊断结果与"金标准"病理活检结果进行对照分析。结果:(1)治疗组患者的平均检查时间为3.4±0.3 min,显著低于对照组5.2±0.5 min(P<0.05);(2)治疗组患者的VAS疼痛等级评分为1.6±0.4分,显著低于对照组4.7±0.9分(P<0.05);(3)治疗组术后感染复发率为0%,对照组术后感染复发率为5.00%(2/40),两者之间的差异具有统计学意义(P<0.05);(4)80例患者均平行送病理活检,诊断结果为子宫内膜息肉40例,子宫黏膜下肌瘤27例,子宫内膜增生12例,子宫内膜癌1例,其中对照组诊断准确率为80.0%,治疗组准确率为92.5%,经超声定位阴道内镜的结果准确率显著高于常规宫腔镜检查(P<0.05)。结论:超声定位指导下的阴道内镜检查可显著降低患者疼痛,缩短检查时间,并具有直观、准确等优势,较之于常规宫腔镜检查更具有实用性,值得在临床大面积推广。     

2019年上海市二级医院细菌耐药监测

目的了解2019年上海市二级医院临床分离菌对抗菌药物的耐药性。方法对21所二级医院(包括6所三乙医院)临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按上海市细菌真菌耐药监测网统一监测方案进行抗菌药物敏感性试验。按2019年美国临床和实验室标准化协会(CLSI)文件标准判断结果。结果收集2019年1-12月上述医院临床分离菌共48650株,其中革兰阳性菌12409株,占25.5%,革兰阴性菌36241株,占74.5%。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和其他凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株(MRSA、MRSE和其他MRCNS)的平均检出率分别为49.6%、78.4%和79.9%。MRSA和MRCNS对大多数测试药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株(MSSA和MSCNS)。葡萄球菌属中未见万古霉素耐药株。肠球菌属中粪肠球菌对多数受试抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠球菌,粪肠球菌对利奈唑胺耐药率0.4%,屎肠球菌对万古霉素耐药率为0.3%。流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌检出率分别为2.5%(1235株)、0.4%(217株)和0.5%(238株),流感嗜血杆菌产β内酰胺酶率为51.3%。肺炎链球菌非脑脊液分离株中以成人分离株为多,占61.7%,成人中青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)检出率为4.5%(6/132),儿童中未发现PRSP菌株。肠杆菌目细菌对碳青霉烯类抗生素较敏感,多数菌属对美罗培南耐药率均低于4%,克雷伯菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为23.6%和23.2%,沙雷菌属对两药耐药率分别为21.4%和16.0%。不动杆菌属细菌对上述两药的耐药率分别为52.1%和53.2%,铜绿假单胞菌对两药的耐药率分别为22.1%和20.5%。结论2019年上海市二级医院细菌耐药性监测显示:其菌种的分布和耐药性与三级医院大致相仿,临床常见细菌的耐药率和MRSA、碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等耐药菌株的检出率较高,面临细菌耐药增加的严重威胁,应引起足够重视;合理使用抗菌药物和规范治疗是当务之急。