促肝细胞生长素对慢性活动性肝炎病变的影响

笔者收集了23例经促肝细胞生长素治疗的慢性活动性肝炎患者,对比治疗前后的肝脏穿刺活检标本的光镜和电镜观察结果。经促肝细胞生长素治疗后,细胞浆疏松、气球样变、嗜酸性变等变性改变和不同类型的坏死均有不同程度减轻。特别是碎屑状坏死范围缩小,炎性细胞浸润减少,再生现象明显。肝细胞膜间隙     

病毒性肝炎患者检测血清肝脏特异性膜脂蛋白（LSP）的意义

本文检测94例各型病毒性肝炎患者血清肝脏特异性膜脂蛋白(LSP)的阳性率及水平,二者的高低顺序均为 AH>CAH>CPH。急性肝炎中 LSP 阳性组的 SGPT 水平显著高于LSP 阴性组。随访3例急性肝炎的血清 LSP 均在发病3周内转阴。检测抗-LSP 和 LSP 同时阳性频率为:CAH(72.72%)>AH(58.33%)>CPH(11.76%)提示二者均可作为肝损害指标、病情预测及判断预后的指标。     

新的人抗HBsAg抗体Fab cDNA的克隆及序列分析

目的 从已构建的人抗－ＨＢsAg噬菌体抗体库中筛选出结合乙肝表面抗原（ＨＢsAg)的特异的人噬菌体抗体（Ｆab段）,并进行基础序列分析。方法 对噬菌体抗全库进行三轮“吸附－洗脱－扩增”的筛选,使特异性噬菌体抗体得到了富集,ＥＬＩＳＡ实验和ＥＬＩＳＡ竞争抑制实验鉴定出乙肝表面抗原的特异性抗体,同时对筛选出的克隆进行基因序列分析。结果 得到与乙肝表面抗原特异结合的抗体,并通过基因序列分析证明为抗乙肝ＨＢsAg的抗休天经地义人得到的抗惭肝ＨＢ－sAg的特异抗体为下一步表达纯化工作奠定了基础。     

重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺研究

目的研究表达重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺。方法首先采用摇瓶培养,对培养基配方、pH值、诱导表达时机和诱导剂量进行优化,确定基本发酵参数,然后在30L发酵罐上进行中试规模发酵培养。结果在摇瓶培养时,发现含有甘油和微量元素等成分的改良培养基效果明显优于LB培养基和2×YT培养基,另外,工程茵的最佳pH值为7.0,最佳诱导时机为对数中期,最佳诱导剂浓度为0.4mmoL/L异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖,最佳诱导时间为4h,将摇瓶培养确定的关键参数应用到30L发酵罐中,控制溶氧大于30%,进行3批发酵试验,发现发酵产物的湿菌产量可达58-61.9g/L,目的蛋白质表达量可达28.9%-31.2%以上。结论建立了工程菌M15[pQE-scFv]的中试发酵工艺,为进一步开发打下良好基础。     

人源抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体的构建

目的构建以人HBsAg单链抗体(HBScFv)为导向作用、α干扰素为治疗作用的融合蛋白酵母表达载体pPICZ-αB/ScFv-IFN-α。方法通过重叠PCR构建目的蛋白质基因,再亚克隆到酵母表达载体pPICZαB中,DNA测序后,转化巴氏毕赤酵母宿主菌GS115 ,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定重组酵母,重组酵母经甲醇诱导后,通过SDS PAGE分析鉴定表达产物。结果DNA测序结果显示构建的目的基因片段(HBScFv IFN-α)的序列与原设计序列相符合;菌落PCR结果显示目的基因已整合到酵母菌中;诱导表达后,SDS PAGE结果显示在相对分子质量约4 4 0 0 0处可见目的蛋白质表达带。结论成功构建了抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体     

布鲁氏菌PFGE分子分型的条件优化

[目的]将PFGE方法应用于布鲁氏菌分型研究,探索建立布鲁氏菌PFGE分型的最优化方法。[方法]在用PFGE方法进行布鲁氏菌基因分型的研究中,针对不同内切酶、酶切的浓度和时间、脉冲时间等影响PFGE分型结果的因素进行优化,利用优化后的条件对布鲁氏菌19株标准菌株进行分型研究。[结果]在布鲁氏菌的PFGE分型研究中,选择XbaI为内切酶、酶切浓度为96u/200μl、酶切时间为4h、脉冲时间为2～25s为PFGE电泳的优化条件,在分析的19株布鲁氏菌标准菌株中,6种布菌的PFGE图谱各不相同,但PFGE不能将种内不同生物型布菌完全区分开来。[结论]PFGE方法可用于布鲁氏菌的基因分型的研究,是对传统分型方法一种较好的补充。     

肝移植术后早期胸腔积液的诊治

胸腔积液是肝移植术后常见并发症,本文回顾性分析我院2004年1月至2006年6月37例肝移植患者术后胸腔积液发生情况,旨在完善肝移植术后胸腔积液的诊治效果,报告如下.     

布鲁菌脉冲场凝胶电泳图谱分型方法建立

目的 建立我国95株布鲁菌的染色体DNA脉冲场凝胶电泳图谱,进行布鲁菌的分子遗传学分类鉴定.方法 选择我国不同地区、不同时限分离的布鲁菌100株(包括19株标准布鲁菌株),应用SeaKem Gold琼脂糖胶块纯化布鲁菌完整的染色体DNA,限制性内切酶XbaI消化后,进行脉冲场凝胶电泳分离(PFGE).结果 XbaI酶切布鲁菌基因组DNA后,可产生20～500kbp范围的15～25条酶切片段,并可以在PFGE凝胶上被很好的区分开.PFGE可在种的水平上区分布菌各种标准株,76株中国分离株可被分为39种PFGE类型,并聚为4大类.PFGE与传统分型方法比较,2者的一致性达63%.结论 脉冲场凝胶电泳图谱可对布鲁菌进行遗传学分类鉴定,在布鲁菌的分子流行病学研究中具有重要意义.     

肝硬化患者皮肤蜘蛛痣与肺内分流的关系

目的 探讨肝硬化患者皮肤蜘蛛痣与肺内分流的相互关系.方法 53例肝硬化患者根据有无皮肤蜘蛛痣,分为蜘蛛痣阳性组12例(23%)和蜘蛛痣阴性组41例(77%).所有患者均例行常规检查,包括经对比超声(CEE)筛查肺内右向左分流;门脉高压指标(食管静脉曲张破裂、门静脉主干内径(PV)、脾脏厚度(SP)).结果 蜘蛛痣阳性组与阴性组在肺内右向左分流的发生率(50%vs 27%)、门脉高压各征象[食管静脉曲张破裂(33%vs 22%)、PV(13.0±2.0)mm vs(13.6±3.2)mm、SP(56.2±16.6)mm vs (54.8±14.3)mm]的对比差异均无显著性(P＞0.05).结论肝硬化患者皮肤蜘蛛痣不能作为有肝外侵犯的体表标志.