WT1基因增强子构建位点对WT1基因启动子转录活性的影响

目的：以WT1基因启动子和增强子的功能片段为研究对象，探讨增强子构建在质粒的不同位点对基因启动子转录活性的影响。方法: 利用基因重组技术将WT1基因增强子的功能片段分别插入在已含有WT1基因启动子的质粒，pEWP的不同位点（MCS中的BamH I、EGFP 终止密码后的Not I和SV40polyA位点后的AflⅡ）中，将重组质粒转染慢粒白血病红白急变细胞株K562细胞、乳腺癌细胞株MCF-7细胞和人类胚胎肾转化细胞株293细胞，通过检测转基因细胞中EGFP的平均荧光强度来评估增强子对启动子的转录促进作用。结果: 通过基因重组技术分别构建了含有WT1基因启动子的载体，即pEWP，和含有WT1基因启动子和增强子的载体，即pEWPE、pEWPD和pEWPA。流式细胞仪检测EGFP的平均荧光强度，发现pEWPA在293细胞和K562细胞中能够增强WT1启动子的转录活性，而pEWPE和pEWPD则无增强作用。3者均不能在MCF7细胞中增强WT1启动子的转录活性。结论: SV40polyA位点后插入增强子能够有效地增强启动子的转录活性，且具有细胞特异性。     

正常供体外周血干细胞动员和采集的初步研究

目的探索正常供体外周血干细胞动员方法和采集结果.方法对3例拟做异基因干细胞移植的HLA相合的同胞姐妹进行G-CSF动员,剂量为300μg,每日2次皮下注射,并做临床及实验指标的动态观察.结果1例于动员后第4天采集1次,另2例于第4、5天各采集1次,获足量CD34+细胞用于移植,副作用可耐受,未见远期不良反应.结论G-CSF动员正常供体安全有效.     

自体外周血干细胞动员和采集的研究

目的　探索理想的血液肿瘤外周血干细胞动员方案。方法　选择 15例恶性血液病患者 ,14例应用米托蒽醌 (2 0mg/m2 ) 阿糖胞苷 (8g/m2 ) 粒细胞集落刺激因子 (G -CSF ,惠尔血 30 0 μg/d ,从白细胞 <1× 10 9/L开始至采集完成 ) (MAG) ;1例多发性骨髓瘤应用环磷酰胺 (4 g/m2 ) G -CSF(CG)。用CS - 30 0 0Plus血细胞分离机采集单个核细胞。处理血量约 2 0 0ml/kg ,历时 3～ 4h。直至CD34 细胞数 >4× 10 6/kg为止。 结果　 14例用MAG方案者中 ,一次采集即采到CD34 细胞 2× 10 6/kg以上者 11例 (79% ) ,其中 9例 (6 4% ,9/14)达 4× 10 6/kg以上。通过测定采集日外周血中CD34 细胞数可预测一次采集足量干细胞的可能性 (P <0 .0 0 1)。 2例部分缓解者动员后获完全缓解 ,1例Ph阳性小克隆和 1例AML1/ETO基因在动员后转阴。移植 14例可评价者中 10例存活至今 (3～ 5年 ) ,4例 (Ph 杂白、L2和L3型急淋、急单各 1例 )复发死亡。结论　MAG具有抗瘤和动员双重作用。外周血CD34 细胞数与采集成功与否相关性佳     

非亲缘异基因骨髓移植治疗恶性血液病的临床研究

目的　评价非亲缘异基因骨髓移植 (allo BMT)治疗恶性血液病的疗效及并发症。方法　予 13例恶性血液病患者非亲缘allo BMT ,预处理方案髓系白血病为改良BUCY ;急性淋巴细胞白血病 (ALL)和合并中枢神经系统白血病 (CNS L)的髓系白血病以全身照射 (TBI) +环磷酰胺 (CTX)为主的化疗。 13例均采用骁悉 (MMF)、CSA加短程MTX联合方案预防移植物抗宿主病 (GVHD)。结果　均较顺利完全预处理及移植治疗。移植后 17d(中位时间 )造血重建。GVHD发生率急性Ⅰ～Ⅲ度 38% ,Ⅲ～Ⅳ度 15 %。随访 2～ 30个月 ,荧光标记STR PCR定量检测 ,75 %患者供体细胞嵌合率(DM) >90 %。 12例非复发状况移植 ,至今存活 9例 ,无白血病生存率 (LFS) 75 %。移植相关死亡率30 %。结论　非亲缘allo BMT能有效地治疗或根治恶性血液病。     

伴SET-NUP214融合基因急性白血病异基因造血干细胞移植疗效分析

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗伴SET-NUP214融合基因急性白血病(SET-NUP214+AL)的疗效。方法回顾性病例系列研究。收集2014年12月至2021年10月在苏州大学附属第一医院和苏州弘慈血液病医院接受allo-HSCT治疗的18例SET-NUP214+AL患者的临床资料, 分析其疗效及预后, 采用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果 18例患者中男性12例, 女性6例, 年龄13～55岁, 中位数29岁。急性混合细胞白血病6例(髓/T表达3例、B/T表达2例、髓/B/T表达1例), 急性淋巴细胞白血病9例(急性B淋巴细胞白血病1例、急性T淋巴细胞白血病8例), 急性髓系白血病3例。所有患者确诊后接受诱导化疗, 17例患者化疗后获得完全缓解, 后续所有患者接受异基因造血干细胞移植。移植前状态:第1次完全缓解15例, 第2次完全缓解1例, 部分缓解1例, 未缓解1例。所有患者完全植入, 中性粒细胞植活和血小板植活的中位时间分别为12、13 d。随访时间4～80个月, 中位数23个月, 18例患者中15例存活, 死亡3例, 死因均为移植后复发。...     

MDS患者Treg细胞的变化

检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome MDS)患者CD4+调节性T细胞变化,探讨其在MDS发病机制中的作用。方法以CD3和侧向角设门,采用直接免疫三标法以流式细胞术检测38例初治MDS患者(RA 17例、RAS 1例、RAEB 14例、RAEB-t 6例)及11例正常对照组外周血CD3+ CD4+细胞上CTLA-4、PD-1、CD25数量和比例变化,并探讨与疾病进展的关系。结果MDS组CTLA一4、PD I．1、CD25在CD3 4-CD4+表达率分别为2．14％±1．25％(RA 1．51％±0．80％、RAEB／RAEB-t 2．65％±1．33％),1．44％±0．88％(RA 0．93％±0．63％,RAEB／RAEB-t 2．02％±0．76％),3．18％±2．11％(RA 2．80％±1．38％、RAEB／RAEB-t 3．41％±2．46％),均高于正常对照组的0．11％±0．12％, 0．09％±0．14％,1．65％±1．14％(P<0．01)。随着疾病进展,负性调控因素CTLA-4、PD-L1、CD25在RAEB／RAEB-t组亦较RA组显著增高(P<0．01)。结论与正常人免疫系统比较,MDS患者CD4+调节性T细胞升高,免疫负调控增强,并在免疫格局中占据主导地位。随着疾病进展,MDS患者免疫负调控亦相应增强,免疫监视功能低下,从而有助于恶性克隆扩张、逃逸。     

CAG预激方案联合伊马替尼治疗复发/难治性Ph+急性淋巴细胞白血病首例报道

目的:寻找有效治疗复发/难治性Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph ALL)的疗法。方法:以CAG预激方案联合伊马替尼诱导治疗复发/难治性Ph ALL病例1例。结果:该复发/难治Ph ALL患者经CAG方案联合伊马替尼诱导治疗后达缓解。结论:对于复发/难治性Ph ALL,CAG联合伊马替尼是一个值得尝试的方案。     

急性白血病患者肺部曲霉菌病的手术治疗及再发预防

 目的 报告4例合并肺部曲霉菌病的急性白血病病例。方法 4例患者均接受外科手术切除病灶,手术标本行常规HE染色。3例患者手术后接受抗真菌药物的再发预防。结果 4例患者均成功切除肺部曲霉菌球,组织病理检查的结果证实为曲霉菌感染,预防治疗使得所有患者成功接受进一步的化疗或造血干细胞移植。结论 手术治疗是合并肺部曲霉菌感染的急性白血病患者重要的辅助治疗手段,积极的再发预防可以保护患者接受进一步的化疗或造血干细胞移植。     

ABCG2与恶性血液病耐药相关性的研究进展

ABCG2作为一种跨膜半转运蛋白,参与了内源及外源有害物质的外排,对机体正常组织起到了保护作用,但同时也介导了对多种化疗药物的外排,引起多药耐药,使许多恶性肿瘤患者对化学药物治疗不敏感,直接影响到临床预后。本文将对ABCG2基因的单核苷酸多态性（SNP）、ABCG2与干细胞和酪氨酸激酶抑制剂（TKI）之间的关系的一些研究进展做简要介绍,同时还对ABCG2与恶性血液病耐药相关性的临床研究结果做回顾性分析,从中可以看出目前研究中存在的问题及未来的研究方向。     

反应停治疗浆细胞肿瘤的临床研究

目的 观察反应停（thaldomide)治疗难治性浆细胞肿瘤的有效性和毒性。方法 10例浆细胞肿瘤患者,反应停200－400mg每晚1次至少服用1个月。结果 部分缓解（PR）3例,进步3例,无效4例;副作用可耐受,便秘最常见（7／10）。结论 每日300－400mg反应停治疗难治性浆细胞肿瘤安全有效。