常用实验动物比较解剖学介绍及脏器病理取材规范方法探讨

我们针对常用的4种实验动物（大鼠、小鼠、犬和食蟹猴）的主要脏器比较解剖学和病理取材规范，做如下探讨：     

鱼胆中毒致急性溶血并急性肾功能衰竭1例

患者 ,男 ,5 0岁 ,因恶心、呕吐、腹泻、解酱油样尿 6ｄ,少尿 3ｄ入院。患者 6ｄ前因进服鲩鱼胆一颗约半小时后 ,即出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻 ,每次量约 10 0～2 0 0ｇ,每天 5～ 8次不等 ,第 2天即出现发热、体温 38 5℃、腰痛、解酱油样尿 ,在家自服中草药治疗 ,症状无缓解 ,3ｄ前始上述症状加重伴尿少 ,每日尿量 2 0 0～ 30 0ｍｌ,伴心悸、烦躁、气促不适 ,即到当地卫生院输用地塞米松、呋塞米等药治疗 ,病情未见好转而急诊送入院。体查 :血压17/ 10ｋＰａ,颜面及双下肢无明显浮肿 ,中度贫血面容 ,皮肤轻度黄染 ,巩膜中度黄染 ,双肺无…     

低氧诱导因子1α在高脂饮食诱导肥胖小鼠前列腺组织中的表达

目的:观察低氧诱导因子1α(HIF-1α)在高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠前列腺组织中的表达,以探讨缺氧对肥胖小鼠前列腺增生的作用。方法:将20只小鼠随机分为对照组(普通饮食)和高脂饮食组,各10只。高脂饮食组高脂饮食干预17周,测量小鼠体重,解剖取材测量前列腺重量,排水法测量前列腺体积,ELISA法检测血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(FFA)的含量;HE染色观察前列腺组织形态并测量其腺腔面积,免疫组化检测前列腺组织HIF-1α的表达。结果:①高脂饮食组小鼠体重为(42.55±3.01) g、前列腺重量(0.13±0.03)g、前列腺体积(0.14±0.03)ml、TG(179.29±65.19) mmol/L、LDL(66.88±1.93)g/L,均显著高于对照组[(28.94±2.17) g、(0.05±0.03) g、(0.05±0.02) ml、(115.77±25.25) mmol/L,(44.16±7.24)g/L](P0.01或0.05)。②组织病理学结果显示,对照组小鼠前列腺上皮表现为单层立方上皮和单层柱状上皮,高脂饮食组则主要表现为不规则上皮结构;高脂饮食组小鼠前列腺腺腔面积显著大于对照组[(18 453±7 311)μm~2vs(12 390±8 587)μm~2,P0.01]。③高脂饮食组前列腺组织HIF-1α积分光密度值明显高于对照组[(9.1±6.9)×10~6vs(2.0±3.6)×10~6,P0.01]。④相关性分析表明,前列腺体积与体脂肪重量(r=0.887,P0.01)、TG(r=0. 520,P=0.047)、LDL(r=0.772,P=0.010)呈正相关。结论:肥胖小鼠脂代谢异常使前列腺组织出现局部低氧从而引发BPH。     

免疫性非细菌性前列腺炎大鼠内环境因素关联性研究

目的：探讨前列腺组织蛋白结合免疫佐剂法诱导的SD大鼠非细菌性前列腺炎的炎症反应与内环境因素之间的关系。方法：30只大鼠随机分成3组,其中一组为阴性对照组,其它两组为试验组,第0、7天多点皮内注射浓度分别为20、40mg/mL的大鼠前列腺蛋白提纯液联合完全弗氏佐剂（1∶1的混悬液）1.0mL,腹腔注射百白破疫苗0.5mL,第21天皮内注射大鼠前列腺蛋白提纯液0.5mL,阴性对照组在相同时间和部位注射同等剂量的生理盐水,造模后第55天处死大鼠。结果：前列腺蛋白提纯液联合完全弗氏佐剂制作诱导SD大鼠前列腺炎后,可见前列腺间质有大量炎细胞浸润,以淋巴细胞为主,呈现明显的慢性炎症表现。免疫因素引起的慢性非细菌性前列腺炎可导致免疫球蛋白G（IgG）浓度明显升高（P〈0.05）,免疫球蛋白M（IgM）浓度明显降低（P〈0.05）,C-反应蛋白（CRP）和前列腺特异抗原（PSA）含量明显增加（P〈0.05）。结论：根据本实验的结果,免疫性非细菌性前列腺炎大鼠体内IgG、IgM、CRP和PSA含量呈现关联性变化。     

如何提高实验动物的交配成功率

生殖毒性研究旨在探讨受试物对实验动物生殖和发育的影响,动物妊娠是必不可少的环节。提高交配成功率,成为试验顺利和成本降低的关键。现就大鼠和家兔两种实验动物介绍如下。1如何提高大鼠交配成功率1.1合理安排雄鼠数量一般采用2∶1或1∶1的雌雄配比方式交配来获得孕鼠,其平均     

利用基因芯片法探索人前列腺癌细胞PC-3 M在裸鼠体内淋巴道转移相关基因

背静与目的：前列腺癌是欧美国家最常见的一种男性恶性肿瘤，近年来在我国该病也有明显上升趋势。目前认为肿瘤转移是由于一部分肿瘤细胞在肿瘤生长过程中发生基因水平的变化而改变性质变成“转移克隆的细胞”，这部分细胞能突破机体防御系统最终到达远处组织器官形成转移灶。本实验旨在探索人前列腺癌细胞PC-3M在裸鼠体内淋巴道转移的相关基因，为进一步研究前列腺癌淋巴道转移机制打下一定的基础。方法：将PC-3M细胞原位接种于裸鼠体内两个月后分别从原发灶和淋巴结转移灶分离肿瘤细胞，通过体外侵袭和粘附实验，比较两者体外侵袭和粘附能力的差异，并应用基因芯片技术，检测两细胞在转移相关基因丰度水平上的差异。结果：淋巴结转移灶分离的肿瘤细胞的体外侵袭及粘附能力显著高于原发灶内分离的肿瘤细胞，大约分别为后者的2．5倍和1.5倍；而且前者在一些转移相关基因丰度水平上明显高于后者，这些基因按其编码产物的属性和功能可划分为：①编码降解细胞外基质（ECM）的蛋白水解酶包括组织蛋白酶、基质金属蛋白酶；②编码转录因子家族成员；③编码参与肿瘤细胞异质性粘附的分子；④编码细胞表面受体。结论：原发灶内的前列腺癌细胞和淋巴结转移灶内的肿瘤细胞在侵袭和粘附能力上存在显著差异，经鉴定的差异表达分子可能在前列腺癌细胞由原发灶迁移到远处组织器官的转移过程中发挥重要作用。     

度他雄胺对大鼠附睾精子成熟和生育的影响

目的通过度他雄胺对大鼠附睾精子和生育的影响,探索调节雄性生育的睾丸后作用靶点。方法使用度他雄胺20和40 mg/(kg.d)大鼠灌胃给药,连续2周。给药结束后雄雌鼠按1∶2合笼,计算生殖指数;采用计算机辅助精子分析系统分析精子活力和形态;采用SYBR-14和PI双重荧光染色计算精子存活率;采用Elisa法测定大鼠睾酮(T)和双氢睾酮(DHT)血清浓度;采用HE染色法对各组睾丸、附睾进行组织学分析。结果度他雄胺低、高剂量组双氢睾酮浓度均显著下降,分别为0.54和0.28 nmol/L(P<0.01),精子活力明显降低,分别为39.0%和28.7%(P<0.01),畸形率分别增加为10.3%和15.6%(P<0.05),最后受孕率分别降为62.5%和38.4%。而睾酮水平和交配指数均无明显变化(P>0.05),睾丸和附睾亦无明显病理学改变。结论度他雄胺通过抑制DHT生成,影响附睾精子成熟而导致大鼠不育,为今后男性避孕和不育药物研发提供了新思路。     

OC-3-VGH卵巢癌细胞简捷培养方法的研究

目的：探索简捷细胞培养方法并观察该方法对癌细胞特性的影响。方法：将复苏的OC-3-VGH卵巢癌细胞株不经洗涤直接移至细胞培养瓶,加入10ml RPMI-1640培养液,放入培养箱,余同传统方法,观察细胞生长情况;取细胞悬液,以细胞数4×10^6／ml,0.2ml／只接种至BALB／c雌性裸小鼠皮下,2个月后处死,取肿瘤组织制片,并与传统培养方法结果进行比较。结果：两种方法培养的细胞均生长活跃,皮下接种7d左右,裸鼠长出肿瘤,组织学检查未见明显差异。结论：改良细胞培养方法减少了传统方法的繁琐步骤,方便细胞培养。     

雌激素诱导SD大鼠前列腺炎与内环境改变的关系

目的通过雌二醇诱导SD雄鼠慢性前列腺炎,探讨SD雄鼠的内环境改变的关联性作用,为前列腺炎发生机制和治疗提供一条实验性途径。方法 3%戊巴比妥麻醉,无菌条件下去势手术;术后动物恢复5 d,30只雄鼠按照体重随机分组,每组10只。第6天低剂量组皮下注射0.25 mg/kg的雌二醇,高剂量组皮下注射1.25 mg/kg的雌二醇,溶媒对照组注射橄榄油,每天1次,连续30 d。结果与溶媒对照组比较,低、高剂量组白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)和红细胞压积(HCT)均降低(P0.01);前列腺酸性磷酸酶(PAP)明显降低(P0.01);高剂量组睾酮含量明显增加(P0.01),C-反应蛋白(CRP)在低、高剂量组也呈现增加的趋势,但差异没有统计学意义;溶媒对照组和给药组前列腺组织大体解剖表面未见明显差异,光学显微镜下,溶媒对照组前列腺组织结构完整、腺腔和间质无炎性细胞浸润,高剂量组和低剂量组的前列腺间质均可见炎细胞浸润;低、高剂量组大鼠脾脏均可见棕黄色颗粒沉淀,其余脏器无明显改变,胸腺、脾脏及其脏器系数均明显降低。结论根据本实验结果,雌激素引起的慢性非细菌性前列腺炎可导致内环境血液学、血清生化,激素水平、脏器和脏器系数的一系列改变。     

睾丸组织固定法优选研究

目的:从福尔马林-蔗糖-醋酸混合液(FSA固定液)、Bouin液和福尔马林3种固定液中优选一种,用于对睾丸组织的固定。方法:取健康SD大鼠双侧睾丸,分别用3种固定液固定,然后制成5μm厚切片并行HE染色,观察不同方法固定睾丸组织结构及染色效果。结果:经福尔马林-蔗糖-醋酸混合液和福尔马林固定的睾丸组织结构较清楚,但组织易收缩,而经Bouin固定液固定的睾丸组织结构和染色效果俱佳。结论:3种固定液都可用于固定睾丸组织,以Bouin效果最好。