石斛合剂对高脂高糖糖尿病大鼠心肌细胞Ca^2+代谢的影响

目的以糖尿病心肌病大鼠为研究对象,探讨石斛合剂对糖尿病心肌病心肌细胞Ca^2+代谢的影响。方法 Wistar大鼠24只,取5只作为正常组,余19只采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素腹腔注射进行糖尿病心肌病造模。成模后,随机分为模型组、二甲双胍组、石斛合剂组。二甲双胍组、石斛合剂组分别予二甲双胍、石斛合剂灌胃,正常组、模型组予生理盐水灌胃。4周后,测空腹血糖,取左心室心肌组织进行组织病理学观察和心肌细胞内游离钙(MyoCa^2+)浓度测定,Western blot法检测肌浆网Ca^2+-ATP酶(SERCA2a)、L型钙通道α1C亚单位蛋白(CACNA1C)蛋白表达,RT-PCR法测定SERCA2a mRNA表达。结果石斛合剂组心肌纤维较模型组、二甲双胍组排列整齐,断裂较少。与正常组比较,模型组血糖、心肌细胞MyoCa^2+含量和CACNA1C蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05),SERCA2a mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,石斛合剂组血糖、心肌细胞MyoCa^2+含量和CACNA1C蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05),SERCA2a mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05);二甲双胍组血糖明显降低(P<0.01)。与二甲双胍组比较,石斛合剂组心肌细胞MyoCa^2+含量明显降低(P<0.01,P<0.05),血糖、SERCA2a mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论石斛合剂通过提高SERCA2a mRNA和蛋白表达,加快摄取Ca^2+的速率,降低细胞质Ca^2+负荷,缓解钙超载,最终达到维持糖尿病心肌病钙稳态的作用,有效维持心肌细胞的正常收缩舒张功能;其降糖作用不是预防糖尿病心肌病的主要机理,而在于抑制CACNA1C蛋白表达,抑制钙诱导钙释放过程。     

石斛合剂对老年糖尿病大鼠神经系统的保护作用

目的探讨石斛合剂对老年糖尿病大鼠神经系统的保护作用。方法对Wistar大鼠进行高糖高脂喂养16个月,建立老年糖尿病模型,进行石斛合剂序贯方临床等效药量灌胃治疗。取大鼠肝脏组织进行全基因组表达谱芯片及探索者蛋白芯片测试并进行数据分析。结果模型组大鼠与正常组存在差异的神经系统相关功能基因63个,分布于14个通路,其中经药物治疗"纠偏"基因49个。13种蛋白表达在治疗后有所改善,分别属于细胞因子、神经疾病特异基因、细胞骨架蛋白、铁转运相关蛋白等。结论石斛合剂序贯治疗后的糖尿病大鼠与正常大鼠在转录、蛋白组学的层面上更加接近,对神经系统直接相关的多条通路具有保护作用。     

Effect of Yunvjian on Expression of Islet Autophagy Gene Beclin of GK Rat

目的 探讨滋阴清热的玉女煎治疗自发性2型糖尿病GK大鼠胰岛自噬基因Beclin表达的变化. 方法 GK大鼠分为模型对照组和观察组,同品系的Wistar大鼠作正常对照组；观察组用玉女煎灌胃,另2个对照组用生理盐水灌胃,每天1次,连续4周.取胰腺,用免疫组化方法检测胰岛自噬基因Beclin的表达；电子显微镜观察胰岛β细胞自噬的形态学变化. 结果 玉女煎组胰岛自噬基因Beclin的表达和GK对照组相比显著降低,而和Wistar大鼠正常对照组之间没有显著差异；电镜下可见对照组GK大鼠胰岛β细胞内有较多的自噬体. 结论 自噬参与了2型糖尿病的病理生理过程,玉女煎可降低胰岛β细胞自噬基因Beclin的表达.     

跑台运动训练对脑缺血大鼠TGF-β1/Smad3通路蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 观察跑台运动训练对脑缺血大鼠脑缺血周边区组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）及其受体Smad3蛋白表达水平及细胞凋亡的影响,探讨跑台运动训练促进大鼠脑缺血后神经功能恢复的相关机制。 方法 取成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,按随机数字表法分为假手术组（n=6）、模型组（n=12）和运动组（n=12）。模型组和运动组大鼠采用改良的Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)脑缺血动物模型,假手术组大鼠手术方法同模型组和运动组,但是不插入线栓。运动组于造模成功后24 h采用跑台训练仪进行跑台运动训练,其余2组则不进行运动训练。采用修正的神经功能缺损评分方法(mNSS)评价模型组和运动组大鼠造模后第3天、7天及14天的神经功能,并于造模后14 d断头取脑。采用Western blot法检测脑缺血周边区组织中TGF-β1及Smad3蛋白的表达情况,采用TUNEL法检测脑缺血周边区组织中细胞凋亡情况。 结果 造模后第7、14天,运动组的mNSS评分分别为(7.06±0.79)分和(6.33±1.15)分,分别于模型组同时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);运动组大鼠的TGF-β1及Smad3蛋白表达均较模型组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01);运动组大鼠脑缺血周边区TUNEL染色阳性细胞较模型组明显减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。 结论 跑台运动训练能够促进脑缺血后大鼠神经功能恢复,其机制可能与上调脑缺血周边区组织中TGF-β1/Smad3蛋白表达,进而抑制细胞凋亡有关。     

钝顶螺旋藻异藻蓝蛋白多克隆抗体的制备

异藻蓝蛋白（allophycocyanin,APC）是螺旋藻细胞中的主要蛋白成分之一,具有多种生理功能和广阔应用前景。本研究采用纯化的钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）APC为抗原,免疫新西兰兔,制备APC的多克隆抗体。 ELISA法提示制备的抗体效价高达1∶32000, western blot印迹法确定获得的抗体能与APC产生特异性免疫反应。这为今后进一步开展螺旋藻APC的相关研究提供了有力的工具。     

基于归因理论的本科检体诊断实训考核常见错误解析

检体诊断学具有很强的实践性与操作性。归因理论是人们对自己成功或失败的行为和结果进行了解的重要理论,笔者应用此理论,通过对学生实训考核过程中存在的错误进行有效分析来帮助学生了解自我,找出自身存在的优势和劣势。并为下一步的教学工作,提供更具体的、可行性的修整方案。     

复方石斛合剂调节胰岛素受体表达促进HepG2细胞糖代谢

目的 探讨复方石斛合剂增加HepG2细胞胰岛素信号促进葡萄糖代谢的机制.方法 以高胰岛素培养HepG2细胞24 h,诱导胰岛素抵抗(IR)状态,继以10％复方石斛合剂的含药血清干预48 h,测定细胞6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性,RT-PCR与免疫印迹胰检测岛素受体mRNA与蛋白水平的表达.结果 高浓度胰岛素能降低6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性,降低胰岛素受体的表达;复方石斛合剂的治疗能增加6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性(P＜0.05),促进胰岛素受体的转录与翻译水平表达(P＜0.05),逆转高胰岛素的下调影响.结论 高浓度胰岛素可诱发IR,复方石斛合剂能增加HepG2细胞胰岛素受体的表达,提高葡萄糖分解代谢关键酶活性,缓解IR.     

NLRP3在缺血再灌注损伤中的作用及意义

缺血再灌注损伤（ischemia—reperfusion injury,IRI）是导致多种疾病死亡的主要原因,如心肌梗死、缺血性中风、急性肾损伤、循环骤停、睡眠呼吸暂停综合征等。在创伤性休克、器官移植、外科手术、血栓、体外循环心脏手术时都可以出现IRI。如何预防和治疗缺血再灌注损伤是外科医师,特别是心胸血管外科和器官移植外科医师面临的共同挑战。近年来,越来越多的研究表明先天免疫在缺血再灌注的炎性损伤中发挥着关键的作用,其中NLRP3作为先天免疫重要的模式识别受体参与了缺血再灌注的炎性损伤。本文重点综述NLRP3在缺血再灌注损伤中的作用与意义。     

电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素和突触后致密物-95表达的影响

目的观察电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素(SYN)和突触后致密物-95(PSD-95)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的介入时机。方法 SAMP8小鼠48只随机分为模型组、3月龄电针组、6月龄电针组和9月龄电针组,每组12只,选取同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组。电针组电针"百会""大椎""肾俞",频率2 Hz,每日1次,8 d为1个疗程,疗程间隔2 d,共3个疗程。各组均在10月龄取材,选择皮质及海马区,采用免疫组化和Westernblot检测突触相关蛋白SYN、PSD-95的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠皮质及海马SYN和PSD-95蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各电针组小鼠皮质及海马SYN、PSD-95蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与3月龄电针组比较,6月龄电针组、9月龄电针组皮质及海马SYN、PSD-95蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论电针可促进SAMP8小鼠皮质及海马SYN、PSD-95蛋白的表达,改善突触功能,且早期电针治疗效果最明显。     

多种教学法在病理学教学中的应用

病理学是研究疾病发生发展规律、阐明疾病本质的一门医学基础学科,是基础医学与临床医学之间的桥梁.病理学学习的特点是基本概念多且抽象,各种病变的肉眼和镜下形态描述复杂且相似.因此,如何激发学生学习兴趣,提高病理学课堂教学效果,是每一位病理学教师面临的重大课题.笔者结合自身多年的课堂教学体会,对课堂上可采用的多种教学方法进行探讨.