SEN病毒D亚型ORF1-C端基因的克隆、表达和鉴定

目的:获得SENV-D亚型ORF1-C端蛋白基因序列,并进行表达,为进一步研究及诊断、治疗应用奠定基础.方法:用PCR法从SENV阳性血清中获得SENV-DORF1C端基因,测序验证后,构建了pQE30-SENV-D重组表达质粒,并经过转化E.coli M15,IPTG诱导表达,Western blot分析表达结果.结果:获得了正确序列的SENV-D亚型ORF1-C端蛋白基因序列,表达出Mr约为38×103的蛋白.表达蛋白能与患者血清中相应的抗体结合,发生抗原抗体反应.结论:成功获得并表达了SENV-D-ORF1-C端蛋白,并经Western blot印迹法证实能与阳性血清中的抗体发生抗原抗体反应,有可能用于检测SENV-D抗体.为今后进一步研究有助于疫情监测及早期发现感染者的抗体奠定了坚实的基础.     

疔毒丸对小鼠巨噬细胞活性抑制作用的观察

观察了疗毒丸对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明,疔毒丸及其主要成分巴豆霜对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性有明显的抑制作用。从而提示临床上使用疔毒丸时,不可忽视它可能抑制免疫功能的副作用。     

陕西、青海、新疆三省(区)部分人群庚型肝炎病毒血清学调查

目的：调查陕西、青海、新疆三省（区）部分人群庚型肝炎病毒（HGV／GBV）血清学特征。方法：采用ELISA方法，共调查三省（区）1469份血清中GBV－IgG抗体。结果：少数民族血清GBV－IgG抗体的阳性率（藏族4．11％，蒙古族5．36％，维吾尔族4．55％，回族4．00％）略高于汉族（1．36％－1．73％），但差异无显著性（P＞0．05）；吸毒人群GBV－IgG阳性率（11．30％，34／301）明显高于正常人群（2．44％，18／736），（P＜0．01）；献血员GBV－IgG阳性率为1．02％－7．68％。结论：三省区民族间GBV－IgG抗体阳性差异无显著性，血源性传播是其重要途径，应加强对献血员及吸毒人员的监管。     

碱性MAGE家族新成员restin在大肠杆菌中的表达和抗体制备

目的:从维甲酸诱导的白血病细胞系HL60中,克隆编码219个氨基酸的新基因restin,构建原核表达载体、制备抗血清并进行初步应用。方法:采用PCR技术,以维甲酸诱导的白血病细胞的cDNA为模板,扩增出restin的编码区。将其克隆入大肠杆菌表达载体中。经过温度诱导获得restin表达蛋白。利用SDS-PAGE纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制备该蛋白的抗血清。以该抗体做间接免疫荧光,初步观察restin在COS-7细胞内的表达分布。结果:大肠杆菌中表达的restin蛋白的Mr为26000。将其初步纯化后免疫新西兰白兔制备的抗血清,用Westernblot检测其效价为1∶800。间接免疫荧光显示,restin蛋白主要分布在细胞核内。结论:成功地制备抗restin的抗体,为进一步研究restin蛋白在组织中的表达、细胞内亚定位以及信号转导通路提供了前提条件。     

饰胶蛋白（Decorin）基因的cDNA克隆与表达

目的 通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因ｃＤＮＡ克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法 应用ＰＣＲ技术从Ｔ细胞ｃＤＮＡ文库获得饰胶蛋白全长基因ｃＤＮＡ片段。并克隆到ｐＵＣ１９载体中,采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧末端终止法测定全部ｃＤＮＡ序列,将测序正确的饰胶蛋白ｃＤＮＡ序列插入ｐＧＥＸ－４Ｔ－１表达载体中,经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切后１．２％凝胶电泳鉴定,ＩＰＴＧ诱导表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析。结果 克隆的饰胶蛋白ｃＤＮＡ序列与ＧｅｎＢａｎｋ中ＡＦ１３８３００记载的序列完全一致,所表达的融合蛋白质分子量与理论计算值（６５．６ＫＤ）也一致并为可溶性蛋白。结论 本研究成功地克隆了饰胶蛋白基因和表达了ＧＳＴ－Ｄｅｃｏｒｉｎ融合蛋白。     

HPLC-MSn法筛选丹参中丹酚酸类成分的SPE预处理工艺

目的:研究丹参药材中丹酚酸类成分的固相萃取预富集方法.方法:使用C-18固相萃取柱和液相色谱-离子阱多级质谱联机检测技术,通过固相萃取小柱预处理样品,电喷雾多级质谱负离子模式全扫描检测,考察影响回收率的4个主要因素,即泵真空度、固相萃取小柱上样量、洗脱剂用量及洗脱速率,利用正交实验进行萃取条件的优化.结果:最佳萃取条件为:真空度0.02×106Pa,上样量0.75mL,洗脱剂用量15mL,洗脱速率1.0mL·s-1.结论:本方法操作简单,准确可靠,可作为丹参中丹酚酸类成分的前处理方法.     

血管淋巴样增生伴嗜酸性粒细胞增多症临床病理观察

目的：探讨血管淋巴样增生伴嗜酸性粒细胞增多症(angiolymphoid hyperplasia with eosinopilia, ALHE)的临床病理学特征、免疫组织化学染色(immunohistochemical stain,IHC)及鉴别诊断。方法：对3例ALHE进行临床病理分析及免疫组化研究,并进行文献复习。结果：2例ALHE为女性患者,1例为男性患者,病变位于头面部真皮内,组织形态以小到中等大小血管增生为主,血管内衬胞浆丰富的上皮样内皮细胞,血管周围见大量炎细胞浸润。免疫组化染色显示CD34、CD31、CD3阳性,CD20及CK阴性。结论：ALHE是一种少见的、良性的血管瘤,诊断主要依靠特征性组织学特点。     

硫酸镁的新用途

硫酸镁又称泻盐,有近三百年制取历史,是一种古老的盐类泻药。临床上内服用作导泻、利胆和十二指肠引流,外敷用作消炎、镇痛,注射用作镇静、止痉。尽管目前硝普钠、阿方那特取代了硫酸镁在高血压危象中的治疗作用,但硫酸镁仍是治疗妊娠高血压综合症的首选药物。近年来由于镁在生化学中得到较多的研究,其盐类硫酸镁又有了许多新用途。本文将硫酸镁新用途作一介绍,有助于临床参考。一、治疗心律失常:     

异基因造血干细胞移植术后环孢素A血药浓度的监测分析

目的 对2012年4月至2013年5月在河南省人民医院血液内科所进行的异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）患者全血中环孢素A（CsA）浓度的监测结果 进行收集和分析,来探讨其在临床应用中的有效性及安全性,为在临床和药学工作的同仁更好地开展CsA浓度监测及相关科研工作提供一定的参考。方法 采用荧光偏振免疫法对9例异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）患者进行常规CsA血药浓度监测,并结合临床进行归纳、分析、统计。结果 监测异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）患者CsA血药浓度共159例次：达到有效血药浓度范围内的（100—400μg／L）为107例,占总监测人数的67．3％;低于100μg／L有33例次,占到20．8％;而高于400μg／L的有19例次,占11．9％。9例Allo—HSCT患者CsA平均血药浓度为（210．89±149．87）μg／L,每位患者的血药浓度波动较大,且个体差异也较大。结论 临床上对CsA剂量、剂型的调整皆以其血药浓度为依据,并发现排斥反应与移植物抗宿主病（GVHD）以及CsA毒副作用的发生均与全血CsA浓度改变密切相关。     

李淑良散风法治疗慢喉痹

慢喉痹是临床常见病、难治病,有极高的复发率.其病机多与阴虚、火热等有关.李淑良主任认为风邪为患是该病的重要的病机,风邪袭于阳位,咽喉正当其冲,风邪留恋而出现咽痒、咽干、咳嗽等症状.治疗当先散风,给邪以出路,使邪从上而解.疗效满意.