慢性乙型肝炎与HLA-A和DRBl基因关联研究

乙肝病毒(HBV)的清除和预后转归在很大程度上取决于宿主的免疫应答。人类白细胞抗原(HLA)复合体是调节机体免疫应答的重要基因群，为此，我们利用基因芯片技术分析了上海地区慢性乙型肝炎患者HLA Ⅰ类中的A位点与HLA Ⅱ类中的DRB1位点的基因分布，以探索乙型肝炎慢性化与HLA-A和HLA-DRB1的可能关联。     

慢性乙型肝炎辨证与免疫的相关性研究

慢性乙型肝炎的发病与机体的免疫应答密切相关。从五个方面 ,即 :与细胞因子的关系、与T细胞亚群的关系、与NK细胞的关系、与免疫球蛋白的关系、与红细胞及其他免疫功能的关系。指出 ,实证多有细胞免疫及体液免疫增强或接近正常 ;虚症多有细胞免疫降低 ,以脾胃阳虚型最为突出。免疫功能的检测对证型的制定具有一定的作用。     

慢性乙型肝炎与肝硬化患者乙型肝炎病毒S蛋白变异分析

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者、肝硬化患者乙型肝炎病毒(HBV)S蛋白变异的差异及其临床意义。方法选取CHB患者114例,其中慢性HBV携带者41例(慢性HBV携带组)、非活动性乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者38例(非活动性HBsAg携带组)、肝硬化组35例(肝硬化组)。采用测序法检测所有对象的HBV S蛋白基因序列。结果慢性HBV携带组、非活动性HBsAg携带组与肝硬化组之间年龄和HBV DNA载量差异均有统计学意义(P0.01),性别及HBV基因型差异均无统计学意义(P0.05)。肝硬化组HBV S蛋白总体变异率明显高于非活动性HBsAg携带组和慢性HBV携带组(P0.05、P0.01)。慢性HBV携带组、非活动性HBsAg携带组与肝硬化组S蛋白的主要亲水区(MHR)外变异率及细胞毒T淋巴细胞(CTL)+辅助性T淋巴细胞(Th)免疫表位区变异率依次升高(P0.01)。3组之间S蛋白的MHR及位于MHR内的"a"决定簇、LOOP1和LOOP2的变异率差异均无统计学意义(P0.05),MHR外的非免疫表位区变异率差异亦无统计学意义(P0.05)。慢性HBV携带组中有1例患者同时出现MHR外Th免疫表位区、CTL免疫表位区和非免疫表位区3个位点变异,1例患者出现MHR与MHR外Th免疫表位区2个位点变异,其他患者均为单点变异,且MHR外CTL+Th免疫表位区与非免疫表位区变异率相当,呈随机分布。非活动性HBsAg携带组有5例(13.15%)患者出现2个位点以上的变异,肝硬化组有9例(25.71%)患者出现2个位点以上的变异,且2个组的变异位点集中于MHR外CTL+Th免疫表位区。结论 HBV S蛋白MHR外,尤其是MHR外CTL+Th免疫表位区变异不仅与HBeAg阴性血清学状态相关,也与肝硬化相关。     

全血标本冷藏保存一周对血清HBV DNA复测结果的影响

目的 探讨全血标本冷藏保存1周对血清乙肝病毒DNA(HBV DNA)复检结果的影响.方法 采集乙肝患者外周全血150例,及时2～8℃保存,分别于采血后第1天和第7天用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测血清HBV DNA水平.结果 150例全血标本第1天、第7天时血清HBV DNA载量分别为:5.50±1.46、5.64±1.53,结果呈小幅升高趋势,但两组差异无统计学意义(P＞0.05);以第1天结果为基准,第7天时结果偏倚绝对值为(4.26±0.03)％,其中15例偏倚大于±7.5％.结论 以分析中质量控制为前提,全血标本冷藏保存l周对血清HBV DNA复测结果的影响符合ISO 15189室内质控要求,能满足临床追加检测或复查申请;操作误差和FQ-PCR方法学的不足仍是造成复测较大偏差的最主要原因.     

夏枯草及抗炎一号注射液经肝动脉联合灌注治疗大鼠肝癌作用机制的初步探讨

目的:探讨夏枯草及抗炎一号注射液经肝动脉联合灌注治疗大鼠肝癌的作用机制。方法:建立30只二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠晚期原发性肝癌模型,随机分为中药组、化疗组和盐水组,每组各10只。经胃十二指肠动脉至肝固有动脉分别灌注生理盐水0.5ml、夏枯草注射液0.6g/kg 抗炎一号注射液0.45g/kg、顺铂(DDP)4mg/kg 羟基喜树碱(HCPT)1.5mg/kg 5-氟尿嘧啶(5-FU)34mg/kg。应用流式细胞仪(FCM)检测治疗后各组大鼠肝癌细胞的凋亡情况。结果:盐水组、化疗组和中药组均存在不同程度的细胞凋亡现象,与盐水组比较,中药组和化疗组肝癌细胞凋亡百分率均显著增高(P<0.01),但化疗组和中药组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:夏枯草与抗炎一号注射液可诱导大鼠肝癌细胞凋亡,其程度与化疗药物相似。     

止血环酸抑制黑色素合成的实验研究

目的 观察止血环酸抑制黑素瘤细胞的黑素合成作用并探讨其机理。方法 比色法和免疫组化法分别用于B16黑素瘤细胞黑素含量测定和酪氨酸酶测定，氨基酸自动分析仪和高效液相色谱用于酪氨酸酶代谢的测定。结果 止血环酸虽不能抑制B16黑素瘤细胞生长和减少黑素瘤细胞酪氨酸酶含量，但能干扰酪氨酸酶对酪氨酸的催化作用，减少黑素合成。结论 止血环酸是通过干扰酪氨酸酶的酪氨酸催化作用抑制黑素合成。     

HLA基因多态性与临床疾病易感性的研究

人类白细胞抗原HLA的检测最初用于器官移植，但近年来，HLA作为免疫遗传基因在与免疫调节有关的疾病中所扮演的重要角色愈来愈受到重视。现就HLA的分型方法及与其某些临床疾病的关系作一综述。     

慢性再生障碍性贫血CD8~+T细胞CD28表达与中医辨证分型关系的探讨

目的 探讨慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)患者外周血CD8^+T细胞CD28分子的表达与中医辨证分型的关系、方法采用流式细胞仪技术,测定门诊和住院CAA患者45例、健康对照人群24名的外周血CD8^+T细胞CD28分子的表达水平,从免疫学角度讨论其与中医分型关系一结果(1)CAA患者的CD8、CD28、CD8^+CD28^+表达水平及CD8^+CD28^+／CD8^+CD28均高于健康对照组(P<0．01,P<0．05)。(2)CAA肾阴虚患者CD28、CD8^+CD28^+表达水平及CD8^+CD28^+／CD8^+CD28均高于肾阳虚患者(P<0．01,P<0．05)。结论 (1)CAA患者外周血共刺激分子CD28异常高表达,提示CD28失调可能在CAA免疫发病中起重要作用、(2)CAA患者外周血CD28、CD8^+CD28^+的表达水平及CD8^+CD28^+／CD8^+CD28可以作为CAA辨证分型的参考指标,肾阴虚患者的免疫紊乱较肾阳虚患者严重。     

Beckman Coulter LH750血细胞分析仪异常细胞报警提示功能的评价

目的 通过对Beckman Coulter LH750血细胞分析仪所提示的异常细胞报警信息与手工镜检的对比,评价其在实际工作中的作用.方法 采集静脉全血2 mL,检测448例有异常细胞报警提示的样本及400例无异常提示的样本,并同步进行手工镜检白细胞分类.结果 仪器对异常细胞报警提示功能的诊断特异性为75.8%,灵敏度为98.5%,阳性预测值为75%,阴性预测值为98.5%.结论 该仪器具有较高的灵敏度及特异性,能较好地大批量检测临床样本.但在实际工作中对其异常提示应加以分析并制定合理的复检规则,最终以手工镜检分类为准.